肺癌患者并发慢性病贫血发生机制的研究
发布时间：2021-09-17 03:56
【目的】研究细胞因子与肺癌患者并发慢性病贫血（Anemia of chronic disease,ACD）的关系,进一步通过研究GDF15等多种细胞因子对hepcidin m RNA表达的影响,探讨肺癌患者ACD的发病机制。【内容】采用ELISA方法检测肺癌不伴贫血与伴ACD、以及经治疗贫血改善后细胞因子变化;利用RT-q PCR检测EPO、TNF-а、IFN-а、IL-6及GDF15干预后对Hep G2细胞hepcidin m RNA表达的影响,在基因水平上研究这些因子与hepcidin的关系,探讨细胞胞因子与肺癌患者ACD的关系。【方法】1.对照组及实验组血清样本的采集与保存。2.肺癌不伴贫血与伴ACD、及伴ACD患者经EPO联合铁剂治疗后,血清细胞因子水平检测。3.细胞因子干预下Hep G2细胞的培养。4.总RNA的提取、逆转录。5.RT-q PCR检测各组Hep G2细胞hepcidin m RNA表达情况。【结果】1.1肺癌不伴贫血组EPO的x±s为9.7713±1.8365 m IU/ml;伴ACD组EPO的x±s为11.1427±2.4196 m IU/ml;两组间P=0...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
A培养中的HepG2细胞（×100）
B培养中的HepG2细胞（×200）
图 2.1C 培养中的 HepG2 细胞（×400）2.1.3.2 细胞因子干预下 HepG2 细胞的培养及细胞保存（1）细胞因子干预的实验设计1） 细胞因子种类、稀释方法及保存：① 细胞因子种类：rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及 rhGDF-15。② 稀释方法及保存：稀释前将 rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及rhGDF-15 因子冻干粉放入离心机内，以 4000 转/分钟离心 30 秒钟，使细胞因子冻干粉末沉到管底。用已加 10%的胎牛血清的 DMEM（低糖）培养液先行稀释成浓度为 100ng/μl 浓度，然后用 0.2ml 无菌离心管以 5μl～10μl/每管分装，-20℃冻存。临用时再用上述培养液进一步稀释成 10ng/μl 的工作液，避免反复冻存。2）细胞因子干预时间、浓度设计按照贴壁细胞覆盖培养瓶/板底约 70-80%面积时，细胞增殖处于最佳对数增殖期，此时施加干预效果较佳。依据增殖状态良好的 HepG2 的传代时间介于24～48 小时特点，当 HepG2 细胞贴壁覆盖培养瓶/板底约 70-80%面积这一最佳
本文编号：3397918
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
A培养中的HepG2细胞（×100）
B培养中的HepG2细胞（×200）
图 2.1C 培养中的 HepG2 细胞（×400）2.1.3.2 细胞因子干预下 HepG2 细胞的培养及细胞保存（1）细胞因子干预的实验设计1） 细胞因子种类、稀释方法及保存：① 细胞因子种类：rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及 rhGDF-15。② 稀释方法及保存：稀释前将 rh EPO、rhTNF-а、rhIFN-а、rhIL-6 及rhGDF-15 因子冻干粉放入离心机内，以 4000 转/分钟离心 30 秒钟，使细胞因子冻干粉末沉到管底。用已加 10%的胎牛血清的 DMEM（低糖）培养液先行稀释成浓度为 100ng/μl 浓度，然后用 0.2ml 无菌离心管以 5μl～10μl/每管分装，-20℃冻存。临用时再用上述培养液进一步稀释成 10ng/μl 的工作液，避免反复冻存。2）细胞因子干预时间、浓度设计按照贴壁细胞覆盖培养瓶/板底约 70-80%面积时，细胞增殖处于最佳对数增殖期，此时施加干预效果较佳。依据增殖状态良好的 HepG2 的传代时间介于24～48 小时特点，当 HepG2 细胞贴壁覆盖培养瓶/板底约 70-80%面积这一最佳
本文编号：3397918
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/3397918.html
最近更新
教材专著
