甘蓝型油菜启动子pBnaC05g31880D的克隆与功能分析

发布时间：2024-05-12 17:09

　　以甘蓝型油菜冬性品种中双11的基因组为模板,克隆了BnaC05g31880D基因起始密码子上游-1 525 bp的启动子序列。顺式调控元件的预测分析表明,该启动子含有真核生物启动子必需的核心调控元件TATA box和CAAT box,同时还存在较多的其他功能元件,如光信号响应调控元件ATCT-motif、Box 4、ACE、I-box、LAMP-element、TCT-motif,厌氧感应必需的顺式作用元件ARE,茉莉酸甲酯响应顺式作用元件CGTCA-motif和TGACG-motif,玉米醇溶蛋白代谢调控元件O₂-site,赤霉素响应元件P-box等。为了验证该启动子的表达模式,构建了由其驱动GUS报告基因的植物融合表达载体DX2181G-pBnaC05g31880D,并采用农杆菌介导的花序浸染法转化野生型拟南芥(Col-0)。对筛选和鉴定的阳性转基因株系进行GUS组织化学法染色,结果表明,GUS活性在拟南芥的各个组织中均有较强表达水平,这表明pBnaC05g31880D具有驱动GUS报告基因在拟南芥各个组织中组成型表达的特性。这为该启动子在油菜转基因提高作物品...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料和试剂
    1.2 目的片段的序列分析
    1.3 目的片段的克隆
    1.4 植物表达载体构建
    1.5 拟南芥的遗传转化及分子鉴定
    1.6 转基因株系的GUS组织化学染色分析
    1.7 油菜内源基因BnaC05g31880D表达量及转基因拟南芥GUS表达量检测
2 结果与分析
    2.1 BnaC05g31880D基因的启动子序列分析
    2.2 目的片段的克隆
    2.3 载体DX2181G-pBnaC05g31880D的构建
    2.4 pBnaC05g31880D启动子的功能分析
    2.5 油菜内源基因BnaC05g31880D表达量分析及转基因拟南芥GUS表达量分析
3 讨论与结论



本文编号：3971631