MicroRNA-30a调控赖氨酰氧化酶表达改变在主动脉夹层发病机制中的研究

发布时间：2020-09-19 14:34

　　 目的:通过人体标本和动物模型以及细胞学实验,探讨赖氨酰氧化酶(LOX)和主动脉疾病发病机制之间的关系,并通过构建慢病毒载体,对在大鼠体和大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行转染,抑制或上调microRNA30a的表达水平,通过观察,主动脉夹层模型的成功率和LOX及相关蛋白的表达,探讨microRNA30a--LOX轴在主动脉夹层发病机制中的作用。方法:采取我院行主动脉夹层手术病人主动脉标本(21例)、主动脉瓣狭窄后升主动脉瘤形成(18例)和行移植手术病人(5例)剪除的主动脉标本,进行免疫组化和EVG染色以及western-blot,观察其LOX MMP-8的变化。取SD雄性大鼠,于3周龄时给予BAPN,同时尾静脉注射microRNA30a的慢病毒载体,和空白病毒载体,对照其组间夹层发生率的差别,以及和空白组未喂食BAPN组之间的模型成功概率,并取其胸主动脉组织采用rt PCR及western-blot观察microRNA表达差异和相关蛋白的表达差异。采用大鼠胸主动脉平滑肌细胞,进行慢病毒过表达和抑制表达microRNA30a的病毒转染,观察其转然后的LOX及相关蛋白水平是否有变化。结果:lox在主动脉夹层和非主动脉夹层的病理组织中表达具有差异(p0.05),进行microRNA30a过表达转染组的lox表达下降,大鼠更易形成主动脉夹层,相反抑制microRNA30a组的大鼠夹层形成率偏低,其主动脉组织蛋白检测,LOX具有明显差异。结论:microRNA-lox轴在主动脉夹层形成的机制中具有调节作用,更深入的机制研究还需进一步进行。
【学位单位】：中国医科大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R543.1
【部分图文】：

图 1 经石蜡包埋后的主动脉标本和石蜡切片3.2 HE/EVG 染色结果：DEAB CF图 2：三种类型主动脉疾病标本的 HE 及 EVG 染色HE 染色见，相比于主动脉窄后扩张和正常主动脉，主动脉夹层病变病人的主动脉组织胞外组织排列紊乱，无序，中层组织中断，周围伴有炎性细胞浸润和出血。EVG 弹力纤维特

14图 2：三种类型主动脉疾病标本的 HE 及 EVG 染色HE 染色见，相比于主动脉窄后扩张和正常主动脉，主动脉夹层病变病人的主动脉组织细胞外组织排列紊乱，无序，中层组织中断，周围伴有炎性细胞浸润和出血。EVG 弹力纤维特异染色见主动脉夹层组织中弹力纤维成分明显减少，排列紊乱、中断。3.3 免疫组化结果：对于不同病变的主动脉组织进行主动脉 LOX、MMP8 的特异性染色

图 3： 不同类型疾病主动脉标本 LOX 特异性免疫组化染色图中 A/D/E 为正常主动脉；B/E/H 为主动脉窄后扩张组织；C/F/I 为主动脉夹层主动脉；分别于 10 倍镜下（A/B/C）200 倍下（D/E/F）400 倍下（G/H/I）放大 200 倍观察：细胞核呈深蓝色，LOX 阳性呈棕色。

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本文编号：2822630