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MicroRNA-26b抑制小鼠胚胎干细胞多能性并促进中内胚层分化

发布时间:2021-05-18 08:41
  目的研究miR-26b对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,m ESCs)多能性及其分化的调控作用。方法1.实时荧光定量PCR检测miR-26簇前体在m ESCs和小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)中的表达。2.实时荧光定量PCR检测胚状体(embryoid body,EB)形成过程中成熟miR-26b的表达,并且比较miR-26b在m ESCs与MEF中的表达。3.CCK-8方法检测miR-26b对m ESCs增殖能力的影响。4.流式细胞术测定miR-26b对m ESCs细胞周期与凋亡的影响。5.使用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色试剂盒检测miR-26b对m ESCs中碱性磷酸酶活性的影响。6.实时荧光定量PCR检测miR-26b对m ESCs中多能性转录因子(Oct4、Sox2和Nanog)m RNA表达的影响。7.使用蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测miR-26b对m ESCs中三个关键转录因子的蛋白表达影响。8.用体外模型观察转染pc DNA... 

【文章来源】:安徽医科大学安徽省

【文章页数】:76 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
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中文摘要
英文摘要
1 引言
2 材料与方法
    2.1 材料
    2.2 方法
3 结果
    3.1 小鼠胚胎干细胞中miR-26簇的内源性表达
    3.2 miR-26b对小鼠胚胎干细胞增殖能力的调控作用
    3.3 miR-26b对小鼠胚胎干细胞自我更新的作用
    3.4 miR-26b促进小鼠胚胎干细胞中内胚层分化
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述 MicroRNA-26 家族在心血管疾病中的研究
    参考文献



本文编号:3193499

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