四川地区仔猪艰难梭菌分子分型调查研究

发布时间：2020-10-30 21:34

　　 艰难梭菌(Clostridium difficile,CD),是一种重要的人兽共患病原菌,该菌容易定植仔猪肠道导致仔猪肠炎。本研究旨在进行四川地区腹泻仔猪艰难梭菌的分子分型调查。首先,证实四川地区腹泻仔猪存在一定程度艰难梭菌感染。在四川地区6个养猪场共采集110份仔猪粪便标本,厌氧培养共分离艰难梭菌20株,其中用PCR扩增毒素基因tcdB鉴定了9株,用PCR扩增其16S rDNA鉴定了其余11株。四川地区腹泻仔猪艰难梭菌总分离率为18.2%(20/110),调查猪场阳性检出率为83.3%(5/6)。其次,发现四川地区腹泻仔猪艰难梭菌存在有3种毒素基因型。毒素基因分型里A+B+CDT-型包含菌株B3、B4、B5和B19(广安市邻水县),菌株LW3和LW6(南充市阆中市);A+B+CDT+型包含菌株C1和C2(成都市崇州市),菌株P1(眉山市彭山区);A-B-CDT-型包含菌株Y1-Y10(宜宾市江安县)、菌株P2(眉山市彭山区)。最后,鉴定四川地区腹泻仔猪有艰难梭菌5种多位点序列型。菌株B3、B4、B5和B19(广安市邻水县)菌株属ST36型;菌株C1、C2(成都市崇州市)和菌株P1(眉山市彭山区)菌株均为ST11型;菌株P2(眉山市彭山区)菌株属ST3型;菌株LW3和LW6(南充市阆中市)菌株属ST35型;菌株Y1-Y10(宜宾市江安县)菌株属ST109型。研究同时鉴定了3株ST11型艰难梭菌,揭示在四川地区腹泻仔猪群有高毒力菌株流行的风险。
【学位单位】：四川农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S852.61
【部分图文】：

表 1-4 四川地区仔猪群粪便样本和艰难梭菌菌株分离情况 1-4 Summary of fecal samples and isolates in different areas of Si地点 总样本数 腹泻样本(＋)正常样本(－)腹泻样本分离株正常样分离安邻水 43 26 17 4 0都崇州 4 4 0 2 0宾江安 12 8 4 8 2充阆中 6 6 0 2 0山彭山 5 5 0 2 0充蓬安 40 3 37 0 0总计 110 52 58 18 2

宾江安 12 8 4 8 2充阆中 6 6 0 2 0山彭山 5 5 0 2 0充蓬安 40 3 37 0 0总计 110 52 58 18 2图 1-1 用艰难梭菌鉴别培养基分离出的艰难梭菌菌落形态Fig.1-1 Colony morphology of Clostridium difficile in ChromI

图 1-3 艰难梭菌在 1000 ×油镜下形态Morphology of Clostridium difficile in oil immersion ledB 的检测结果 tcdB 是艰难梭菌特有基因，故可用于鉴定B，结果发现广安市邻水县分离出的 4 株菌州市分离出的 2 株菌（C1 和 C2）、眉山市彭阆中市分离出的 2 株菌（LW3 和 LW6）都 11 株在 BHIA 培养基上菌落形态和气味都 tcdB，这并不能说明这些没有扩增出毒素基果图示例如下：
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本文编号：2863026