1研究背景及目的糖尿病心肌病(Diabetic Cardiomyopathy,DCM),是继发于血糖升高的心肌纤维化改变,与高糖环境下大量致炎因子分泌入血、刺激心肌组织纤维增生及胶原沉积密切相关。IL11属于IL6家族成员,在心肌纤维化过程中的决定性作用——IL11位于促心肌纤维化途径的关键因子——转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGFβ1)的下游。而高糖环境可引起慢性低度炎症反应,增加成纤维细胞中IL11的表达,加速组织纤维化进程。二甲双胍(Metformin)因其降糖、抗炎、抗肿瘤、调节脂代谢等作用,被广泛应用于临床。其基于TGFβ信号通路的抗纤维化作用,已被学术界公认,但具体机制及作用靶点尚未完全明确。本实验通过检测TGFβ1、IL11及合成IL11所需上游因子,探究IL11是否为二甲双胍抑制TGFβ1通路的作用靶点,为二甲双胍是否有可能治疗心肌纤维化提供依据。2材料和方法2.1实验对象及取材4周龄SPF级SD雄性大鼠40只,体重(89.620±7.420)g,适应性喂养7天,后随机分为对照组(C组,n=10)、2型糖尿病组(D组,n=10)、2型糖尿病二甲双胍治疗组(D+Met组,n=10)、2型糖尿病胰岛素治疗组(D+Ins组,n=10)。2型糖尿病造模方法为:高脂高糖饮食喂养、第8周大鼠腹腔注射30mg/kg链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)。D+Met组,给予二甲双胍[200mg/(d·Kg)]灌胃;D+Ins组,给予长效胰岛素皮下注射。12周末(16周龄)处死大鼠,并取其心肌组织,冰冻保存。2.2观察指标葡萄糖氧化酶法测空腹血糖(FBG,单位mmol/L);Western blot检测心肌组织中TGFβ1、IL11、IL11RA、JNK、α-SMA、ECM、Runx2、C-Jun的蛋白表达;RT-PCR检测大鼠心肌组织中IL11DNA、IL11mRNA的表达;免疫共沉淀法检测心肌组织中Runx2-C-Jun蛋白复合物;免疫荧光观察心肌IL11沉积情况;光镜观察大鼠心肌纤维化程度。3结果3.1 FPG各组大鼠FPG水平差异有统计学意义(F=270.01,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组均升高,差异有统计学意义[(5.408±0.569)vs(15.540±1.373)vs(8.270±0.474),P0.05];与D组比较,D+Met组明显降低,差异有统计学意义[(15.540±1.373)vs(8.270±0.474),P0.05]。3.2心肌组织TGF-β1的表达各组大鼠心肌组织TGF-β1表达差异有统计学意义(F=13.169,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组的表达均增加,差异有统计学意义[(0.184±0.044)vs(0.523±0.132)vs(0.402±0.159),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达差异无统计学意义(P0.05)。3.3大鼠心肌组织JNK、C-Jun、Runx2、Runx2-C-Jun的蛋白表达各组大鼠心肌组织JNK表达差异有统计学意义(F=27.890,P0.05)。与C组比较,D组的表达均增加,差异有统计学意义[(0.195±0.064)vs(0.462±0.086),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.462±0.086)vs(0.248±0.084),P0.05]。各组大鼠心肌组织C-Jun表达差异有统计学意义(F=27.372,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.181±0.053)vs(0.518±0.119)vs(0.404±0.088),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.518±0.119)vs(0.404±0.088),P0.05]。各组大鼠心肌组织Runx2表达差异有统计学意义(F=22.523,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.146±0.056)vs(0.450±0.086)vs(0.379±0.071),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达差异无统计学意义(P0.05)。免疫共沉淀检测法下可检测到蛋白复合物Runx2-C-Jun。3.4二甲双胍对心肌组织IL11DNA、IL11mRNA、IL11Pro、IL11RA表达的影响各组大鼠心肌组织IL11DNA表达差异有统计学意义(F=34.880,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.107±0.043)vs(0.478±0.133)vs(0.314±0.038),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.478±0.133)vs(0.314±0.038),P0.05]。各组大鼠心肌组织IL11mRNA表达差异无统计学意义(F=1.528,P0.05)。各组大鼠心肌组织IL11Pro表达差异有统计学意义(F=55.513,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.117±0.026)vs(0.458±0.090)vs(0.233±0.047),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.458±0.090)vs(0.233±0.047),P0.05]。各组大鼠心肌组织IL11RA表达差异有统计学意义(F=34.167,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.123±0.040)vs(0.409±0.113)vs(0.205±0.036),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.409±0.113)vs(0.205±0.036),P0.05]。3.5二甲双胍对心肌组织ECM、α-SMA的蛋白表达的影响各组大鼠心肌组织ECM表达差异有统计学意义(F=19.678,P0.05)。与C组比较,D组、D+Met组表达均增加,差异有统计学意义[(0.145±0.036)vs(0.460±0.174)vs(0.253±0.091),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.460±0.174)vs(0.253±0.091),P0.05]。各组大鼠心肌组织α-SMA表达差异有统计学意义(F=8.904,P0.05)。与C组比较,D组表达增加,差异有统计学意义[(0.220±0.101)vs(0.413±0.098),P0.05]。与D组比较,D+Met组表达显著降低,差异有统计学意义[(0.413±0.098)vs(0.295±0.092),P0.05]。3.6大鼠心肌组织HE染色与C组比较,D组大鼠心肌纤维化改变明显;与D组比较,D+Met组大鼠心肌纤维化程度减轻。3.7大鼠心肌IL11免疫荧光与C组比较,D组心肌组织中可见大量IL11沉积;与D组比较,D+Met组心肌组织IL11沉积量显著减少。4结论4.1 2型糖尿病大鼠心肌IL11表达可能上调4.2 IL11导致心肌纤维化的作用可能发生在蛋白质水平上4.3高糖环境下,在心肌组织中,二甲双胍可能通过抑制Runx2-C-Jun合成,减少IL11表达及IL11蛋白含量,延缓纤维化进程。
【学位单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R587.2;R542.2
【部分图文】：
与 D 组比较，D+Met 组、D+Ins 组差异均无统计学意组比较，D+Ins 组差异无统计学意义(P>0.05)。见表 3.2,图表 3.2 各组大鼠心肌组织 TGFβ1 蛋白相对表达量(X±S)69, P<0.05；与 C 组比较，*P<0.05组别 例数（n） TGFβC组 10 0.184±0D组 10 0.523±0.D+Met组 10 0.402±0.D+Ins 10 0.453±0.
与 C 组比较，*P<0.05；与 D 组比较，#P<0.05图 3.2 各组大鼠心肌 JNK、C-Jun 的表达图 3.3 Runx2 与 C-Jun 形成蛋白复合物甲双胍对心肌组织 IL11DNA、IL11mRNA、IL11Pro、IL影响大鼠心肌组织 IL11DNA 表达差异有统计学意义（F=34.880, P<0.05）1DNA 比较，D 组、D+Met 组、D+Ins 组的表达均增加，差异有统计
22图 3.3 Runx2 与 C-Jun 形成蛋白复合物双胍对心肌组织 IL11DNA、IL11mRNA、IL11P鼠心肌组织 IL11DNA 表达差异有统计学意义（F=34.880A 比较，D 组、D+Met 组、D+Ins 组的表达均增加，差异
【相似文献】
相关期刊论文 前10条
1 柳永;刘修恒;;二甲双胍预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤模型的影响及机制研究[J];医学研究杂志;2017年09期
2 刘幼硕;;经典降糖药二甲双胍会成为保健“神药”吗?[J];保健医苑;2016年12期
3 刘丽华;;二甲双胍:口服降糖,不老的神话(一)[J];中南药学(用药与健康);2016年08期
4 刘丽华;;二甲双胍:口服降糖,不老的神话(二)[J];中南药学(用药与健康);2016年09期
5 陈孝治;;二甲双胍片可长期服用吗?[J];中南药学(用药与健康);2016年11期
6 朱建萍;王玉芳;张霞萍;;2型糖尿病运用二甲双胍联合质子泵抑制剂治疗的疗效[J];健康之路;2017年01期
7 葛小明;;二甲双胍[J];天涯;2017年02期
8 熊玮;杨帆;杨丽伟;;二甲双胍:历经坎坷,终成正果[J];家庭医药.就医选药;2017年05期
9 韩咏霞;;糖尿病治疗不可缺了二甲双胍[J];长寿;2017年09期
10 邹芸;谢晨;;二甲双胍减肥靠谱吗[J];健康博览;2017年09期
相关博士学位论文 前10条
1 薛婧;二甲双胍对糖尿病肾病的肾保护作用机制[D];南京医科大学;2019年
2 杜鹃;二甲双胍对上皮性卵巢癌化疗耐药的抑制作用研究[D];郑州大学;2017年
3 林杨;炎症、氧化应激与糖尿病足细胞损伤及二甲双胍肾保护作用的临床研究[D];山东大学;2018年
4 赵忠全;二甲双胍抑制IL-6诱导肺腺癌细胞上皮—间质转化（EMT）、转移及作用机制的研究[D];第三军医大学;2014年
5 王政杰;二甲双胍通过FoxO1增强肝细胞肝癌对~(18)F-FDG摄取作用的研究[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年
6 吴春华;二甲双胍对人胰腺星状细胞活性的影响及其相关机制研究[D];东南大学;2018年
7 唐桂菊;二甲双胍通过降低H3K27me3水平抑制卵巢癌的恶性进展[D];华中科技大学;2018年
8 李笛;二甲双胍对焦虑样行为和情景型恐惧记忆的影响及其机制[D];华中科技大学;2018年
9 周琎;二甲双胍诱导miR-378下调CDK1水平抑制肝细胞肝癌的细胞增殖[D];南京医科大学;2018年
10 杨艺;二甲双胍抑制食管鳞状细胞癌微环境诱导的肿瘤血管生成及其机制的研究[D];郑州大学;2019年
相关硕士学位论文 前10条
1 沈梦杰;二甲双胍联合化疗对小细胞肺癌合并糖尿病患者的临床疗效观察[D];郑州大学;2019年
2 单梦婷;二甲双胍通过减少Runx2-C-Jun合成下调IL11表达[D];郑州大学;2019年
3 彭强;二甲双胍对COPD大鼠炎症反应和氧化应激的影响及其机制[D];郑州大学;2019年
4 陈惠丽;二甲双胍对K-562细胞增殖、凋亡及糖酵解的影响[D];郑州大学;2019年
5 邵凯迪;二甲双胍对人食管鳞癌侧群细胞的作用及机制[D];郑州大学;2019年
6 周文秀;二甲双胍与阿司匹林的成盐研究[D];中国科学院大学(中国科学院上海药物研究所);2019年
7 李向欣;二甲双胍对急性ST段抬高型心肌梗死急诊PCI术后对比剂急性肾损伤的影响[D];河北大学;2018年
8 姜得悦;二甲双胍抑制2型糖尿病大鼠脂肪组织FetA的表达[D];郑州大学;2018年
9 唐利敏;二甲双胍对2型糖尿病患者卵巢癌发病风险及预后影响的Meta分析[D];桂林医学院;2018年
10 王琳;二甲双胍对合并2型糖尿病的进展期胃癌根治术后患者预后的影响[D];大连医科大学;2018年
本文编号：
2836499
