龙脑樟组织培养再生体系研究

发布时间：2017-05-30 03:04

  本文关键词：龙脑樟组织培养再生体系研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：樟树(Cirmamonun Camphora(L) presl)中含有的龙脑,具有重要的药用价值,被认为是我国冰片生产的最佳原料。龙脑樟有植物黄金的美誉,既是高级香料,又是名贵稀有药材,同时也是化工原料。本试验以优良龙脑樟扦插苗为基本研究材料,通过无性系繁殖获得植株,在组织培养过程中,开展了对龙脑樟不同外植体灭菌方式、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗和移栽等多个试验,建立龙脑樟无性繁殖体系。为龙脑樟工厂化育苗奠定基础。本试验的研究结果如下：1.龙脑樟无菌体系的建立。顶芽茎段使用：75%乙醇8s+0.1%HgCl2 8min+2滴吐温效果最好；茎段中部使用：75%乙醇10s+0.1%HgCl2 10min+2滴吐温效果最好；茎段基部：75%乙醇20s+0.1%HgCl2 15min+2滴吐温效果最好,可使外植体污染率降到最低,成活率最高。2.龙脑樟愈伤组织诱导。试验结果表明,外植体诱导愈伤组织难易排序：茎段叶柄嫩叶,选择茎段为愈伤组织外植体。愈伤组织诱导率最高的培养基配方为：MS+2,4-D3.0 mg/L+NAA0.4 mg/L+IBA0.4 mg/L;通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟愈伤组织诱导影响作用的顺序为：2,4-DIBANAA,2,4-D对龙脑樟愈伤组织诱导影响最大。3.龙脑樟不定芽诱导。试验结果表明,顶芽茎段的萌芽率明显高于带腋芽茎段。龙脑樟不定芽芽诱导培养基配方为：MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖20h/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为：6-BANAA蔗糖,6-BA各种浓度对不定芽诱导影响显著。4.抑制褐化。试验通过三种方式抑制褐化,试验结果表明,通过使用AC对外植体褐化抑制效果最佳,AC浓度在1.0g/L时抑制龙脑樟外植体褐化能力最强。5.龙脑樟愈伤组织诱导不定芽。愈伤组织继代增殖系数最高的培养基配方为：MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.6mg/L+蔗糖20g/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为：6-BANAA蔗糖。6.龙脑樟继代增殖培养。极差分析中的R值得出,各因素对不定芽增殖培养影响作用的顺序为：6-BANAAIBA。不定芽增殖系数最高的培养基配方为：MS+6-BA 3.5 mg/L+NAA0.25mg/L。7.继代次数对龙脑樟苗继代的影响。进行多次继代培养试验,研究多次继代对龙脑樟增殖系数的影响。随着继代次数增加,龙脑樟继代增殖系数先升后降。第二次继代平均增殖系数最大。8.龙脑樟的生根培养。龙脑樟组培苗生根最适宜培养基配方为：1/2MS+IBA0.5 mg/L+IAA1.0 mg/L+AC0.2g/L,通过极差分析结果和方差分析,各因素对龙脑樟不定芽诱导影响作用的顺序为：6-BANAAIBA。9.龙脑樟组培苗的移栽和炼苗。不同基质对龙脑樟组培苗移栽试验中,泥炭土：木屑=1：1的成活率明显高于其他基质。
【关键词】：龙脑樟 组织培养 外植体 愈伤组织 不定芽 离体快繁
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S792.23
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 1 绪论11-18
• 1.1 引言11-12
• 1.2 研究现状12-16
• 1.2.1 外植体的选择与表面消毒12-13
• 1.2.2 初代培养13-15
• 1.2.3 继代培养15
• 1.2.4 生根培养15-16
• 1.3 樟树国内外研究现状16-18
• 1.3.1 樟树组培快繁的研究16-17
• 1.3.2 龙脑樟国内外研究现状17-18
• 1.4 存在的问题18
• 2 试验准备18-21
• 2.1 试验地点18
• 2.2 试验材料18-19
• 2.3 预备试验设计19-20
• 2.4 预备试验结果与分析20-21
• 3 试验设计21-29
• 3.1 龙脑樟外植体灭菌试验设计21-23
• 3.1.1 顶芽茎段灭菌试验设计22
• 3.1.2 带腋芽茎的中部灭菌试验设计22-23
• 3.1.3 带腋芽茎的基部灭菌试验设计23
• 3.2 龙脑樟的初代培养试验设计23-26
• 3.2.1 龙脑樟愈伤组织诱导试验设计24-25
• 3.2.2 龙脑樟芽诱导试验设计25-26
• 3.2.3 初代培养中龙脑樟外植体褐化处理试验设计26
• 3.3 继代培养试验设计26-28
• 3.3.1 愈伤组织诱导不定芽再生培养试验设计26-27
• 3.3.2 龙脑樟的不定芽增殖培养试验设计27-28
• 3.3.3 龙脑樟继代次数对龙脑樟组培苗增殖系数的影响试验设计28
• 3.4 龙脑樟组培苗的生根培养试验设计28-29
• 3.4.1 不同生长素对生根培养的影响试验设计28-29
• 3.5 龙脑樟生根苗的炼苗和移栽29
• 3.5.1 炼苗29
• 3.5.2 不同移栽基质对龙脑樟组培苗成活率的影响29
• 3.6 数据统计分析方法29
• 4 结果与分析29-46
• 4.1 龙脑樟外植体灭菌试验29-32
• 4.2 龙脑樟的初代培养32-39
• 4.2.1 愈伤组织诱导研究32-35
• 4.2.2 不定芽诱导试验效果35-38
• 4.2.3 初代培养中龙脑樟外植体褐化处理效果38-39
• 4.3 龙脑樟继代培养39-44
• 4.3.1 愈伤组织继代试验结果39-41
• 4.3.2 龙脑樟的不定芽增殖培养41-43
• 4.3.3 龙脑樟继代次数对龙脑樟组培苗增殖系数的影响43-44
• 4.4 生根培养44-45
• 4.5 龙脑樟组培苗的炼苗和移栽45-46
• 4.5.1 不同基质对苗木成活率的影响45-46
• 5 小结与讨论46-51
• 5.1 小结46-49
• 5.1.1 外植体的选择与灭菌47
• 5.1.2 初代培养47-48
• 5.1.3 龙脑樟继代培养48-49
• 5.1.4 生根培养49
• 5.1.5 炼苗和移栽49
• 5.2 讨论49-51
• 参考文献51-55
• 附录55-58
• 致谢58

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本文编号：406222