湖南省柑橘黄龙病调查及病菌遗传多样性分析

发布时间：2017-06-27 14:22

  本文关键词：湖南省柑橘黄龙病调查及病菌遗传多样性分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：柑橘黄龙病(Citrus Huanglongbing)能对柑橘产业造成毁灭性的影响,其病原菌是一种细菌,属于薄壁菌门、韧皮部杆菌属。随着柑橘种植技术的大力推广和政府的扶持以及全球气候变暖,柑橘黄龙病的发生区域也在增多。为了了解柑橘黄龙病在我省的分布情况、传播特点、种群差异,更好地建立柑橘黄龙病防治示范区,本文对湖南省的零陵区、江华县、江永县、道县、宜章县、资兴市等20多个县(市),以及江西省的大余县、福建省的泉州市的柑橘叶片疑似发病样品及柑橘木虱进行检测,主要实验结果如下：1、对采集和送样的22个县(市)216份样品进行检测,结果显示郴州市北湖区、郴州市汝城县、郴州市永兴县等为柑橘黄龙病新的疫区,确定湖南省岳阳市岳阳县和华容县的柑橘黄龙病是由于苗木的随意调运而引起的。了解了湖南地区柑橘黄龙病的蔓延趋势及湖南、江西、福建三省的柑橘黄龙病发病情况。2、通过16S rDNA和M94319序列引物OI1/OI2和TL/TR进行PCR扩增并测序,用系统发生软件MEGA5.0进行聚类分析。结果发现湖南省内的柑橘黄龙病病原菌的遗传分化距离较小,江西赣州市两个县的样品基本属于同一个小种,福建泉州市的样品单独为一个小种。其遗传分化的规律主要取决于地域的分布,寄主植物品种的差异也是造成遗传分化的一个重要因素。由于M94319为黄龙病病原菌亚洲种的特有基因片段,因此能快速鉴定出病原菌是否为亚洲种。3、通过改进的SDS法提取单头柑橘木虱总DNA,通过OI1/OI2和TL/TR两种引物对提取的总DNA进行PCR扩增,与阳性对照保持一致的样品送样测序,可以快速鉴定其是否带有病原菌。这种检测体系对带毒木虱的检测率在80%以上,是一套比较完整,且稳定性、灵敏性、可操作性都十分好的柑橘木虱的检测体系。4、了解湖南地区的柑橘黄龙病的发生规律及基本防控方法。在春、夏、秋稍萌发的时候重点进行药剂防治,防止柑橘木虱的传毒,已经发病的园区采取及时挖除病株修剪病枝,未发病园区严格把关无毒苗木的调运。
【关键词】：柑橘黄龙病 遗传多样性 16S rDNA M94319 防控
【学位授予单位】：湖南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S436.66
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 文献综述10-22
• 1 柑橘黄龙病概述10-22
• 1.1 柑橘黄龙病的简介10-16
• 1.1.1 柑橘黄龙病的分布及在我国的发生情况10-11
• 1.1.2 柑橘黄龙病的症状11-13
• 1.1.3 柑橘黄龙病的病原13-16
• 1.1.4 柑橘黄龙病菌的传播16
• 1.2 柑橘黄龙病的诊断16-21
• 1.2.1 田间调查及指示植物鉴定16-17
• 1.2.2 理化性质鉴定法17-18
• 1.2.3 镜检法鉴定18
• 1.2.4 血清学鉴定18
• 1.2.5 分子生物学鉴定18-21
• 1.3 研究的目的和意义21-22
• 第二章 湖南省柑橘黄龙病的鉴定22-32
• 1 材料和方法22-29
• 1.1 材料22-23
• 1.1.1 样品采集地点及方法22-23
• 1.2 主要仪器和设备23-24
• 1.3 主要试剂及配置24-25
• 1.3.1 常用化学试剂24
• 1.3.2 常用试剂配置24-25
• 1.4 实验方法25-29
• 1.4.1 CTAB法提取柑橘叶片总DNA25
• 1.4.2 试剂盒取柑橘叶片总DNA25
• 1.4.3 改进SDS法提取单头木虱DNA25-26
• 1.4.4 凝胶电泳26-27
• 1.4.5 PCR扩增检测27-29
• 2 结果与分析29-31
• 3 结论与讨论31-32
• 第三章 遗传多样性分析32-38
• 1 材料与方法32-33
• 1.1 实验材料32
• 1.2 引物的选择32-33
• 2 结果与分析33-37
• 2.1 发病区域33-34
• 2.2 16S rDNA引物扩增结果34-35
• 2.3 M94319序列引物扩增结果35-37
• 3 小结37-38
• 第四章 总结与展望38-41
• 参考文献41-49
• 致谢49-50
• 个人简历50

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 浙江省赴闽柑橘考察团;福建省果树生产与柑橘黄龙病控防经验[J];浙江柑桔;2004年01期

2 程义华,夏建平;浙南山区景宁县防治柑橘黄龙病的做法[J];植物检疫;2004年06期

3 颜丽菊,高玲英;临海柑橘黄龙病发生的可能性及预防对策[J];浙江柑桔;2005年02期

4 王海英,方海涛,郑海东;乐清市柑橘黄龙病发生现状及思考[J];浙江柑桔;2005年02期

5 孟幼青;浙江省柑橘黄龙病发生现状和原因分析[J];浙江柑桔;2005年03期

6 杜一新,孟幼青,林云彪;柑橘黄龙病毁桩处理试验[J];植物检疫;2005年05期

7 黄贤国,徐建国,孟幼青;强化柑橘黄龙病的防控 促进浙江柑橘的持续发展[J];浙江柑桔;2005年01期

8 周晓音;丽水市柑橘黄龙病防控及产业持续发展的思考[J];浙江柑桔;2005年01期

9 夏建平;夏建美;夏建红;;景宁县柑橘黄龙病的发生与防控措施[J];浙江柑桔;2006年01期

10 邱柱石;全金成;;对当前广西柑橘黄龙病防治工作的思考[J];广西园艺;2006年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 孙大光;郑雪芳;刘波;阮传清;范国成;Hall D.;段永平;;柑橘黄龙病原16SrDNA序列异质性分析[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年

2 娄兵海;周常勇;;柑橘黄龙病研究进展[A];中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会论文集[C];2007年

3 刘蕤;张培;高一滴;蒲雪莲;陈健炽;邓晓玲;;柑橘黄龙病菌“Candidatus Liberibacter asiaticus”种群多样性的研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年

4 邓明学;;广西柑橘黄龙病危害现状、损失评估及控制对策[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年

5 徐建华;蔡玲玲;郭恒;蒲雪莲;邓晓玲;;应用实时荧光PCR定量检测柑橘黄龙病菌的研究[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年

6 谢攀;殷幼平;李颜方;李佳;王中康;;柑橘黄龙病病原菌与伴生菌的共培养技术研究[A];中国植物病理学会2011年学术年会论文集[C];2011年

7 顾云琴;李云明;叶建人;;温岭市柑橘黄龙病防控技术应用[A];中国植物病理学会2012年学术年会论文集[C];2012年

8 关磊;梁美丹;仇绮琪;张学文;许美容;夏育陆;邓晓玲;;利用热处理技术降低柑橘黄龙病菌的浓度[A];中国植物病理学会2012年学术年会论文集[C];2012年

9 谢钟琛;谢文龙;肖文生;黄天瑞;施清;李健;;福建柑橘黄龙病爆发成因及其危害流行规律[A];中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会论文集[C];2007年

10 杨建榕;李健;;台湾地区柑橘黄龙病流行病学研究进展[A];中国柑橘科技创新与产业发展战略论坛暨中国柑橘学会2007年年会论文集[C];2007年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 通讯员 刘先春 周健 黄宗仁;恭城打响歼灭柑橘黄龙病战役[N];桂林日报;2006年

2 记者　 盛力;用三年时间打好柑橘黄龙病防控战[N];丽水日报;2006年

3 记者 韩晓玲　通讯员 范敬群;对付柑橘黄龙病良策[N];湖北日报;2008年

4 记者 王瑜;农业部全力遏制柑橘黄龙病扩散[N];农民日报;2014年

5 本报记者 傅仁斌 通讯员 廖翠娥;柑橘黄龙病监测控防技术有突破[N];湖南科技报;2006年

6 沈渊专;台湾专家传授柑橘黄龙病防治方法[N];福建日报;2008年

7 记者 陈张;我市采取积极措施整治柑橘黄龙病[N];桂林日报;2009年

8 永州市林科所 柏劲松;预防柑橘黄龙病[N];湖南科技报;2006年

9 广西兴安县科技局 康忠武;种树不容易,砍树也难![N];科技日报;2007年

10 省农科院果树所副研究员 范国成;柑橘黄龙病诊断及防控技术[N];福建科技报;2011年

中国博士学位论文全文数据库 前2条

1 杨川毓;柑橘黄龙病的化学防治以及宏基因组分析[D];福建农林大学;2015年

2 丁芳;柑橘黄龙病菌及与其混合发生病毒的分子特性及超低温脱除研究[D];华中农业大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 姚锦爱;柑橘黄龙病病原多态性及抗血清的制备与应用[D];福建农林大学;2009年

2 陈娇月;柑橘黄龙病菌原噬菌体的基因区域遗传多态性研究[D];西南大学;2015年

3 高玉霞;柑橘黄龙病PCR检测引物比较及其外膜蛋白抗体的研制[D];赣南师范学院;2015年

4 邓清;柑橘黄龙病高光谱快速无损诊断方法[D];华东交通大学;2016年

5 董俊;湖南省柑橘黄龙病调查及病菌遗传多样性分析[D];湖南农业大学;2015年

6 周彬彬;中国地区亚洲韧皮杆菌多样性分析及多重PCR检测柑橘黄龙病和溃疡病[D];重庆大学;2009年

7 胡文召;中国柑橘黄龙病病原及分化研究[D];西南大学;2010年

8 陈伟;柑橘黄龙病菌基因组中的基因倍增与进化[D];扬州大学;2011年

9 陈仕钦;柑橘黄龙病防控药剂筛选及防控技术研究[D];重庆大学;2013年

10 谢攀;柑橘黄龙病病原菌共培养体系的构建[D];重庆大学;2015年

  本文关键词：湖南省柑橘黄龙病调查及病菌遗传多样性分析，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：490160