抗性淀粉与OKGM降解产物对齐口裂腹鱼营养成分及脂质代谢相关基因表达的影响

发布时间：2017-05-02 14:10

  本文关键词：抗性淀粉与OKGM降解产物对齐口裂腹鱼营养成分及脂质代谢相关基因表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：本研究旨在探讨柠檬酸抗性淀粉(Citric acid-modified resistent starch,CARS)与部分降解的氧化魔芋葡甘聚糖(Partially Hydrolyzed Oxidized Konjac glucomannan,PHOKGM)两种不同类型多糖对齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti Tchang, SPT)生长、鱼肉营养成分、脂质代谢及其相关基因表达量的影响,评价其功能性作用,为CARS与PHOKGM在SPT养殖过程中的应用提供理论依据。方法：以添加4.6%淀粉为对照组(CK),CARS分别以3.2%和1·.6%等量替换对照组中4.6%的淀粉为试验组,PHOKGM则以3.2%、1.6%、0.8%等量替换对照组中4.6%的淀粉为试验组,分别为H-CARS、L-CARS、H-PHOKGM、M-PHOKGM、L-PHOKGM,饲喂60d后,解剖取样,参考国家标准测定肌肉中的常规组成,使用氨基酸自动分析仪测定肌肉中氨基酸组成；取血清,使用南京建成生产的试剂盒,通过紫外可见分光光度计测定血清中GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C等指标；利用实时定量荧光PCR技术,检测SPT肝脏、肌肉、肠道组织中脂质代谢相关基因(如PPARs、PGC-1α、 H-FABP、GPDH、Grelin)的相对表达量水平。结果：1.两种多糖对SPT肝体指数、肥满度、腹腔脂肪指数均没有显著性的影响(p0.05),能不同程度增加SPT增重率、及饲料效率,L-PHOKGM增加效果显著高于其他四个剂量组(p0.05)；2.两种多糖对SPT腹肌组成及背肌水分、灰分含量均没有显著影响(p0.05),但CARS可略微降低齐口裂腹鱼背肌脂肪沉积(p0.05),而PHOKGM则不同程度增加背肌脂肪沉积,L-PHOKGM增加显著(p0.05),L-PHOKGM略增加背肌中的蛋白含量(p0.05)；3.两种多糖对SPT背肌与腹肌中的氨基酸们组成没有影响,且背肌与腹肌中的氨基酸组成及含量也没有太大差异,必需氨基酸百分比含量约为42%,鲜味氨基酸百分比含量约为39%,经过化学评分与氨基酸评分,确定SPT肌肉中第一限制性氨基酸为蛋氨酸；4.PHOKGM与L-CARS显著增加血清中HDL-C含量(p0.05)；添加高剂量两种多糖显著降低血清中TG、TC含量(p0.05),且H-PHOKGM还显著降低LDL-C水平,因此H-PHOKGM相比其他组改善血脂的效果更突出；5.CARS除了降低肌肉组织中PPARB相对表达量(p0.05),对SPT肝脏、肌肉组织中PPARα、PPARβ、PPARγ没有显著性影响(p0.05),而H-PHOKGM及L-PHOKGM相比M-PHOKGM上调PPARα、PPARβ、PPARyP相对表达量更显著；PHOKGM显著降低了肝脏、肌肉组织中PGC-la相对表达量(p0.05),CARS对其相对表达量影响不显著(p0.05)；相比M-PHOKGM,H-PHOKGM及L-PHOKGM增加HFABP、GPDH在肝脏、肌肉组织中相对表达量更显著(p0.05),CARS则不同程度降低了其相对表达量；PHOKGM显著增加了肠道组织中Grelin相对表达量(p0.05),CARS对其表达量影响不显著(p0.05),两种多糖对SPT肠道组织中GPDH相对表达量产生了无规律影响。结论：在SPT日粮中添加0.8%PHOKGM,相比其他组能更好促进SPT生长；而添加3.2%PHOKGM相比其他组能更好改善SPT血脂代谢；除了添加0.8%PHOKGM能够促进背肌脂肪沉积,两种多糖对SPT鱼肉营养成分没有明显影响；相比添加1.6%PHOKGM,添加3.2%及0.8%PHOKGM均能上调肝脏、肌肉组织中PPARs、 H-FABP、GPDH及肠道组织中Ghrelin基因的表达量,下调PGC-la表达,而添加CARS除了不同程度下调PPARp、H-FABP及GPDH相对表达量,对其他基因表达量影响不显著。
【关键词】：柠檬酸抗性淀粉 部分降解氧化魔芋葡甘聚糖 齐口裂腹鱼 营养成分脂质代谢相关基因 相对表达量 荧光定量PCR技术
【学位授予单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 缩略词表9-12
• 1 文献综述12-27
• 1.1 多糖的研究12-17
• 1.1.1 氧化魔芋葡甘露聚糖(OKGM)12-15
• 1.1.2 柠檬酸抗性淀粉(CARS)15-17
• 1.2 多糖对齐口裂腹鱼功能性研究17-18
• 1.3 鱼肉品质的研究18-19
• 1.4 鱼类血脂代谢研究19-20
• 1.5 脂质代谢相关基因的研究20-27
• 1.5.1 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)20-23
• 1.5.2 过氧化物酶体增殖物激活受体Y的辅助激活因子1α(PGC-1α)23-25
• 1.5.3 心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)25-26
• 1.5.4 甘油3磷酸脱氢酶(GPDH)26
• 1.5.5 饥饿素(Ghrelin)26-27
• 1.6 试验的目的及意义27
• 2 材料与方法27-36
• 2.1 实验材料与设备27-29
• 2.1.1 试验用鱼27
• 2.1.2 试验原料27-28
• 2.1.3 实验试剂28-29
• 2.1.4 试验仪器设备29
• 2.2 试验方法29-36
• 2.2.1 多糖的制备29-30
• 2.2.2 动物的饲养30
• 2.2.3 试验动物生长性能指标的测定30-31
• 2.2.4 样品的采集制备31
• 2.2.5 鱼肉营养成分的测定31-32
• 2.2.6 脂质代谢相关指标的测定32
• 2.2.7 RNA的提取与cDNA制备32-34
• 2.2.8 荧光定量34
• 2.2.9 数据分析34-36
• 3 结果与分析36-50
• 3.1 两种多糖对SPT生长性能影响的结果分析36-37
• 3.2 两种多糖对SPT鱼肉品质影响的结果分析37-42
• 3.2.1 两种多糖对SPT肌肉组成的影响结果37-40
• 3.2.2 两种多糖对SPT肌肉氨基酸组成的影响结果40
• 3.2.3 两种多糖对SPT肉质性状的影响结果40-42
• 3.3 两种多糖对SPT血脂代谢指标影响的结果分析42-43
• 3.4 两种多糖对SPT脂质代谢相关基因相对表达量的影响43-50
• 3.4.1 RNA提取及引物特异性检测43-44
• 3.4.2 基因扩增曲线、溶解曲线及溶解峰44-46
• 3.4.3 两种多糖对PPARS相对表达量的影响结果46-47
• 3.4.4 两种多糖对SPT组织中PGC-1α相对表达量影响47-48
• 3.4.5 两种多糖对SPT组织中H-FABP相对表达量的影响48-49
• 3.4.6 两种多糖对SPT组织中GPDH相对表达量影响49
• 3.4.7 两种多糖对SPT肠道中GPDH、Grelin相对表达量的影响49-50
• 4 讨论50-55
• 4.1 两种多糖对SPT生长性能的影响50
• 4.2 两种多糖对SPT肌肉组成影响50-51
• 4.3 两种多糖对脂质代谢相关指标影响51-52
• 4.4 两种多糖对SPT脂质代谢相关基因表达影响52-55
• 5 结论与展望55-57
• 5.1 结论55-56
• 5.2 展望56-57
• 参考文献57-64
• 致谢64-65
• 攻读学位期间发表的学术论文65

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本文编号：341102