植物干旱感受器OSCA1互作因子的筛选和鉴定

发布时间：2020-05-01 20:28

【摘要】：干旱是影响全球农林牧业发展及植物生态环境的主要因素。阐明植物抗旱分子机理,提高植物抗旱能力已成为我国发展农林牧业及保护植物生态亟需解决的重大科学问题。OSCA1作为第一个被发现的植物中的阳离子通道蛋白,探索植物抵御干旱胁迫的分子机理,具有非常重要的意义。然而到目前为止,OSCA1的生理机制仍然不清楚。鉴定已知蛋白的相互作用蛋白为探究其蛋白功能和分子机制提供重要依据。本实验主要利用多种国际先进和认可度高的筛选方法,筛选出OCSA1的互作因子之一:Calmodulin(CaM),并进行更深层的生理机制分析。目前取得的成果如下:1.通过酵母双杂交(Y2H)、免疫沉淀-质谱联用(IP-MS)以及双分子荧光互补(BiFC)三种方法共同筛选出CaM是OSCA1的互作因子之一;2.通过钙成像系统分析处理以及动物细胞HEK293T异源体系后发现,CaM会促进OSCA1通道的闭合,从而使其介导的OICI(Osmotic Induced Calcium Increase)所引起的钙信号下降;3.通过Y2H,筛选出OSCA1与CaM的结合区域OSCA1(459-475),并且之后发现CaM的结合区域不仅仅只有OSCA1(459-475)这么1处,OSCA1上还存在着4个CaM的结合区域。
【图文】：

图 1.1 Y2H 检测蛋白质相互作用示意图[72]Fig.1.1 Schematic diagram of Y2H detection of protein interaction2 免疫沉淀-质谱联用技术

图 1.2 BiFC 检测蛋白质相互作用示意图[72]Fig.1.2 Schematic diagram of BiFC detection of protein interaction.5 本研究的立题依据和意义
【学位授予单位】：杭州师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：Q943

【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 王明强;武金霞;张玉红;韩凝;边红武;朱睦元;;蛋白质相互作用实验技术的最新进展[J];遗传;2013年11期

2 梁秋芬;刘宽灿;徐碧玉;金志强;;钙调蛋白在植物发育中的功能[J];生命科学研究;2005年S2期

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本文编号：2647028