激活TRPM8通道对正常和慢性低氧肺高压大鼠肺动脉上钙池操纵性钙内流（SOCE）的调控
发布时间：2021-01-24 16:39
肺高压（pulmonary hypertension,PH）的显著特征是肺血管收缩增强和肺血管重塑,主要由肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）胞浆内游离Ca2+浓度(intracellular free calcium concentration,[Ca2+]i)的持续升高引起。研究表明,钙池操纵性钙通道(store-operated Ca2+channel,SOCC)所介导的钙池操纵性钙内流（store-operated calcium entry,SOCE）在特发性肺动脉高压（idiopathic pulmonary arterial hypertension,IPAH）患者及PH动物模型的PASMCs中均显著增强,并且在PH发展过程中发挥重要作用。研究表明,PH大鼠模型PASMCs中melastatin相关的瞬时受体电位8（melastatin-related transient receptor potential 8...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
慢性低氧处理三周后肺高压大鼠模型鉴定Fig.1-1.Validationofpulmonaryhypertensioninratsexposedtochronichypoxia(CH)
n=4；CHPH 组：2.1±0.7, n=5, P<0.01. Fig.1-2B）。提示，TRPM8 和 TRPC1的 mRNA 表达水平在 CHPH 大鼠 PAs 中都发生了显著变化。图1-2. 正常和CHPH大鼠去内皮PAs中TRPM8和TRPC1基因表达检测Fig.1-2. Alterations in the transient receptor potential melastatin-8 (TRPM8) andcanonical transient receptor potential 1 (TRPC1) expression in PAs of CH-treated rats.Quantitative real-time RT-PCR analysis of TRPM8 (A) and TRPC1 (B) mRNAexpression in endothelium-denuded PAs of control and CHPH-treated rats (n=3,**P<0.01 vs CON).2.2. CHPH 大鼠去内皮 PAs 中 TRPM8 和 TRPC1 蛋白表达的变化此外，Western Blotting 检测结果显示：在以 β-actin 为内参的情况下，与 CON组相比，CHPH 大鼠 PAs 中 TRPM8 蛋白的表达水平也显著降低（CON 组：0.3±0.04,n=3；CHPH 组：0.1±0.03, n=3, P<0.01. Fig.1-3A、C），同样，TRPC1 蛋白的表达水平在CHPH大鼠PAs中也显著增高（CON组：0.03±0.01, n=3; CHPH组：0.3±0.07，n=3，P<0.01. Fig.1-3B、D），与实时荧光定量 PCR 的结果一致。提示
39图1-3. 正常和CHPH大鼠去内皮PAs中TRPM8和TRPC1蛋白表达检测Fig.1-3. Western blots of TRPM8 and TRPC1 proteins in endothelium denuded PAs ofcontrol and CHPH rats (A and B). Normalized amount of TRPM8 and TRPC1 proteinsharvested from PAs of 3 control and 3 CH-treated animals (C and D). **P<0.01,differences between control and CH-treated groups.3. 共聚焦免疫荧光法检测 CHPH 大鼠 PASMCs 中 TRPM8 和 TRPC1蛋白表达的变化上述实验结果表明TRPM8和TRPC1通道在CHPH大鼠PAs中发生了相反的变化趋势，为了进一步验证TRPM8和TRPC1蛋白在CHPH大鼠PASMCs中表达量的变化，以及TRPM8和TRPC1之间可能存在的关系，继续采用共聚焦免疫荧光检测方法，检测CHPH大鼠PASMCs中TRPM8和TRPC1蛋白表达情况。3.1.大鼠原代 PASMCs 的鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]Imbalance and dysfunction of transient receptor potential channels contribute to the pathogenesis of hypertension[J]. LIU DaoYan,XIONG ShiQiang,ZHU ZhiMing. Science China（Life Sciences）. 2014(08)
本文编号：2997576
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：138 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
慢性低氧处理三周后肺高压大鼠模型鉴定Fig.1-1.Validationofpulmonaryhypertensioninratsexposedtochronichypoxia(CH)
n=4；CHPH 组：2.1±0.7, n=5, P<0.01. Fig.1-2B）。提示，TRPM8 和 TRPC1的 mRNA 表达水平在 CHPH 大鼠 PAs 中都发生了显著变化。图1-2. 正常和CHPH大鼠去内皮PAs中TRPM8和TRPC1基因表达检测Fig.1-2. Alterations in the transient receptor potential melastatin-8 (TRPM8) andcanonical transient receptor potential 1 (TRPC1) expression in PAs of CH-treated rats.Quantitative real-time RT-PCR analysis of TRPM8 (A) and TRPC1 (B) mRNAexpression in endothelium-denuded PAs of control and CHPH-treated rats (n=3,**P<0.01 vs CON).2.2. CHPH 大鼠去内皮 PAs 中 TRPM8 和 TRPC1 蛋白表达的变化此外，Western Blotting 检测结果显示：在以 β-actin 为内参的情况下，与 CON组相比，CHPH 大鼠 PAs 中 TRPM8 蛋白的表达水平也显著降低（CON 组：0.3±0.04,n=3；CHPH 组：0.1±0.03, n=3, P<0.01. Fig.1-3A、C），同样，TRPC1 蛋白的表达水平在CHPH大鼠PAs中也显著增高（CON组：0.03±0.01, n=3; CHPH组：0.3±0.07，n=3，P<0.01. Fig.1-3B、D），与实时荧光定量 PCR 的结果一致。提示
39图1-3. 正常和CHPH大鼠去内皮PAs中TRPM8和TRPC1蛋白表达检测Fig.1-3. Western blots of TRPM8 and TRPC1 proteins in endothelium denuded PAs ofcontrol and CHPH rats (A and B). Normalized amount of TRPM8 and TRPC1 proteinsharvested from PAs of 3 control and 3 CH-treated animals (C and D). **P<0.01,differences between control and CH-treated groups.3. 共聚焦免疫荧光法检测 CHPH 大鼠 PASMCs 中 TRPM8 和 TRPC1蛋白表达的变化上述实验结果表明TRPM8和TRPC1通道在CHPH大鼠PAs中发生了相反的变化趋势，为了进一步验证TRPM8和TRPC1蛋白在CHPH大鼠PASMCs中表达量的变化，以及TRPM8和TRPC1之间可能存在的关系，继续采用共聚焦免疫荧光检测方法，检测CHPH大鼠PASMCs中TRPM8和TRPC1蛋白表达情况。3.1.大鼠原代 PASMCs 的鉴定
【参考文献】：
期刊论文
[1]Imbalance and dysfunction of transient receptor potential channels contribute to the pathogenesis of hypertension[J]. LIU DaoYan,XIONG ShiQiang,ZHU ZhiMing. Science China（Life Sciences）. 2014(08)
本文编号：2997576
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