姬松茸高产维生素B 12 菌株的选育
发布时间：2020-12-06 11:58
姬松茸食药用价值丰富、栽培效益可观、有利于资源循环利用,发展前景广阔。但国内种质资源缺乏,因此进行姬松茸育种研究十分必要。随着社会发展素食者不断增多,而素食者普遍缺乏维生素B12。据此,本研究以姬松茸JS01为试验材料,分别获取其原生质体和孢子,并通过紫外诱变试验、诱变菌株的筛选和鉴定试验、栽培试验等,以期获得高产维生素B12的姬松茸菌株,研究结果如下:1.通过单因素试验以及正交实验,利用SPSS 22.0软件进行分析,对姬松茸原生质体的制备及再生条件进行优化。结果表明原生质体最佳制备条件为:菌龄7 d,以0.6mol·L-1 KCl作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间4.0 h,pH6.0,在此条件下原生质体产量高达1.97×107个·mL-1;菌龄6 d,以0.6 mol·L-1 MgSO4作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度2.0%,酶解温度30℃,酶解时间3.0 h,pH 6.5,再生培养基为GM时,原生质体的再...
【文章来源】：陕西理工大学陕西省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
拮抗试验结果
陕西理工大学硕士学位论文32图3-3拮抗试验结果Fig.3-3Antagonismtestresults3.3.3高效液相检测结果3.3.3.1色谱条件选择据文献报道，维生素B12在361nm处紫外吸收强度最大，且吸收峰干扰因素少[102]，因此试验中紫外检测器波长设置为361nm。酸性条件下维生素B12比较稳定，且磷酸盐对色谱柱有一定改性作用，因此用磷酸调节水相pH，并加入NaH2PO4缓冲，结果峰形对称且分离度高。3.3.3.2线性关系图3-5为测定维生素B12的标准曲线，其线性回归方程为Y=13.387X+0.7609（R2=0.9994），维生素B12在0.1μg·mL-1~10.0μg·mL-1范围内的线性关系良好。图3-4维生素B12标准品液相色谱图Fig.3-4LiquidchromatogramofvitaminB12standard时间（min）峰面积（mAU）时间（min）峰面积（mAU）6.200时间/min峰面积/mAU6.200
第3章姬松茸高产维生素B12菌株的诱变及选育35（a）（b）图3-6菌丝体维生素B12含量液相色谱图Fig.3-6LiquidchromatogramofvitaminB12contentinmycelium表3-7菌丝生长速度比较Tab.3-7Comparisonofthegrowthrateofmycelium菌株菌丝生长速度Mycelialgrowthrate/（cm·d-1）Strains第1代第5代第10代JS010.2450.2250.200BUV-50.2100.2050.185BUV-160.2300.2150.1903.3.4分子鉴定结果3.3.4.1PCR凝胶电泳结果图3-7为扩增ITS序列结果，从结果可以看出，本次实验扩增出单一且明亮的条带，同时该条带位置位于750bp左右，与预期结果一致，因此可以用于后续测序实验。峰面积/mAU时间/min6.422峰面积/mAU时间/min（min）6.485
【参考文献】：
期刊论文
[1]姬松茸原生质体制备及再生条件优化[J]. 邹彰毅,邓百万. 北方园艺. 2020(03)
[2]英媒：素食者应补充维生素B12[J]. 中国食品学报. 2020(01)
[3]2019年中国维生素产业透视[J]. 柳晓峰. 中国畜牧杂志. 2020(01)
[4]食用菌分子育种研究进展[J]. 张妍,黄晨阳,高巍. 菌物研究. 2019(04)
[5]高效液相色谱法测定强化食品中维生素B6的含量[J]. 刘桂果,王浩淼,李佳慧,李嘉禹,夏然. 食品安全质量检测学报. 2019(21)
[6]β-榄香烯与姬松茸萃取物的抗肿瘤作用和药理学研究[J]. 薛天乐,王庆,孙守国,刘耀武. 中国食用菌. 2019(11)
[7]2种微生物法测定婴幼儿乳粉中维生素B5含量的比较[J]. 黄钟标,吴思敏,郑思珩,严家俊. 食品安全质量检测学报. 2019(14)
[8]高精度定量毛细管电泳法同时测定复合维生素B片中B1、B2、B6、烟酰胺及泛酸钙[J]. 胡雯雯,陶建伟,王庆伟,李静,阎超,许旭. 色谱. 2019(06)
[9]B族维生素检测方法及其使用[J]. 王丹,朱小梅. 食品安全导刊. 2019(15)
[10]育秧大棚栽培姬松茸技术[J]. 郭炜,于洪久,张楠,钟鹏,孙彬,左辛,刘杰. 黑龙江农业科学. 2019(05)
硕士论文
[1]适于河南省栽培的高温平菇品种的选育[D]. 姜婷.河南科技学院 2019
[2]三种食用菌子实体的营养成分及抗氧化性分析[D]. 景彦萍.山西大学 2019
[3]金针菇与巨大口蘑原生质体融合育种研究[D]. 郑锦荣.华南农业大学 2016
[4]玉蕈与金针菇原生质体融合研究[D]. 王国正.天津师范大学 2016
[5]印度块菌与赤芝原生质体融合研究[D]. 马欣燕.天津师范大学 2016
[6]九种常用维生素治疗性、诊断性监测和临床应用研究[D]. 王乃东.山东大学 2015
[7]姬松茸液体发酵及其保肝胶囊的制备[D]. 王航.山东中医药大学 2015
[8]单孢杂交选育草菇耐低温高产新菌株[D]. 林锋.上海海洋大学 2015
[9]营养素补充剂类保健食品中维生素类成分检测方法研究[D]. 邢亚东.安徽中医药大学 2015
[10]巴氏蘑菇多糖降血糖机制的研究[D]. 欧阳玉倩.山西农业大学 2014
本文编号：2901324
【文章来源】：陕西理工大学陕西省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
拮抗试验结果
陕西理工大学硕士学位论文32图3-3拮抗试验结果Fig.3-3Antagonismtestresults3.3.3高效液相检测结果3.3.3.1色谱条件选择据文献报道，维生素B12在361nm处紫外吸收强度最大，且吸收峰干扰因素少[102]，因此试验中紫外检测器波长设置为361nm。酸性条件下维生素B12比较稳定，且磷酸盐对色谱柱有一定改性作用，因此用磷酸调节水相pH，并加入NaH2PO4缓冲，结果峰形对称且分离度高。3.3.3.2线性关系图3-5为测定维生素B12的标准曲线，其线性回归方程为Y=13.387X+0.7609（R2=0.9994），维生素B12在0.1μg·mL-1~10.0μg·mL-1范围内的线性关系良好。图3-4维生素B12标准品液相色谱图Fig.3-4LiquidchromatogramofvitaminB12standard时间（min）峰面积（mAU）时间（min）峰面积（mAU）6.200时间/min峰面积/mAU6.200
第3章姬松茸高产维生素B12菌株的诱变及选育35（a）（b）图3-6菌丝体维生素B12含量液相色谱图Fig.3-6LiquidchromatogramofvitaminB12contentinmycelium表3-7菌丝生长速度比较Tab.3-7Comparisonofthegrowthrateofmycelium菌株菌丝生长速度Mycelialgrowthrate/（cm·d-1）Strains第1代第5代第10代JS010.2450.2250.200BUV-50.2100.2050.185BUV-160.2300.2150.1903.3.4分子鉴定结果3.3.4.1PCR凝胶电泳结果图3-7为扩增ITS序列结果，从结果可以看出，本次实验扩增出单一且明亮的条带，同时该条带位置位于750bp左右，与预期结果一致，因此可以用于后续测序实验。峰面积/mAU时间/min6.422峰面积/mAU时间/min（min）6.485
【参考文献】：
期刊论文
[1]姬松茸原生质体制备及再生条件优化[J]. 邹彰毅,邓百万. 北方园艺. 2020(03)
[2]英媒：素食者应补充维生素B12[J]. 中国食品学报. 2020(01)
[3]2019年中国维生素产业透视[J]. 柳晓峰. 中国畜牧杂志. 2020(01)
[4]食用菌分子育种研究进展[J]. 张妍,黄晨阳,高巍. 菌物研究. 2019(04)
[5]高效液相色谱法测定强化食品中维生素B6的含量[J]. 刘桂果,王浩淼,李佳慧,李嘉禹,夏然. 食品安全质量检测学报. 2019(21)
[6]β-榄香烯与姬松茸萃取物的抗肿瘤作用和药理学研究[J]. 薛天乐,王庆,孙守国,刘耀武. 中国食用菌. 2019(11)
[7]2种微生物法测定婴幼儿乳粉中维生素B5含量的比较[J]. 黄钟标,吴思敏,郑思珩,严家俊. 食品安全质量检测学报. 2019(14)
[8]高精度定量毛细管电泳法同时测定复合维生素B片中B1、B2、B6、烟酰胺及泛酸钙[J]. 胡雯雯,陶建伟,王庆伟,李静,阎超,许旭. 色谱. 2019(06)
[9]B族维生素检测方法及其使用[J]. 王丹,朱小梅. 食品安全导刊. 2019(15)
[10]育秧大棚栽培姬松茸技术[J]. 郭炜,于洪久,张楠,钟鹏,孙彬,左辛,刘杰. 黑龙江农业科学. 2019(05)
硕士论文
[1]适于河南省栽培的高温平菇品种的选育[D]. 姜婷.河南科技学院 2019
[2]三种食用菌子实体的营养成分及抗氧化性分析[D]. 景彦萍.山西大学 2019
[3]金针菇与巨大口蘑原生质体融合育种研究[D]. 郑锦荣.华南农业大学 2016
[4]玉蕈与金针菇原生质体融合研究[D]. 王国正.天津师范大学 2016
[5]印度块菌与赤芝原生质体融合研究[D]. 马欣燕.天津师范大学 2016
[6]九种常用维生素治疗性、诊断性监测和临床应用研究[D]. 王乃东.山东大学 2015
[7]姬松茸液体发酵及其保肝胶囊的制备[D]. 王航.山东中医药大学 2015
[8]单孢杂交选育草菇耐低温高产新菌株[D]. 林锋.上海海洋大学 2015
[9]营养素补充剂类保健食品中维生素类成分检测方法研究[D]. 邢亚东.安徽中医药大学 2015
[10]巴氏蘑菇多糖降血糖机制的研究[D]. 欧阳玉倩.山西农业大学 2014
本文编号：2901324
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