养羊业是我国畜牧业的重要组成部分,我国存栏绵、山羊约3.8亿只。在草食家畜中,羊对饲料的转化率较高,采食范围和适应性较广,可以充分利用其他家畜无法利用的资源。提高我国农业资源的综合产出率,对促进畜牧业经济发展、维护产业平衡和健康可持续发展具有重要的作用。繁殖性状是养羊业重要的经济性状。本实验检测了新吉细毛羊8个基因多态性,并对布鲁拉美利奴羊与新吉细毛羊杂交后代卵巢颗粒细胞上8个基因表达量研究。旨在为提高绵羊、山羊繁殖力,增加产羔数工作中提供理论依据。本研究主要获得以下结论:1、利用PCR-RFLP技术对126只新吉细毛羊BMPR-1B基因多态性分析,结果显示新吉细毛羊不存在BMPR-1B基因多态性。推测BMPR-1B基因不是新吉细毛羊群体多胎性状主效基因。2、利用PCR-SSCP技术对118只新吉细毛羊骨形态发生蛋白15基因(BMP15)、生长分化因子基因9(GDF9)的多态性研究。在BMP15基因研究中,发现P1引物扩增片段存在多态性,呈现三种基因型:AA型、AC型、CC型。该突变为BMP15基因外显子1上58-60位置CTT三个碱基缺失。新吉细毛羊?2值达到显著水平,Hardy-Weinberg不平衡。不同基因之间新吉细毛羊平均产羔数差异不显著(P0.05)。在GDF9基因研究中,新吉细毛羊不存在多态性。GDF9基因T477C突变不能作为新吉细毛羊多胎性状遗传标记位点。3、利用ABI测序仪对119只新吉细毛羊Gn RHR、LHR、FSHR、PRLR、ESR基因多态性分析。结果发现FSHR基因不存在突变位点。Gn RHR、LHR、PRLR、ESR四个基因存在13个突变位点。Gn RHR基因存在A505G、G720C突变,LHR基因存在T1262G、A1991G、C2012T、A2032T、T2041A的突变,PRLR基因存在A1263G、C1544G突变,ESR基因存在A106T、C181T、G612A、C735T突变。在新吉细毛羊群体四个基因多态性与产羔数相关性分析结果中,Gn RHR基因G720C突变对新吉细毛羊产羔数影响显著(P0.05)。其中CC型个体平均产羔数为2,比GG基因型、GC基因型分别多0.822、0.806个。ESR基因A106T突变对新吉细毛羊产羔数影响显著。其中AA、AT、TT 3种基因型个体的平均产羔数分别为1.391、1.101、1.417。AA基因型、TT基因型平均产羔数比AT基因型分别多0.290、0.316个(P0.05)。AA基因型、TT基因型平均产羔数之间差异不显著(P0.05)。4、利用实时荧光定量PCR分析了布鲁拉美利奴羊与新吉细毛羊杂交1代++型和B+型卵巢颗粒细胞上BMPR-1B、BMP15、GDF9、Gn RHR、LHR、FSHR、ESR、AMH八个基因表达情况。研究结果发现:++型和B+型卵巢颗粒细胞的BMPR-1B、Gn RHR、LHR、FSHR基因m RNA表达水平差异不显著(P0.05);B+型卵巢颗粒细胞的BMP15、AMH基因m RNA表达水平显著高于++型(P0.05);GDF9、ESR基因m RNA表达水平极显著低于++型(P0.01);ESR基因m RNA表达水平显著高低于++型(P0.05)。实验结果表明BMPR-1B、BMP15、GDF9、LHR、FSHR、PRLR基因不存在与新吉细毛羊多胎性状相关的突变位点。而ESR的A106T突变推测可作为新吉细毛羊多胎性状遗传标记。同时,新吉细毛羊群体引入Fec B基因后,繁殖性状相关基因表达水平发生明显改变。其实验结果为Fec B基因提高绵羊产羔率的机理提供了实验依据。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S826
【文章目录】：摘要
Abstract
前言
第一篇 文献综述
第一章 绵羊多胎基因研究进展
1.1 绵羊主效多胎基因
1.2 生殖激素相关基因
1.3 其他多胎候选基因
1.4 小结
第二章 基因多态性检测方法
2.1 限制性片段长度多态性（RFLP）
2.2 单链构象多态性（SSCP）
2.3 高分辨率熔解曲线（HRM）
2.4 测序技术
2.5 其他技术
第二篇 研究内容
第一章 新吉细毛羊BMPR-1B基因多态性分析
1.1 材料与方法
1.2 结果
1.3 讨论
第二章 新吉细毛羊BMP15、GDF9 基因多态性分析
2.1 材料与方法
2.2 结果
2.3 讨论
第三章 新吉细毛羊生殖激素相关受体基因多态性分析
3.1 材料与方法
3.2 结果与分析
3.3 讨论
第四章 八个繁殖相关基因在卵巢颗粒细胞上差异表达分析
4.1 材料与方法
4.2 实验结果
4.3 讨论
结论
参考文献
作者简介
致谢
【参考文献】
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本文编号：
2852079
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