马铃薯干腐病病原镰孢菌的分类研究

发布时间：2017-10-24 02:05

  本文关键词：马铃薯干腐病病原镰孢菌的分类研究

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【摘要】：在我国马铃薯主产区黑龙江省齐齐哈尔市克山农场,对马铃薯贮藏期病害-干腐病进行了样品采集,从马铃薯Y4,H525和K18三个品种中采集了90份样品,经分离纯化共获得60个镰孢菌菌株。通过纯培养菌落的形态特征鉴定,以及rDNA ITS和EF-1α基因序列分析等分子生物学技术,共鉴定出6种镰孢菌,分别是锐顶镰孢菌(Fusarium acuminatum)、接骨木镰孢菌(F.sambucinum)、尖孢镰孢菌(F.oxysporum)、腐皮镰孢菌(F.solani)、芬芳镰孢菌(F.redolens)和层生镰孢菌(F.proliferatum);它们的分离率分别为5.00%、63.33%、16.67%、8.33%、5.00%和1.67%。侵染试验结果表明,6种病原菌均可导致接种薯块发病,但其中接骨木镰孢菌是引起马铃薯干腐病的主要致病菌。层生镰孢菌系我国马铃薯上首次分离报道。6种镰孢菌的生长环境条件较宽泛,从5℃-30℃及pH4-11均能生长。锐顶镰孢菌(F.acuminatum)最适生长条件为25℃、pH9;层生镰孢菌(F.proliferatum)生长最适条件为25℃、pH6,其余病原菌最适生长条件均为25℃、pH7。锐顶镰孢菌(F.acuminatum)适宜以马铃薯淀粉和牛肉膏为营养源;接骨木镰孢菌(F.sambucinum)和腐皮镰孢菌(F.solani)适宜以可溶性淀粉和硝酸钾为营养源;尖孢镰孢菌(F.oxysporum)适宜利用马铃薯淀粉和牛肉膏;芬芳镰孢菌(F.redolens)能较好地利用马铃薯淀粉和硝酸钾;层生镰孢菌(F.proliferatum)能较好地利用葡萄糖和牛肉膏。六种病原菌都不能很好的利用果糖。进行了以3株拮抗细菌、7株拮抗真菌及3种农药对6株镰孢菌的抑菌率检测,其试验结果表明B17-1、B18-2、B19-1三种细菌对镰孢菌均有抑制作用,其中B17-1对接骨木镰孢菌(F.sambucinum)的抑制率最高为86.67%;B18-2对锐顶镰孢菌(F.acuminatum)的抑制率最高为76.92%;B19-1对芬芳镰孢菌(F.redolens)的抑制率最高为82.22%。B6-3、B14-1、B38-2、J38-6、Q17-4、Q39-1和Q38-4对六种镰孢菌均有抑制作用,其中B6-3、B14-1、J38-6、Q39-1对接骨木镰孢菌(F.sambucinum)的抑制率最高,分别为72.22%、75.56%、82.22%和81.11%;B38-2对腐皮镰孢菌(F.solani)抑制率最高为83.72%;Q17-4对尖孢镰孢菌(F.oxysporum)的抑制率最高为75.56%;Q38-4对锐顶镰孢菌(F.acuminatum)的抑制率最高为84.62%。恶霉灵、百菌清和多菌清对镰孢菌均有抑制作用,随农药的浓度升高,抑制效果更加明显。浓度为50%的恶霉灵对层生镰孢菌(F.proliferatum)的抑制效果最好为97.47%;浓度为50%的百菌清对尖孢镰孢菌(F.oxysporum)抑制效果最好为88.89%;浓度为15%的百菌清对尖孢镰孢菌(F.oxysporum)和芬芳镰孢菌(F.redolens)的抑制率达到100%,浓度为50%的多菌清对层生镰孢菌(F.proliferatum)抑制率为100%。
【关键词】：马铃薯干腐病 镰孢菌 分离鉴定
【学位授予单位】：辽宁师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S435.32
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-12
• 1 综述12-21
• 1.1 马铃薯的食用及药用价值12
• 1.1.1 马铃薯的食用价值12
• 1.1.2 马铃薯的药用价值12
• 1.2 马铃薯生产现状12-13
• 1.3 马铃薯干腐病等贮藏期病害与防治13-16
• 1.3.1 马铃薯干腐病13
• 1.3.2 马铃薯贮藏期间的其他病害13-14
• 1.3.2.1 马铃薯晚疫病13-14
• 1.3.2.2 马铃薯早疫病14
• 1.3.2.3 马铃薯环腐病14
• 1.3.2.4 马铃薯坏疽病14
• 1.3.2.5 马铃薯环腐病14
• 1.3.3 马铃薯干腐病的防治14-16
• 1.4 镰孢菌16-19
• 1.4.1 镰孢菌的分类16-19
• 1.4.1.1 国外研究进展16-18
• 1.4.1.2 国内研究进展18-19
• 1.4.2 镰孢菌的寄主范围19
• 1.4.3 镰孢菌的拮抗菌19
• 1.5 目的意义及主要研究内容19-21
• 2 马铃薯干腐病原镰孢菌的分类研究21-38
• 2.1 材料与方法21-24
• 2.1.1 材料21-22
• 2.1.1.1 试剂与药品21
• 2.1.1.2 仪器与设备21
• 2.1.1.3 培养基21-22
• 2.1.1.4 病原菌来源22
• 2.1.2 方法22-24
• 2.1.2.1 病原菌的分离纯化22
• 2.1.2.2 病原菌鉴定22-23
• 2.1.2.3 病原菌的致病性检测23-24
• 2.2 结果与分析24-36
• 2.2.1 镰孢菌的分离率24
• 2.2.2 镰孢菌的形态特征24-30
• 2.2.3 DNA质量检测30-32
• 2.2.4 EF-1α 基因琼脂糖凝胶电泳检测32-33
• 2.2.5 系统发育树33-35
• 2.2.6 致病性检测35-36
• 2.3 结论与讨论36-38
• 2.3.1 结论36
• 2.3.2 讨论36-38
• 3 马铃薯干腐病原镰孢菌的生物学特性研究38-55
• 3.1 材料与方法38-39
• 3.1.1 材料38
• 3.1.2 方法38-39
• 3.2 结果与分析39-53
• 3.2.1 温度对病原菌菌丝生长的影响39-43
• 3.2.2 pH值对病原菌菌丝生长的影响43-47
• 3.2.3 光照对病原菌菌丝生长的影响47
• 3.2.4 碳源对病原菌菌丝生长的影响47-48
• 3.2.5 氮源对病原菌菌丝生长的影响48-49
• 3.2.6 培养基对病原菌菌丝生长、产孢量的影响49-53
• 3.2.7 病原菌生长曲线53
• 3.3 结论与讨论53-55
• 3.3.1 结论53-54
• 3.3.2 讨论54-55
• 4 拮抗菌及药剂对马铃薯干腐病菌的抑菌效果55-61
• 4.1 材料与方法55-56
• 4.1.1 材料55
• 4.1.1.1 菌种55
• 4.1.1.2 器材55
• 4.1.1.3 药品与试剂55
• 4.1.1.4 培养基55
• 4.1.2 方法55-56
• 4.2 结果与分析56-59
• 4.2.1 拮抗菌的抑菌效果56-58
• 4.2.2 农药的抑菌效果58-59
• 4.3 结论与讨论59-61
• 4.3.1 结论59-60
• 4.3.2 讨论60-61
• 结论61-63
• 参考文献63-67
• 附录A 测序结果67-89
• 攻读硕士学位期间发表学术论文情况89-90
• 致谢90

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本文编号：1086484