SAHA衍生物活性的研究

发布时间：2017-04-28 08:02

  本文关键词：SAHA衍生物活性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：癌症是目前世界上严重危害人类生命,对人类健康造成威胁的一类重要疾病。化学药物治疗简称化疗是主要的治疗手段,然而由于许多传统化疗药物没有明确的作用靶标,副反应较大,作用效果不能完全表现出来。因此有作用靶点、高效低毒的新型抗癌药物是化疗的研究方向。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor, HDAC),作用于组蛋白,其高效低毒的特点受到越来越多的关注,显示出了广阔的应用前景。辛二酰苯胺异羟肟酸(Suberoylanilide Hydroxamic Acid,简称SAHA)作为一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂类药物,由美国Merck公司开发,2006年10月上市,用于其他两种药物效果治疗时或者治疗后效果不佳,或病情恶化或病情反复情况下的皮肤T细胞淋巴癌(CTCL)的治疗。SAHA能够直接与HDACs酶活性位点结合,直接或间接调节组蛋白的乙酰化状态,通过诱导细胞凋亡、阻断细胞周期、诱导细胞调控异常而发挥作用。SAHA具有结构相对简单、高效、低毒、抗癌谱广等特点。SAHA不仅可以单独使用,在与其他药物联合使用方面表现出了良好的协同作用。所以对SAHA结构进行改造合成了一系列的SAHA衍生物。本文在合成的23种SAHA衍生物中,通过体外检测细胞活性的方法,筛选得到了在人皮肤黑色素瘤细胞株(A375),人肺癌细胞株(A549)和人胃癌细胞株(MGC803)中比SAHA抗癌活性好的几种化合物B102,B105, B113, B122, B123和B124。它们是潜在的抗癌药物,具有深入研究的意义。本文以这6种衍生物作为基础研究对象,测定了在人肺癌细胞株(H1299),人肺鳞癌细胞株(H460)和人肝癌细胞系(HepG2)中的抗癌活性。其中对于B123测定了细胞毒性,从诱导细胞凋亡、阻断细胞周期的角度进行了深入的研究。将SAHA衍生物和维A酸类药物及顺铂联合用药,测定联合IC50值以及联合作用指数CI。本文主要研究结论如下：1、对SAHA衍生物对多种癌细胞的体外抗瘤活性进行评价,通过与SAHA进行对比,筛选出了比SAHA抗癌活性更好的一系列SAHA衍生物B102, B105, B113, B122, B123和B124。测定了其在人肺癌细胞株(H1299),人肺鳞癌细胞株(H460)和人肝癌细胞系(HepG2)中的活性,结果表明其抗癌活性比SAHA好,可以诱导细胞凋亡,主要表现在凋亡早期。2、SAHA衍生物和维A酸类(全反式维A酸和13-顺维A酸)联用后的抑制率明显提高,说明加入维A酸类药物可以提高抗癌效果。SAHA衍生物和顺铂联用后IC50值降低,在一定浓度范围内CI1,说明二者具有协同作用。3、 B123的抗癌活性比顺铂好,而且B123对正常细胞的毒性在相同浓度下比SAHA稍大一些但不是很明显。采用流式细胞术检测B123对肺癌细胞的凋亡和周期影响,结果表明B123通过诱导细胞凋亡、阻断细胞周期、诱导细胞调控异常而发挥作用。
【关键词】：SAHA衍生物 抗癌活性 IC50 联合用药 细胞周期 细胞凋亡
【学位授予单位】：北京化工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R914.5;R96
【目录】：

• 学位论文数据集3-4
• 摘要4-7
• ABSTRACT7-15
• 第一章 绪论15-27
• 1.1 肿瘤的治疗现状15-17
• 1.1.1 黑色素瘤的治疗现状15-16
• 1.1.2 非小细胞肺癌的治疗现状16
• 1.1.3 胃癌的治疗现状16-17
• 1.2 抗癌药物的研究进展17
• 1.3 SAHA的研究现状17-25
• 1.3.1 SAHA的简介17-18
• 1.3.2 SAHA临床实验18-19
• 1.3.3 SAHA的联合用药19-20
• 1.3.4 SAHA衍生物20-25
• 1.4 本课题的研究思路及意义25-27
• 第二章 SAHA衍生物活性筛选及测定27-43
• 2.1 实验材料和仪器27-29
• 2.1.1 实验细胞系27
• 2.1.2 实验试剂27-28
• 2.1.3 主要工作液配制28
• 2.1.4 实验仪器28-29
• 2.2 实验基本操作29-30
• 2.2.1 细胞冻存29
• 2.2.2 细胞复苏29
• 2.2.3 细胞培养29-30
• 2.2.4 细胞换液30
• 2.2.5 细胞传代30
• 2.3 SAHA衍生物活性筛选及测定30-36
• 2.3.1 实验方法-MTT比色法30-34
• 2.3.2 SAHA衍生物活性测定34-36
• 2.4 SAHA及其衍生物对细胞凋亡的诱导36-43
• 2.4.1 实验原理36
• 2.4.2 实验流程36-37
• 2.4.3 实验结果及讨论37-43
• 第三章 SAHA衍生物的联合用药43-61
• 3.1 SAHA衍生物和维A酸类药物的联合用药43-47
• 3.1.1 实验细胞系43
• 3.1.2 给药处理43
• 3.1.3 实验结果及讨论43-47
• 3.2 SAHA衍生物和顺铂的联合用药47-61
• 3.2.1 固定顺铂浓度1μM,SAHA衍生物浓度按梯度变化47-50
• 3.2.2 固定SAHA衍生物浓度4μM,顺铂浓度按梯度变化50-52
• 3.2.3 SAHA衍生物浓度和顺铂浓度均按梯度变化52-61
• 第四章 B123的作用机制61-73
• 4.1 B123跟顺铂作用效果对比61-62
• 4.1.1 实验细胞系61
• 4.1.2 给药处理61
• 4.1.3 实验结果及讨论61-62
• 4.2 B123的细胞毒性实验62-63
• 4.2.1 实验细胞系62
• 4.2.2 给药处理62
• 4.2.3 实验结果与讨论62-63
• 4.3 B123诱导细胞凋亡63-65
• 4.4 B123对细胞周期的影响65-73
• 4.4.1 实验原理65
• 4.4.2 操作步骤65-66
• 4.4.3 实验结果及讨论66-73
• 总结与展望73-75
• 参考文献75-78
• 致谢78-79
• 研究成果及发表论文79-80
• 作者和导师简介80-81
• 附件81-82

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张海元;张静;刘康兵;;去乙酰酶抑制剂SAHA增强顺铂抗肝癌细胞活性研究[J];长江大学学报(自然科学版);2011年08期

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本文编号：332405