黑青稞籽皮提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用
发布时间：2021-07-20 15:58
目的：研究黑青稞籽皮提取物后处理对心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的保护作用及其机制。方法：用Na2S2O4作耗氧剂建立H9c2细胞化学性缺氧/复氧损伤模型。将H9c2细胞随机分为5组：正常对照组（C组）、缺氧/复氧组（H/R组）、缺氧/复氧+低、中、高剂量提取物组（H/R+L、M、H组）。应用MTT法检测细胞相对活力,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞内ROS水平和细胞线粒体跨膜电位（△Ψm）, Western blot检测相关蛋白（Akt、pAkt、Bcl-2和Bax）表达变化。数据统计采用SAS9.2和SPSS19.0软件包进行统计学处理。结果：1.通过将H9c2细胞置于5mM Na2S2O4中使细胞缺氧20min,再复氧8h建立了稳定、可靠的缺氧/复氧损伤模型。2.缺氧/复氧降低H9c2细胞相对活力,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞相对活力的下降。3.缺氧/复氧诱导H9c2细胞凋亡,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞凋亡。4.缺氧/复氧增加H9c2细胞内ROS水平,黑青稞籽皮提取物后处理能抑制缺氧/复氧所致细胞内ROS水平的增加。5.缺氧/复氧降低H9c2细...
【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞在不同NaZS2氏浓度及不同缺氧时间下复氧4h后细胞相对活力变化
硕士学位论文 第二章当Na2S204浓度及复氧时间一定时，细胞相对活力随缺氧时间出现波动。缺氧时间在0?20min时，随着缺氧时间的延长，复氧后心肌细胞的相对活力呈下降趋势；缺氧时间在30?60min时，细胞相对活力和缺氧时间的关系出现逆转，在一定范围内，缺氧时间的延长反而有利于细胞的相对活力的维持；缺氧时间大于60min时，随着缺氧时间的延长，复氧后心肌细胞的相对活力复呈下降趋势。缺氧时间为20?30min时，细胞相对活力最低，且相对活力变化相对平缓。但统计分析发现，缺氧时间对细胞相对活力的影响无统计学意义（p〉0.1)。当Na2S204浓度及缺氧时间一定时，细胞相对活力随着复氧时间的延长呈下降趋势。这个下降趋势在缺氧时间为20?40min时表现尤为明显。复氧时间对细胞相对活力的影响有统计学意义（p<0.05)。在一定复氧时间范围内，细胞缺氧/复氧损伤随着复氧时间的延长进行性加重。100-1 *
图3.1提取物对正常心肌细抱相对活力的影响胞形态学变化照组心肌细胞贴壁生长，为长梭形，呈鱼群状排列，细胞边界不清，。缺氧/复氧组细胞形态异常，细胞皱缩，呈不规则分枝状、星状等，下降，细胞内出现空泡样改变，培养基内可见少量漂浮细胞及细量提取物组中，大部分细胞出现皱缩，部分细胞呈不规则分枝状、异常细胞比例较缺氧/复氧组少，细胞异常程度较前者轻，培养基浮细胞及细胞碎片。高剂量提取物组细胞形态较正常对照组细胞细胞边缘较正常对照组锐利，说明细胞贴壁生长能力较正常对照量提取物组细胞异常细胞比例及程度介于低剂量提取物组及高剂间。
【参考文献】：
期刊论文
[1]安宁包缺氧体系用于构建乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的研究[J]. 杨轶,麦丽萍,吴岳恒,陈少贤,蔡诗婷,单志新,林秋雄,余细勇,杨敏. 岭南心血管病杂志. 2013(04)
[2]红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤[J]. 祁存芳,张军峰,陈新林,张建水,杨蓬勃,焦倩,张蓬勃,吕海侠,刘勇. 南方医科大学学报. 2013(07)
[3]建立新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧模型[J]. 陈俭琴,房晓祎,詹友芹,李玉光. 汕头大学医学院学报. 2013(02)
[4]花青素类植物活性物质的分析方法[J]. 李春娟,李施扬. 化学工程师. 2013(03)
[5]Oridonin induces apoptosis in gastric cancer through Apaf-1,cytochrome c and caspase-3 signaling pathway[J]. Ke-Wang Sun,Ying-Yu Ma,Tian-Pei Guan,Ying-Jie Xia,Chang-Ming Shao,Le-Gao Chen,Ya-Jun Ren,Hai-Bo Yao,Qiong Yang,Xu-Jun He. World Journal of Gastroenterology. 2012(48)
[6]基于中药血清化学及血清药理学方法探讨香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤物质基础[J]. 田友清,尚靖,何婷,蔡旻煊,阿布卡德. 中国中药杂志. 2012(05)
[7]Ischemia/reperfusion injury and cardioprotective mechanisms:Role of mitochondria and reactive oxygen species[J]. Maria-Giulia Perrelli,Pasquale Pagliaro,Claudia Penna. World Journal of Cardiology. 2011(06)
[8]Cu/Zn-SOD对肾小管上皮HK-2细胞缺氧复氧损伤的保护作用[J]. 陈学慧,金敏,方亮,勾常龙,柯昌斌. 湖北医药学院学报. 2011(03)
[9]越橘果实花色苷的体外抗氧化性[J]. 吕春茂,王新现,包静,孟宪军,董文轩. 食品科学. 2010(23)
[10]氧耗剂致乳鼠心肌缺氧/复氧模型的建立[J]. 余薇,许波,彭彦,吴基良,李璐. 时珍国医国药. 2010(07)
博士论文
[1]PI3K/Akt/GSK-3β和线粒休ATP敏感钾通道介导原花青素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用[D]. 胡艳艳.山东大学 2013
[2]HIF-1与线粒体呼吸链的关系及对细胞糖代谢的影响[D]. 徐世伟.第三军医大学 2004
硕士论文
[1]缺氧促进MSCs成脂分化的机制研究[D]. 江琛.中南大学 2012
[2]亚硫酸钠低氧模型的建立及TAT-Ngb脑保护作用研究[D]. 蒋斌.中国人民解放军军事医学科学院 2011
本文编号：3293133
【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细胞在不同NaZS2氏浓度及不同缺氧时间下复氧4h后细胞相对活力变化
硕士学位论文 第二章当Na2S204浓度及复氧时间一定时，细胞相对活力随缺氧时间出现波动。缺氧时间在0?20min时，随着缺氧时间的延长，复氧后心肌细胞的相对活力呈下降趋势；缺氧时间在30?60min时，细胞相对活力和缺氧时间的关系出现逆转，在一定范围内，缺氧时间的延长反而有利于细胞的相对活力的维持；缺氧时间大于60min时，随着缺氧时间的延长，复氧后心肌细胞的相对活力复呈下降趋势。缺氧时间为20?30min时，细胞相对活力最低，且相对活力变化相对平缓。但统计分析发现，缺氧时间对细胞相对活力的影响无统计学意义（p〉0.1)。当Na2S204浓度及缺氧时间一定时，细胞相对活力随着复氧时间的延长呈下降趋势。这个下降趋势在缺氧时间为20?40min时表现尤为明显。复氧时间对细胞相对活力的影响有统计学意义（p<0.05)。在一定复氧时间范围内，细胞缺氧/复氧损伤随着复氧时间的延长进行性加重。100-1 *
图3.1提取物对正常心肌细抱相对活力的影响胞形态学变化照组心肌细胞贴壁生长，为长梭形，呈鱼群状排列，细胞边界不清，。缺氧/复氧组细胞形态异常，细胞皱缩，呈不规则分枝状、星状等，下降，细胞内出现空泡样改变，培养基内可见少量漂浮细胞及细量提取物组中，大部分细胞出现皱缩，部分细胞呈不规则分枝状、异常细胞比例较缺氧/复氧组少，细胞异常程度较前者轻，培养基浮细胞及细胞碎片。高剂量提取物组细胞形态较正常对照组细胞细胞边缘较正常对照组锐利，说明细胞贴壁生长能力较正常对照量提取物组细胞异常细胞比例及程度介于低剂量提取物组及高剂间。
【参考文献】：
期刊论文
[1]安宁包缺氧体系用于构建乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的研究[J]. 杨轶,麦丽萍,吴岳恒,陈少贤,蔡诗婷,单志新,林秋雄,余细勇,杨敏. 岭南心血管病杂志. 2013(04)
[2]红景天苷通过抑制凋亡相关蛋白的表达保护缺氧对培养神经干细胞的损伤[J]. 祁存芳,张军峰,陈新林,张建水,杨蓬勃,焦倩,张蓬勃,吕海侠,刘勇. 南方医科大学学报. 2013(07)
[3]建立新生大鼠心肌细胞缺氧/复氧模型[J]. 陈俭琴,房晓祎,詹友芹,李玉光. 汕头大学医学院学报. 2013(02)
[4]花青素类植物活性物质的分析方法[J]. 李春娟,李施扬. 化学工程师. 2013(03)
[5]Oridonin induces apoptosis in gastric cancer through Apaf-1,cytochrome c and caspase-3 signaling pathway[J]. Ke-Wang Sun,Ying-Yu Ma,Tian-Pei Guan,Ying-Jie Xia,Chang-Ming Shao,Le-Gao Chen,Ya-Jun Ren,Hai-Bo Yao,Qiong Yang,Xu-Jun He. World Journal of Gastroenterology. 2012(48)
[6]基于中药血清化学及血清药理学方法探讨香青兰保护心肌细胞缺氧/复氧损伤物质基础[J]. 田友清,尚靖,何婷,蔡旻煊,阿布卡德. 中国中药杂志. 2012(05)
[7]Ischemia/reperfusion injury and cardioprotective mechanisms:Role of mitochondria and reactive oxygen species[J]. Maria-Giulia Perrelli,Pasquale Pagliaro,Claudia Penna. World Journal of Cardiology. 2011(06)
[8]Cu/Zn-SOD对肾小管上皮HK-2细胞缺氧复氧损伤的保护作用[J]. 陈学慧,金敏,方亮,勾常龙,柯昌斌. 湖北医药学院学报. 2011(03)
[9]越橘果实花色苷的体外抗氧化性[J]. 吕春茂,王新现,包静,孟宪军,董文轩. 食品科学. 2010(23)
[10]氧耗剂致乳鼠心肌缺氧/复氧模型的建立[J]. 余薇,许波,彭彦,吴基良,李璐. 时珍国医国药. 2010(07)
博士论文
[1]PI3K/Akt/GSK-3β和线粒休ATP敏感钾通道介导原花青素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用[D]. 胡艳艳.山东大学 2013
[2]HIF-1与线粒体呼吸链的关系及对细胞糖代谢的影响[D]. 徐世伟.第三军医大学 2004
硕士论文
[1]缺氧促进MSCs成脂分化的机制研究[D]. 江琛.中南大学 2012
[2]亚硫酸钠低氧模型的建立及TAT-Ngb脑保护作用研究[D]. 蒋斌.中国人民解放军军事医学科学院 2011
本文编号：3293133
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