PDCoV拮抗Ⅲ型干扰素产生的机制研究

发布时间：2021-07-24 19:12

　　猪δ冠状病毒（PDCo V）是近些年来新发现的一种猪肠道冠状病毒,属于套式病毒目、冠状病毒科、δ冠状病毒属成员。2012年,PDCo V于香港首次被发现。2014年,PDCo V在美国大规模爆发和流行。随后,多个国家也报道了该病的发生与流行。PDCo V主要感染新生仔猪,引起腹泻、呕吐、脱水甚至死亡,给养猪业造成了较大的经济损失。最近的研究证实,牛、鸡、小鼠也对PDCo V易感染。而且PDCo V还具有感染人的潜能,对人类与动物健康构成了重大威胁。干扰素（IFN）是宿主抵抗外界病原入侵的重要细胞因子。先前的研究表明,PDCo V感染拮抗I型干扰素产生,从而逃避宿主的抗病毒免疫。然而,PDCo V作为一种肠道病毒,主要感染肠道粘膜组织。有研究表明,在肠道粘膜组织中,Ⅲ型干扰素（IFN-λs）比I型干扰素发挥更重要的抗病毒作用。肠道粘膜上皮细胞能通过上调Ⅲ型干扰素受体的表达和过氧化物酶体的生成,诱导Ⅲ型干扰素应答。然而,为了建立有效的感染,许多病毒采取各种策略来拮抗Ⅲ型干扰素产生。目前,关于PDCo V是否拮抗Ⅲ型干扰素产生尚不清楚。本研究证实PDCo V感染可以拮抗IFN-λ1产生,并进... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

冠状病毒分类图(Cuietal.2019)

华中农业大学2020届硕士研究生学位论文10I型干扰素类似，III型干扰素主要诱导STAT1与STAT2的磷酸化，很少诱导STAT3和STAT4的磷酸化。图1-3I型和III型干扰素信号转导途径（Lazearetal，2019）Fig.1-3TypeIandtypeIIIIFNsignaltransductionpathways.1.3.2冠状病毒拮抗干扰素产生的研究进展为了便于宿主体内复制增殖，RNA病毒在长期的自然压力选择下演化出多种策略来抑制宿主的干扰素产生，从而逃避宿主天然免疫应答。目前，已经有研究证实，MERS-CoV、SARS-CoV、HCoV-229E、MHV、PEDV、PDCoV等多种冠状病毒通过不同的途径拮抗I型干扰素产生。例如，MERS-CoV和SARS-CoV通过编码一些病毒蛋白拮抗RLRs识别病毒RNA，从而逃避干扰素应答。SARS-CoVN蛋白能与TRIM25结合，抑制其介导的RIG-I泛素化，进而抑制I型干扰

3.1.2 载体与质粒 荧光素酶报告质粒 p-55λ1-(-225/-36)-Luc、p-55λ1mut.IRF-Luc、p-55λ1mut.NF-κB-Luc 和 p-55λ1mut.IRF/mut.NF-κB-Luc 均由日本京都大学藤田隆志博士提供。海肾荧光素酶报告质粒 RL-TK 购于 Promega 公司。N 端带 Flag 标签的 RIG-I、MDA5、MAVS、TBK1、IKKε、IRF1、IRF3、IRF7 真核表达质粒均由本实验室构建并保存。真核表达载体 pCAGGS-Flag、pCAGGS-HA 由本实验室王荡老师将pCAGGS 表达载体改造而成。pCAGGS-Flag 与 pCAGGS-HA 载体除了带不同标签（N 端）之外，其他酶切位点均相同。


本文编号：3301257