阿托伐他汀通过激活转录因子EB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响

发布时间：2023-03-16 08:44

　　目的最新研究发现转录因子EB(TFEB)在调节自噬减少细胞内脂质,抑制动脉粥样硬化上起着重要作用。文中旨在探索阿托伐他汀(ATV)通过激活TFEB对泡沫细胞自噬及胆固醇含量的影响。方法体外培养人单核细胞株THP-1,使用佛波酯诱导分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(oxLDL),诱导48 h建立泡沫细胞模型。实验分为空白组、oxLDL组、oxLDL+氯喹组、oxLDL+ATV组、oxLDL+氯喹+ATV组。各组细胞均加入药物处理48 h,采用CCK8法检测ATV及氯喹对细胞的毒性;油红0染色观察细胞内脂滴的含量;采用氧化酶法检测细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)等含量;胆固醇外流荧光分析法分析测定细胞胆固醇外流率;Western blot检测LC3II/I、P62、TFEB、LAMP 1蛋白的表达情况。结果 oxLDL+氯喹组细胞内脂滴较oxLDL组、oxLDL+氯喹+ATV组明显增加(P<0.05),而oxLDL+ATV组较oxLDL组明显降低(P<0.05)。oxLDL+ATV组、空白组细胞内FC、TC、CE、CE/TC含量较oxLDL组明显降低(P<0...

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【文章目录】：
0 引 言
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞、药物与试剂
        1.1.2 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 细胞的培养
        1.2.2 巨噬细胞源性泡沫细胞模型建立
        1.2.3 CCK8法细胞毒性检测
        1.2.4 油红O染色判断细胞内脂滴含量
        1.2.5 氧化酶法检查细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)含量
        1.2.6 胆固醇外流率测定
        1.2.7 Western blot法检测LC3II/I、P62、LAMP 1、TFEB的蛋白含量
    1.3 统计学分析
2 结 果
    2.1 巨噬源性泡沫细胞模型鉴定
    2.2 确定ATV及氯喹对细胞的合适处理剂量
    2.3 细胞油红O染色结果
    2.4 各组细胞内FC、TC、CE/TC含量及细胞胆固醇外流率比较
    2.5 泡沫细胞LC3II/I、P62、LAMP 1、TFEB蛋白的表达
3 讨 论



本文编号：3763029