褶纹冠蚌Keap1基因的表达与功能分析
发布时间:2021-01-03 07:58
微囊藻毒素(microcystin,MCs)是一类毒性强的环七肽毒素,其会对养殖水环境造成严重危害。Keap1-Nrf2信号通路是保护细胞免受各种环境毒物的损伤的主要途径,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)是Cul3依赖性泛素连接酶复合物的BTB-Kelch型底物衔接蛋白,Keap1靶向促进核转录因子红细胞系相关因子-2(Nrf2)的泛素化降解。在氧化应激下,Keap1-Nrf2信号通路会调控下游Ⅱ相解毒/抗氧化酶对细胞起保护作用。本实验对褶纹冠蚌Keap1进行鉴定与功能的分析以及对Nrf2-Keap1信号通路在微囊藻毒素作用下转录调控的研究,这将有助于了解贝类的氧化应激调控机制。1.从构建的褶纹冠蚌血细胞转录组文库中筛选出两种类型的Keap1(Keap1a和Keap1b)基因片段,设计特异引物和使用RACE PCR技术成功的克隆出了CpKeap1a和CpKeap1b基因的cDNA序列全长。CpKeap1a基因cDNA序列全长2952 bp,其中5’非编码区有351 bp,3’非编码区有762 bp,开放阅读框长度为1839 bp,共编码612个氨基酸,该蛋白含一个pol...
【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Keap1半胱氨酸残基响应多种药物的示意图
图 1.3 Keap1-Nrf2 信号通路的活化机制[11]Fig. 1.3 Activation mechanism of Keap1-Nrf2 signaling pathway[11]3 Keap1-Nrf2 信号通路的抗氧化应激作用Nrf2 是一种基本的亮氨酸拉链(bZIP)蛋白,已被确定为参与保护细胞免化和亲电损伤的关键因子[51],它的许多靶基因在维持细胞抗氧化反应和异质代谢方面很重要。例如过氧化氢酶(catalase, CAT),铜锌超氧化物歧化Cu/Zn-superoxide dismutase, Cu/ZnSOD),主要负责消除源自内源和外源的[52],因此,其在生物体内对消除 ROS 有着非常重要的作用[53, 54];谷胱甘肽移酶(glutathione S-transferases, GSTs)可催化谷胱甘肽与毒性化合物的结产生更容易被排泄的水溶性和生物活性较低的产物[55];谷胱甘肽过氧化物glutathione peroxidases, GPx)是主要的抗氧化酶,可清除过氧化氢或有机氢化物,从而保护生物膜和细胞成分免受氧化应激[56];硫氧还蛋白(thioredoxin
总RNA检测Fig.2.1TotalRNAdetection
【参考文献】:
硕士论文
[1]家蝇Keap1和Nrf2基因的克隆、表达及功能分析[D]. 于雪.河北大学 2015
本文编号:2954618
【文章来源】:南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】:71 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
Keap1半胱氨酸残基响应多种药物的示意图
图 1.3 Keap1-Nrf2 信号通路的活化机制[11]Fig. 1.3 Activation mechanism of Keap1-Nrf2 signaling pathway[11]3 Keap1-Nrf2 信号通路的抗氧化应激作用Nrf2 是一种基本的亮氨酸拉链(bZIP)蛋白,已被确定为参与保护细胞免化和亲电损伤的关键因子[51],它的许多靶基因在维持细胞抗氧化反应和异质代谢方面很重要。例如过氧化氢酶(catalase, CAT),铜锌超氧化物歧化Cu/Zn-superoxide dismutase, Cu/ZnSOD),主要负责消除源自内源和外源的[52],因此,其在生物体内对消除 ROS 有着非常重要的作用[53, 54];谷胱甘肽移酶(glutathione S-transferases, GSTs)可催化谷胱甘肽与毒性化合物的结产生更容易被排泄的水溶性和生物活性较低的产物[55];谷胱甘肽过氧化物glutathione peroxidases, GPx)是主要的抗氧化酶,可清除过氧化氢或有机氢化物,从而保护生物膜和细胞成分免受氧化应激[56];硫氧还蛋白(thioredoxin
总RNA检测Fig.2.1TotalRNAdetection
【参考文献】:
硕士论文
[1]家蝇Keap1和Nrf2基因的克隆、表达及功能分析[D]. 于雪.河北大学 2015
本文编号:2954618
本文链接:https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/2954618.html