MALP-2通过TLR2/NF-κB/ZNF202途径下调THP-1巨噬细胞ABCA1表达

发布时间：2021-07-25 13:30

　　目的:三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）作为介导细胞内游离胆固醇（FC）和磷脂流出至贫脂的载脂蛋白（apoA-I）接受体的关键转运蛋白,对减少细胞内胆固醇蓄积和抑制泡沫细胞形成具有重要意义。巨噬细胞活化脂肽-2（MALP-2）是从发酵支原体细胞壁上提取的一种脂多肽,能特异性识别靶细胞膜上的Toll样受体（TLRs）,与动脉粥样硬化（As）形成密切相关,但MALP-2是否能调控ABCA1表达仍不清楚。本研究旨在阐明MALP-2对THP-1巨噬细胞ABCA1表达的影响及相关机制。方法:培养THP-1单核细胞,依次加入佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育,使其最终分化为THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞,经不同浓度的MALP-2（0、25、50、100、200 mM）处理细胞24 h或以100 mM MALP-2处理细胞不同时间（0、6、12、24、48 h）后,行油红O染色观察细胞蓄脂情况,高效液相色谱法（HPLC）检测细胞内总胆固醇（TC）、FC及胆固醇酯（CE）含量,液体闪烁计数法分析细胞内胆固醇流出,荧光实时定量PCR、Western blot分别测定ABCA1 ... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 引言
第2章 实验材料
    2.1 主要试剂与抗体
    2.2 主要仪器与设备
第3章 实验方法
    3.1 THP-1 细胞培养与处理
    3.2 ox-LDL的制备与鉴定
    3.3 油红O染色观察细胞脂滴
    3.4 高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇（total cholesterol, TC）、FC、胆固醇酯（cholesterol ester, CE）含量
    3.5 液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出
    3.6 小干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）转染细胞
    3.7 细胞总RNA提取和荧光实时定量PCR
    3.8 细胞总蛋白提取
    3.9 细胞核蛋白提取
    3.10 Western blot
    3.11 统计学分析
第4章 实验结果
    4.1 MALP-2促进THP-1巨噬细胞内胆固醇蓄积
    4.2 MALP-2减少THP-1巨噬细胞胆固醇流出
    4.3 MALP-2下调THP-1巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达
    4.4 MALP-2通过TLR2/NF-κB途径下调THP-1 巨噬细胞ABCA1表达
    4.5 ZNF202参与NF-κB介导的ABCA1表达下调
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述 巨噬细胞活化脂肽-2研究进展
    参考文献
硕士期间发表论文
致谢
基金资助


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3302116