舒林酸衍生物K-80003和MEK抑制剂GDC-0973乳腺癌联合用药效果研究

发布时间：2020-07-15 08:25

【摘要】：视黄醇X受体α(RXRα),是隶属于核受体超家族的一类非常重要的成员。研究表明,RXRα广泛地参与了细胞的增殖、分化、凋亡等几乎所有的重要生命过程,在不同的条件下,RXRα表达量的上调或下调预示着细胞出现某种异常变化。因此,RXRα活性变化与人类某些重大疾病息息相关。已有文献证实,RXRα与乳腺癌的产生和发展有着密不可分的关系。在之前的实验中,本文作者团队发现一种非固醇消炎药舒林酸,能够通过抑制RXRα的一种截断形式tRXRα与p85α之间的相互作用,诱导肿瘤细胞凋亡,从而发挥抗癌作用。然而,舒林酸因其能够抑制COX-1和COX-2的活性而有许多副作用,因此本文作者团队合成了大量的舒林酸衍生物,并在其中筛选出了舒林酸衍生物K-80003。实验证明,K-80003能够有效的增强tRXRα的亲和性,同时大大降低药物毒性。本实验发现,K-80003在肿瘤细胞中可以激活p-ERK。由于ERK信号通路的激活是维持肿瘤细胞生存与耐药的一个重要因素,因此作者设想将K-80003和MEK抑制剂GDC-0973联合用药,从两个渠道对乳腺癌的产生和发展进行双重阻断,将能对乳腺癌细胞的生长产生更好的抑制作用。本文选取了 MCF-7乳腺癌细胞系和MMTV-PyMT乳腺癌转基因小鼠,通过蛋白印迹法,流式细胞术,MTT比色实验,免疫荧光染色实验,小鼠的统计学分析,HE染色实验、免疫组化等实验手段,证明了将K-80003和GDC-0973 联合用药的效果明显优于 K-80003 单独加药组,且这种明显的协同作用的原因可能是因为GDC-0973能够抑制由K-80003造成的p-ERK异常激活。通过大量实验有效评估了 K-80003和GDC-0973联合用药的抗肿瘤效果,揭示了联合用药能够大大提高治疗效果的内在原因,寻找到了提高舒林酸衍生物K-80003药物敏感性的有效方法,对于现阶段的临床治疗提供了一种新的选择途径,为进一步开发舒林酸衍生物和MEK抑制剂的衍生药物提供了新的理论依据,对临床上乳腺癌患者的早期治疗提供一种新的思路。
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96
【图文】：

序列,核受体

第一章前言逡逑些入核序列（Ｎｕｃｌｅａｒ邋ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ邋ｓｅｑｕｅｎｃｅ，ＮＬＳ），这些入核序列会影响影响核逡逑亚细胞定位；（４）Ｅ区：该区包含有配体结合结构域（Ｌｉｇａｎｄ－ｂｉｎｄｉｎｇ邋ｄｏｍａｉｎ，ＬＢＤ）逡逑激活功能域ＡＦ－２邋（Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｆｌｉｎｃｔｉｏｎ，ＡＦ－２）。Ｅ区含有１２个ａ螺旋和一个卩折叠，逡逑接ＤＢＤ末端的序列相对保守的区域。（５）邋Ｆ区；某些特殊的核受体的Ｃ端还存在逡逑区，该区的序列高度多样可变，Ｆ区的主要功能是参与某些配体的识别和二聚体的逡逑同时Ｆ区还具有一些调节Ａ／Ｂ区的功能，目前为止还有一些核受体的此区域结构和逡逑不十分清楚［１（）＾邋１５］。逡逑

功能图,功能,细胞株,裸鼠移植瘤

第一章前言逡逑生有关［３２］。在２０１０年我们团队发表了一篇关于ＲＸＲ的截短形，结果显示，ｔＲＸＲａ在多种肿瘤细胞及组织中高表达，同时的细胞株，在裸鼠移植瘤实验中我们发现，该细胞株的肿瘤株，文章通过大量的证据指出，ｔＲＸＲａ能够与ＰＩ３Ｋ的调节ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路，从而促进癌症的产生和发展％。因此，过筛选能与其特异结合配体化合物，开发新型药物，从而抑个具有巨大潜在价值的研究课题。逡逑

结构图,信号通路,结构图,磷酸化

第一章前言逡逑ａｆ，、Ｂ－Ｒａｆ和Ｒａｆ－１３种同工酶。Ｒａｆ是Ｒａｓ下游的蛋白，Ｒａｓ激活Ｒａｆ后，利用高Ｒａｆ－１Ｎ－端结合，后将Ｒａｆ从胞浆转移到细胞膜，在细胞膜上Ｒａ继激活。ＭＥＫ和ＭＥＫ２两种分子亚型，分子质量分别为４４ｋＤ和４５ｋＤ，。ＭＥＫ能够磷酸化酪氨（Ｔｙｒ／Ｔｈｒ）残基，ＭＥＫ可以与激活后的Ｒａｆ的Ｃ端催化区结合，并使其催化区区中两个Ｓｅｒ磷酸化，从而激活ＭＥＫ。ＭＥＫ则能够自身使Ｔｙｒ和Ｔｈｒ两个调节位点激活下游蛋白ＥＲＫ。ＥＲＫ属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，有ＥＲＫ１和ＥＲＫ２两种分子质量分别是４４邋ｋＤ和４２邋ｋＤ。ＥＲＫ的下游主要是９０邋ｋＤ核糖体Ｓ６激酶（９０邋ｋａｌ邋Ｓ６邋ｋｉｎａｓｅ，邋ＲＳＫ），它可以独立地转位进入细胞核并磷酸化一系列底物，如－ｍｙｃ、Ｅｌｋ－１、ＡＴＦ、ｃ－Ｊｕｎ、Ａｐ－１邋和帽结合蛋白（ｃａｐ邋ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，邋ＣＢＰ）等［５２］。逡逑；

【参考文献】