油酰甘氨酸对C2C12细胞蛋白质沉积的影响
本文关键词:油酰甘氨酸对C2C12细胞蛋白质沉积的影响,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:瘦肉率对生猪生产来说是一个尤其重要的经济指标,而这一指标主要取决于猪骨骼肌的生长发育。因此,猪骨骼肌生长发育的研究成为近年来研究的一个热点。研究猪骨骼肌的生长发育,不仅对提高猪的生长速率至关重要,而且对改善猪肉品质具有重要的理论意义和应用价值。脂酰氨基酸广泛分布于脑组织和其他外周组织中。已有大量研究表明,脂酰氨基酸在镇痛抗炎、细胞增殖、细胞凋亡和3T3-L1细胞聚酯等方面具有重要的调控作用。为了研究脂酰氨基酸对骨骼肌生长发育的影响,本试验以C2C12细胞为研究对象,采用不同种类和不同剂量的脂酰氨基酸处理C2C12细胞,研究其对细胞增殖、分化和蛋白质沉积的影响,筛选出本试验所需的脂酰氨基酸。同时探讨其对C2C12细胞增殖、分化、蛋白质沉积和肌纤维类型的影响,以及对C2C12细胞蛋白质沉积相关信号通路的影响。研究结果表明:(1)脂酰氨基酸对C2C12细胞的增殖和分化均无显著影响;但一定剂量的脂酰氨基酸能够促进C2C12细胞蛋白质的合成。其中,OLGly发挥作用的有效剂量最小。(2)OLGly对C2C12细胞的增殖和分化均无显著影响;2和20μM的OLGly能够促进C2C12细胞蛋白质的合成,且呈剂量依赖性(P0.05)。OLGly是以复合体发挥促进蛋白质合成的作用。(3)OLGly显著提高处理30 min和60 min后细胞的ERK和S6蛋白的磷酸化水平(P0.05),但对mTOR蛋白的表达水平却无显著影响(P0.05),同时对蛋白质降解通路的FoxO1、MAFBx和MuRF1的蛋白和mRNA表达水平无显著影响(P0.05)。(4)OLGly能够显著降低C2C12 MyHC IIx和MyHC IIb基因的蛋白和mRNA的表达水平(P0.05),而对MyHC I和MyHC IIa基因的蛋白和mRNA的表达水平无明显影响(P0.05)。上述试验结果提示:OLGly显著促进C2C12细胞蛋白质的合成是通过提高MAPK信号通路中的ERK蛋白和mTOR信号通路中的S6蛋白的磷酸化水平,而不是通过减少分解途经实现的。本研究结果旨在阐明脂酰氨基酸对猪骨骼肌生长发育的营养调控,为进一步研制调控肌肉发育的新型功能性调控物提供试验依据。
【关键词】:油酰甘氨酸 增殖和分化 蛋白质沉积 肌纤维类型
【学位授予单位】:华南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:S828
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-11
- 1 前言11-18
- 1.1 骨骼肌生长发育的过程11-12
- 1.2 调控骨骼肌生长发育的相关因素12-15
- 1.2.1 调控骨骼肌细胞增殖的相关因素12-13
- 1.2.2 调控骨骼肌细胞分化的相关因素13-14
- 1.2.3 调控骨骼肌细胞蛋白质沉积的相关因素14-15
- 1.3 脂酰氨基酸的研究进展15-17
- 1.3.1 脂酰氨基酸的结构15-16
- 1.3.2 脂酰氨基酸的来源16
- 1.3.3 脂酰氨基酸的功能16-17
- 1.4 本研究的目的和意义17-18
- 2 材料和方法18-34
- 2.1 材料18-21
- 2.1.1 主要仪器设备18
- 2.1.2 试验细胞及动物18
- 2.1.3 试验用品及耗材18-19
- 2.1.4 试验用品的清洗及消毒19-20
- 2.1.5 主要试剂的配制20-21
- 2.2 脂酰氨基酸对C2C12细胞增殖、分化和蛋白质沉积的影响21-25
- 2.2.1 C2C12细胞的复苏及传代培养21-22
- 2.2.2 脂酰氨基酸对C2C12细胞增殖的影响22
- 2.2.3 脂酰氨基酸对C2C12细胞分化的影响22-23
- 2.2.4 脂酰氨基酸对C2C12细胞蛋白质沉积的影响23-25
- 2.3 OLGly对C2C12细胞增殖、分化、蛋白质沉积和肌纤维类型相关基因表达水平的影响25-33
- 2.3.1 OLGly对C2C12细胞增殖以及相关基因mRNA表达水平的影响25-29
- 2.3.2 OLGly对C2C12细胞分化以及相关基因mRNA表达水平的影响29
- 2.3.3 OLGly对C2C12细胞蛋白质沉积的影响29-32
- 2.3.4 OLGly对C2C12细胞蛋白质沉积相关信号通路分子的影响32-33
- 2.3.5 OLGly对C2C12细胞肌纤维类型相关基因表达水平的影响33
- 2.4 数据统计与分析33-34
- 3 结果与分析34-42
- 3.1 脂酰氨基酸对C2C12细胞增殖、分化和蛋白质沉积的影响34-35
- 3.1.1 脂酰氨基酸对C2C12细胞增殖的影响34
- 3.1.2 脂酰氨基酸对C2C12细胞分化的影响34-35
- 3.1.3 脂酰氨基酸对C2C12细胞蛋白质沉积的影响35
- 3.2 OLGly对C2C12细胞增殖、分化、蛋白质沉积和肌纤维类型的影响35-42
- 3.2.1 OLGly对C2C12细胞增殖的影响35-36
- 3.2.2 OLGly对C2C12细胞分化的影响36-37
- 3.2.3 OLGly对C2C12细胞蛋白质沉积的影响37-40
- 3.2.4 OLGly对C2C12细胞肌纤维类型相关基因表达水平的影响40-42
- 4 讨论与结论42-45
- 4.1 OLGly对C2C12细胞增殖的影响42
- 4.2 OLGly对C2C12细胞分化的影响42-43
- 4.3 OLGly对C2C12细胞蛋白质沉积的影响43-44
- 4.4 OLGly对C2C12细胞肌纤维类型转化的影响44
- 4.5 结论44-45
- 致谢45-46
- 参考文献46-50
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