蛋白酶体抑制剂通过促进AGR2泛素化降解并增强贝伐珠单抗的抗肿瘤作用研究

发布时间：2024-02-17 18:03

　　研究背景前梯度同源蛋白2(Aterior gradient protein 2 homolog,AGR2)是内质网二硫键异构酶(protein disulfide isomerase,PDI)家族成员之一,在人体正常组织如肺、乳腺、胃、小肠、前列腺等组织中表达,其生理功能尚不完全清楚,可能与腺体的形成、胚胎发育与肢体再生等有关。人AGR2蛋白含175个氨基酸残基,其独特的蛋白结构决定其功能多样性:i)第81-84氨基酸残基为PDI活性Motif(CPHS),但与经典的PDI结构(CXXC)相比却只含一个Cys,其PDI活性不强,但仍具有PDI样分子伴侣的功能、促进蛋白的正确折叠;ii)大多数PDI蛋白的C端具有典型的H/KDEL内质网滞留信号,而AGR2的信号为KTEL,对KDEL受体的结合力弱,可脱离内质网,作为分泌蛋白在细胞外以及体液中发挥功能;iii)AGR2还可定位于细胞核、胞质,通过蛋白-蛋白相互作用参与信号传导而发挥功能。由于AGR2在多种肿瘤组织中高表达,已确定其为原癌基因,促进肿瘤的发生、侵袭转移以及产生多药耐药等恶性表型,是潜在的药物治疗靶点和诊断标志物。本课题组前期...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２蛋白酶体抑制剂Ｂｏｒ增加ＡＧＲ２的泛素化水平??

??图１．１蛋白酶体抑制剂下调ＡＧＲ２的蛋白水平??３６??

图２．１?ＭＧ１３２通过Ｋ４８位点泛素连接方式促进ＡＧＲ２的泛素化降解??

连接酶?Ｅ３?组件识别蛋白?５（ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｌｉｇａｓｅ?Ｅ３?ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ－ｒｅｃｏｇｎｉｎ５，ＵＢＲ５）??能够与ＡＧＲ２发生相互作用［５４］，所以我们推测ＵＢＲ５可能是ＡＧＲ２进行泛素化??的Ｅ３连接酶。如图２．Ｃ结果所示，在ＭＧ１３２作用下，....

图２．２?ＵＢＲ５是ＡＧＲ２的泛素连接酶??

??＿??图２．１?ＭＧ１３２通过Ｋ４８位点泛素连接方式促进ＡＧＲ２的泛素化降解??（２）?ＭＧＩ３２通过Ｅ３连接酶ＵＢＲ５介导ＡＧＲ２的泛素化??在蛋白质泛素化的过程中，泛素连接酶Ｅ３能够行使目标蛋白识别和招募泛??素载体酶Ｅ２的关键作用，且具有同源性低和特异性高的特点，因此能....

图３．１?ＡＧＲ２赖氨酸位点及全赖氨酸突变表达质粒示意图??注：ＡＧＲ２－ＬｙＳ突变质粒由王大伟师兄构建??

Ｋ１７２，我们通过构建关于这１７个赖氨酸位点相应的突变质粒（如Ｋ８９：只??有Ｋ８９位点为Ｌｙｓ；?Ｋ８９Ｒ：只有Ｋ８９位点Ｌｙｓ突变为Ａｒｇ），探讨ＡＧＲ２是通过其??哪一赖氨酸位点的泛素化进行降解的（图３．Ａ）。??Ａ??Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ?ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ?ｌｏｃａｔ....

本文编号：3901187