NOX/ROS参与PECAM-1调节血管内皮细胞功能对动脉粥样硬化的作用

发布时间：2020-12-15 00:25

　　研究背景冠状动脉粥样硬化（AS）是造成急性冠脉综合征（ACS）的主要原因,导致大多数心血管事件的发生。它是动脉壁的一种慢性炎症性疾病,血管内皮细胞功能障碍在动脉粥样硬化的早期起着关键作用,过量的脂质和炎症反应被认为是斑块形成的主要因素。受累动脉病变先是内皮功能障碍、然后内膜内广泛的脂质沉积,吞噬细胞和血小板粘附、聚集以及炎性因子的释放造成炎症反应。PECAM-1在内皮细胞表面有表达,尤其血管内皮细胞连接部位高度表达,有研究认为PECAM-1在动脉粥样硬化的发病机制中发挥作用,其作为内皮细胞表面机械感受器调节细胞功能的变化。氧化应激引起的活性氧（ROS）产生是许多血管疾病的重要原因。ROS主要由NADPH氧化酶产生,在生理条件下,血管NADPH氧化酶具有较低的活性。然而,NADPH氧化酶含量可以在脂多糖（LPS）等刺激物的作用下得到提高,诱导内皮细胞功能改变,引起炎症反应,破坏血管稳态。PARP-1是一种高度保守的DNA结合核酶,在氧化应激DNA损伤时被激活,PARP-1可以调节各种关键炎症因子的表达,包括细胞间粘附分子1（ICAM-1）和血管细胞粘附分子1（VCAM-1）等。PARP-... 

【文章来源】：济南大学山东省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

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主要符号表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1.1 主要材料和仪器设备
        1.1.1 主要材料
        1.1.2 仪器设备
    1.2 细胞株培养
        1.2.1 细胞复苏
        1.2.2 细胞换液及传代
        1.2.3 细胞冻存
    1.3 研究方法
        1.3.1 技术路线图
        1.3.2 分组方法
    1.4 Western blot
        1.4.1 配胶
        1.4.2 配液
        1.4.3 提蛋白
        1.4.4 SDS-PAGE电泳
        1.4.5 转膜
        1.4.6 封闭
        1.4.7 一抗孵育
        1.4.8 二抗孵育
        1.4.9 化学发光显影
    1.5 细胞免疫荧光
    1.6 ELISA
    1.7 DCFDA荧光检测ROS
    1.8 统计分析
结果
    2.1 最适浓度的选择
        2.1.1 PECAM-1 siRNA最适抑制浓度
        2.1.2 Apocynin的最适抑制浓度
        2.1.3 DPQ的最适抑制浓度
    2.2 LPS诱导HAEC中 ROS、NOX4、PARP-1蛋白及炎性因子生成增加
        2.2.1 LPS促进ROS的产生
        2.2.2 LPS诱导人主动脉内皮细胞中NOX4 表达量增加
        2.2.3 LPS诱导血管内皮细胞PARP-1蛋白及炎性因子的表达增加
    2.3 NOX4/ROS参与PECAM-1对PARP-1蛋白及炎性因子表达的调控
        2.3.1 NOX4/ROS上调PARP-1及炎性因子的表达
        2.3.2 PECAM-1上调PARP-1蛋白及炎性因子的表达
        2.3.3 抑制PECAM-1能减轻LPS诱导的炎症反应
        2.3.4 LPS上调PECAM-1表达
        2.3.5 PARP-1蛋白促进炎性因子VCAM-1、ICAM-1、MCP-1表达
        2.3.6 PECAM-1对ROS的表达没有明显的调控作用
讨论
结论
创新与不足
参考文献
致谢
附录



本文编号：2917288