ORAI1在损伤诱导大鼠颈动脉新生内膜形成中的作用及其与钠钙交换体的关系

发布时间：2017-09-18 01:23

  本文关键词：ORAI1在损伤诱导大鼠颈动脉新生内膜形成中的作用及其与钠钙交换体的关系

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【摘要】：[目的]利用大鼠颈动脉球囊损伤模型研究ORA11在血管平滑肌细胞增生形成新生内膜中的作用及其与钠钙交换体(NCX1)表达的关系。[方法]建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,构建ORA11干扰慢病毒质粒,按照实验要求进行分组后进行干预。Real-time PCR和western blot检测血管壁中ORA11表达,western blot检测血管壁PCNA及NCX1表达,HE染色评价内膜增生情况,SPSS 19.0软件进行数据统计。[结果]球囊损伤7d和14d后可见血管内膜形成,血管壁内增殖相关核抗原(PCNA)的表达也显著增强(P0.05)。损伤7d和14d后血管壁中ORA11的mRNA和蛋白表达于假手术组显著增强(P0.05)。慢病毒感染显著沉默ORA11的表达后抑制了损伤诱导的内膜增殖,干扰组的内膜面积显著低于对照组(P0.05),ORAI1的干扰降低了血管壁NCX1的表达,与对照组相比有显著差异(P0.05)。[结论]ORAI1介导的SOCC是调控血管新生内膜形成和血管平滑肌细胞增殖的一个关键因素,有可能成为治疗动脉硬化和再狭窄的药物靶点,0RAI1表达沉默也引起了NCX1表达的降低。
【关键词】：ORAI1 血管平滑肌细胞 动脉硬化 内膜增生 钠钙交换体
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R54
【目录】：

• 缩略词表5-6
• 中文摘要6-7
• ABSTRACT7-8
• 前言8-9
• 实验技术路线图9-10
• 一、慢病毒的包装10-13
• 1.1 实验材料10
• 1.2 主要试剂10-11
• 1.3 主要仪器11
• 1.4 慢病毒生产实验步骤11-13
• 二、大鼠颈动脉球囊损伤模型的建立与分组13-25
• 2、实验材料13-25
• 2.1 大鼠颈动脉球囊损伤模型的建立与分组14
• 2.2 正常对照组14-18
• 2.3 损伤后七天组18-21
• 2.4 损伤后第十四天组21-24
• 2.5 手术后取材24-25
• 三、取材标本的检验25-36
• 3 实验试剂25-36
• 3.1 实验用具25-26
• 3.2 实验仪器26
• 3.3 试剂配制26-27
• 3.4 主要仪器设各27
• 3.5 Real-time PCR27-30
• 3.6 Western blot 实验30-33
• 3.7 册染色33-36
• 四、结果36-43
• 五、讨论43-45
• 参考文献45-46
• 综述46-51
• 参考文献49-51
• 攻读学位期间获得的学术成果51-52
• 致谢52

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本文编号：872551