双瓣茉莉开花过程中挥发性物质变化及花香基因差异表达分析

发布时间：2017-04-25 05:17

  本文关键词：双瓣茉莉开花过程中挥发性物质变化及花香基因差异表达分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本研究以福建农林大学种植8年的双瓣茉莉为材料,利用GC-MS技术,检测双瓣茉莉5个不同时期花瓣的花香成分；利用cDNA-AFLP技术筛选出双瓣茉莉调控花香类物质合成相关的差异基因；并对相关基因进行了定量表达分析。这些结果为进一步研究茉莉花花香途径中代谢机理提供依据。主要结果如下：1.通过GC-MS技术分析表明开花期是挥发性物质集中释放期,花败期含量急剧下降,小花蕾和大花蕾时期仅少量释放,这符合茉莉花为气质花的特性。萜类和酯类挥发性物质是双瓣茉莉香主要成分,萜类挥发性物质在盛开时大量释放,酯类挥发性物质通常在花开12小时开花期释放量最高。五个不同时期共鉴定出43种挥发性成分,挥发性物质种类和绝大部分挥发性物质含量均是在开花期最高,其中含量较高的乙酸芳樟酯、α-金合欢烯、乙酸苯甲酯、苯甲醇、丫-依兰油烯、乙酸甲酯、反式-法呢醇和β-罗勒烯等是双瓣茉莉挥发性物质的主要成分；2.通过对花蕾Ⅰ期和盛花Ⅲ期进行cDNA-AFLP分析结果表明,得出100条差异片段,其中上调基因78个,下调基因22个。有85条可能参与了萜类物质代谢途径、苯类/苯丙素类物质代谢途径和脂肪酸代谢途径。与萜类物质代谢相关的基因上调23个,下调5个,占所有差异基因的28%；与苯类/苯丙素类物质代谢途径相关的上调基因35个,下调基因12个,占所有差异基因的47%；与脂肪酸类物质合成相关的上调基因8个,下调基因2个,占所有差异基因的10%;3.通过荧光定量分析,确定与花香合成途径相关的6条基因的相对表达量,即甲羟戊酸磷酸激酶基因(phosphomevalonate kinase. PMK. TDF#222-1)、3-酮酯酰-CoA硫解酶基因(3-ketoacyl CoA thiolase 2. TDF#159-1)、苯丙氨酸裂解酶基因(phenylalanine ammonia-lyase. PAL. TDF#219-2)、阿魏酸-5-羟化酶基因(Ferulic acid 5-hydroxylase. F5H. TDF#202-4)、脂肪氧合酶基因(Lipoxygenase. LOX. TDF#203-7)、茉莉酸诱导蛋白基因(Jasmonate induced protein. TDF#64-3)。该6条基因在不同时期的表达差异与cDNA-AFLP分析结果均一致。
【关键词】：双瓣茉莉 挥发性物质 气质联用 cDNA-AFLP 定量分析
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S685.16
【目录】：

• 缩写词目录7-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 第一章 综述11-20
• 1 双瓣茉莉的特性11
• 2 花香的研究进展及茉莉花的释香机理11-16
• 2.1 花香的研究进展11-12
• 2.2 茉莉花的释香机理及其生物合成途径12-16
• 3 与茉莉花挥发性物质代谢相关的酶16-17
• 3.1 甲羟戊酸磷酸激酶16-17
• 3.2 苯丙氨酸解氨酶17
• 3.3 脂肪氧合酶17
• 4 CDNA-AFLP技术及其应用17-18
• 5 研究意义与技术路线18-20
• 5.1 研究意义18
• 5.2 研究内容18
• 5.3 技术路线18-20
• 第二章 双瓣茉莉五个花期挥发性成分GC-MS分析20-32
• 1 材料和方法20-21
• 1.1 试验材料20
• 1.2 试验方法20-21
• 1.3 计算方法21
• 2 结果与分析21-30
• 2.1 双瓣茉莉五个时期挥发性物质的GC-MS总离子色谱圈21-23
• 2.2 双瓣茉莉五个不同时期挥发性物质的化学成分种类和含量变化23-24
• 2.3 双瓣茉莉五个不同时期挥发性物质种类及所占比例24-29
• 2.4 双瓣茉莉五个不同时期六大类挥发性物质峰面积29-30
• 3 讨论30-32
• 第三章 CDNA-AFLP筛选双瓣茉莉花香相关基因及定量表达分析32-61
• 1 试验材料与方法32-42
• 1.1 试验材料32-33
• 1.2 主要使用的仪器的试验试剂33
• 1.3 cDNA-AFLP技术筛选差异基因33-40
• 1.4 实时荧光定量基因表达分析40-42
• 2 结果与分析42-55
• 2.1 茉莉花总RNA的提取结果42
• 2.2 预扩增结果42
• 2.3 选择性扩增结果分析42-43
• 2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析43-52
• 2.5 荧光定量分析52-55
• 3 讨论55-61
• 3.1 萜烯类代谢途径55-57
• 3.2 苯类/苯丙素类代谢途径57-58
• 3.3 脂肪酸代谢途径58-61
• 小结与展望61-63
• 参考文献63-70
• 硕士期间发表论文70-71
• 致谢71

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本文编号：325706