流苏体细胞胚发生及茎段再生体系的构建
发布时间:2020-12-06 12:34
流苏(Chionanthus retusus)是木樨科(Oleaceae)流苏树属(Chionanthus)植物,国家二级珍稀植物,落叶灌木或乔木,集食用、药用、观赏和经济价值于一身。其耐盐、耐旱、耐寒,对复杂的南北方气候具有较强的适应能力。目前流苏传统繁殖方式主要以播种繁殖为主,生产周期较长,发芽率较低,为推进流苏无性系快速发展,进行以下研究。本试验首先以流苏幼胚为外植体,通过开展流苏体细胞胚发生的相关研究,筛选出了较为合适的培养基与培养条件,培养出了流苏体细胞胚再生植株;其次通过测定流苏体细胞胚不同发育阶段主要生理生化指标进一步揭示其生理机理;最后以茎段为外植体,确定了茎段快速繁殖技术的培养基及不同激素配比。研究结果如下:1、流苏幼胚体细胞胚发生(1)流苏幼胚体细胞胚诱导最适培养基:WPM+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D,体细胞胚诱导率可达12.36%。(2)最适诱导流苏体细胞胚萌发成苗培养基:MS+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3,萌发率可达41.3%,成苗率为29.82%。(3)通过设置不同暗培养时间0 d,3...
【文章来源】:山东农业大学山东省
【文章页数】:61 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
不同植物生长调节剂对体细胞胚诱导的影响
流苏体细胞胚发生及茎段再生体系的构建183.1.4基本培养基对流苏体细胞胚萌发成苗的影响由表10可以看出,流苏体细胞胚萌发率及成苗率与基础培养基类型具有显著关系,萌发率方面:MS>WPM>B5,萌发率分别为26.78%、16.10%、5.16%;成苗率情况:MS>WPM>B5,萌发率分别为11.25%、7.05%、0.32%。在B5培养基上难以萌发成苗,WPM培养基萌发率较低,成苗情况较差。MS培养基与其他培养基诱导萌发成苗情况差异显著。如图3-A,将已发育成熟颜色转绿的子叶形体细胞胚接种至MS培养基7d后,胚根长出,子叶膨大(见图2-A),培养至30d后胚芽萌发长出(见图2-B),胚根伸长至3cm左右,再培养60d长成完整植株(见图2-C)。经过多重比较与方差性分析,选择用MS培养基时,萌发率与成苗率均与其他培养基呈现显著差异(P<0.05),因此MS培养基最适诱导流苏体细胞胚萌发成苗。表10基本培养基对流苏体细胞胚萌发成苗的影响Table10EffectofbasicmediumonthegerminationandseedlingformationofsomaticembryoofChionanthusretusus组别Group基本培养基basalculturemedium萌发率Germinationrate(%)成苗率Seedlingrate(%)1B55.16±1.13c0.32±1.12c2WPM16.10±1.16b7.05±1.16b3MS26.78±2.78a11.25±3.02c图2流苏体细胞胚萌发成苗过程Fig.2ProcessofsomaticembryogerminationandseedlingformationofChionanthusretusus。A、接种至MS培养基7d后胚根长出B、30d胚芽萌发C100d长成3cm左右无菌苗3.1.5不同生长调节剂对流苏体细胞胚萌发成苗的影响由表11可以看出,以MS及基本培养基,单独添加1.0mg/L6-BA,培养7d后有胚根长出,体细胞胚萌发率为30.21%,成苗率为13.2%。保持6-BA浓度1.0mg/L不变,ABC
流苏体细胞胚发生及茎段再生体系的构建203.1.6.2体细胞胚发生过程中可溶性蛋白含量的变化由图4可以看出,可溶性蛋白在幼胚体细胞胚发生过程中呈现先上升后下降的趋势。可溶性蛋白含量在0-45d平稳上升,表明幼胚非胚性愈伤组织向胚性愈伤组织转变过程中,可溶性蛋白得到积累;在45-60d时,可溶性蛋白含量显著上升,并在60d时达到峰值为4.18mg/g,此时处于体细胞胚分化初期;在60-90d可溶性蛋白含量下降,在90d时可溶性蛋白含量为1.1mg/g,表明在幼胚体细胞胚分化后期及萌发过程中可溶性蛋白质被消耗。图4体胚发生过程中可溶性蛋白含量的变化Fig4Changesofsolublesugarincallus图3体胚发生过程中可溶性糖含量的变化Fig3Changesofsolublesugarincallus
本文编号:2901375
【文章来源】:山东农业大学山东省
【文章页数】:61 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
不同植物生长调节剂对体细胞胚诱导的影响
流苏体细胞胚发生及茎段再生体系的构建183.1.4基本培养基对流苏体细胞胚萌发成苗的影响由表10可以看出,流苏体细胞胚萌发率及成苗率与基础培养基类型具有显著关系,萌发率方面:MS>WPM>B5,萌发率分别为26.78%、16.10%、5.16%;成苗率情况:MS>WPM>B5,萌发率分别为11.25%、7.05%、0.32%。在B5培养基上难以萌发成苗,WPM培养基萌发率较低,成苗情况较差。MS培养基与其他培养基诱导萌发成苗情况差异显著。如图3-A,将已发育成熟颜色转绿的子叶形体细胞胚接种至MS培养基7d后,胚根长出,子叶膨大(见图2-A),培养至30d后胚芽萌发长出(见图2-B),胚根伸长至3cm左右,再培养60d长成完整植株(见图2-C)。经过多重比较与方差性分析,选择用MS培养基时,萌发率与成苗率均与其他培养基呈现显著差异(P<0.05),因此MS培养基最适诱导流苏体细胞胚萌发成苗。表10基本培养基对流苏体细胞胚萌发成苗的影响Table10EffectofbasicmediumonthegerminationandseedlingformationofsomaticembryoofChionanthusretusus组别Group基本培养基basalculturemedium萌发率Germinationrate(%)成苗率Seedlingrate(%)1B55.16±1.13c0.32±1.12c2WPM16.10±1.16b7.05±1.16b3MS26.78±2.78a11.25±3.02c图2流苏体细胞胚萌发成苗过程Fig.2ProcessofsomaticembryogerminationandseedlingformationofChionanthusretusus。A、接种至MS培养基7d后胚根长出B、30d胚芽萌发C100d长成3cm左右无菌苗3.1.5不同生长调节剂对流苏体细胞胚萌发成苗的影响由表11可以看出,以MS及基本培养基,单独添加1.0mg/L6-BA,培养7d后有胚根长出,体细胞胚萌发率为30.21%,成苗率为13.2%。保持6-BA浓度1.0mg/L不变,ABC
流苏体细胞胚发生及茎段再生体系的构建203.1.6.2体细胞胚发生过程中可溶性蛋白含量的变化由图4可以看出,可溶性蛋白在幼胚体细胞胚发生过程中呈现先上升后下降的趋势。可溶性蛋白含量在0-45d平稳上升,表明幼胚非胚性愈伤组织向胚性愈伤组织转变过程中,可溶性蛋白得到积累;在45-60d时,可溶性蛋白含量显著上升,并在60d时达到峰值为4.18mg/g,此时处于体细胞胚分化初期;在60-90d可溶性蛋白含量下降,在90d时可溶性蛋白含量为1.1mg/g,表明在幼胚体细胞胚分化后期及萌发过程中可溶性蛋白质被消耗。图4体胚发生过程中可溶性蛋白含量的变化Fig4Changesofsolublesugarincallus图3体胚发生过程中可溶性糖含量的变化Fig3Changesofsolublesugarincallus
本文编号:2901375
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