湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫感染情况及基因分型研究

发布时间：2020-11-09 08:14

　　 蓝氏贾第虫是一种宿主广泛且呈世界性分布的机会致病性人兽共患寄生虫,可感染人和多种动物,包括啮齿动物。宿主感染后可出现急慢性腹痛、腹泻、脱水、消化不良和呕吐等临床症状,严重者可以导致死亡。随着我国特种养殖业的快速发展,蓝氏贾第虫感染兔子、栗鼠等啮齿动物的报道也在逐渐增多,甚至有报道称部分啮齿动物蓝氏贾第虫感染率超过90%。进一步研究发现,在啮齿动物至少存在5种蓝氏贾第虫集聚体(A、B、D、E和G),包括人兽共患集聚体A和B。由此可见,啮齿动物可能具有传播蓝氏贾第虫给人类的潜在风险。中华竹鼠作为一种在我国南方广泛养殖的啮齿动物,具有重要的经济价值和药用价值,但人工养殖的中华竹鼠易被各种病原感染,然而目前尚缺乏有关中华竹鼠感染蓝氏贾第虫的报道。基于此,本研究首先利用基于β-贾第素(beta-giardin,bg)的分子生物学技术研究了湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫的感染率,并利用基于bg、磷酸丙糖异构酶基因(triosephosphate isomerase,tpi)和谷氨酸脱氢酶基因(glutamate dehydrogenase,gdh)的多位点基因分型(Multilocus genotyping,MLG)的方法研究了中华竹鼠蓝氏贾第虫的遗传多样性,研究结果可为该地区中华竹鼠蓝氏贾第虫感染的防控提供基础数据。本研究从湖南省的武冈市、郴州市、怀化市和吉首市的6个养殖场共采集480份中华竹鼠新鲜粪便样品,基于bg基因位点的巢式PCR扩增发现,52份(10.8%)粪便样品存在蓝氏贾第虫的感染。所调查的6个养殖场中华竹鼠蓝氏贾第虫的感染率也存在显著差异(?~2=59.031,df=5,P0.01),其中4个养殖场存在蓝氏贾第虫感染,感染率最高的为武冈市的场3(38.2%),而在郴州市的场4和吉首市的场6没有发现感染;同时,武冈市所调查的3个养殖场的感染率差异也显著(?~2=28.876,df=2,P0.01)。进一步研究发现,所调查的4个年龄段(6月龄、6-12月龄、12-24月龄和24月龄)中华竹鼠的感染率差异也显著(?~2=28.298,df=3,P0.01),且感染率随着年龄的增加呈现下降的趋势,其中6月龄的感染率(22.8%)最高,而24月龄的感染率(4.6%)最低。为了分析蓝氏贾第虫的遗传多样性,本研究对52个bg阳性的粪便样品分别在tpi和gdh基因位点进行了巢式PCR扩增,分别在2个位点扩增出了12个和27个粪便样品。对其序列进行BLAST分析发现,所有的阳性样品均属于人兽集聚体B。序列比对分析发现,在bg、tpi和gdh基因位点分别存在6个(Ba1~Ba6)、4个(Bb1~Bb4)和6个(Bc1~Bc6)单倍型。对在3个位点均成功扩增的8个样品进行多位点基因分型发现,它们形成了7个MLGs(MLGB1~MLGB7)。综上所述,湖南省部分地区中华竹鼠存在蓝氏贾第虫感染,其感染率与中华竹鼠年龄、地理分布等因素密切相关,且存在人兽共患集聚体B和MLGs。本研究结果扩展了蓝氏贾第虫的宿主范围,并为采取有效防控措施防止蓝氏贾第虫在人和动物间的传播提供了基础资料。
【学位单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S855.9
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
文献综述
    第一章 啮齿动物蓝氏贾第虫感染情况研究进展
        1.1 形态学
        1.2 生活史
        1.3 致病特点
        1.4 啮齿动物蓝氏贾第虫病的流行病学特征
            1.4.1 啮齿动物蓝氏贾第虫的感染情况
            1.4.2 啮齿动物蓝氏贾第虫的集聚体分布情况
        1.5 诊断
            1.5.1 粪便检查
            1.5.2 免疫学检测
            1.5.3 分子生物学检测
        1.6 防治
        1.7 本研究的目的和意义
试验研究
    第二章 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫感染情况及基因分型研究
        2.1 材料与方法
            2.1.1 材料
                2.1.1.1 粪便样品
                2.1.1.2 主要仪器设备
                2.1.1.3 主要试剂及溶液配制
            2.1.2 方法
                2.1.2.1 粪便样品基因组DNA提取
                2.1.2.2 基因位点扩增及电泳
                2.1.2.3 测序和序列分析
                2.1.2.4 统计分析
        2.2 结果
            2.2.1 bg位点PCR扩增结果
            2.2.2 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫的感染情况
            2.2.3 tpi和 gdh位点PCR扩增结果
            2.2.4 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫亚型分布
            2.2.5 湖南省部分地区中华竹鼠多位点分型结果
        2.3 讨论
            2.3.1 地区和饲养情况对中华竹鼠蓝氏贾第虫感染的影响
            2.3.2 年龄对中华竹鼠蓝氏贾第虫感染的影响
            2.3.3 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫集聚体分布
            2.3.4 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫亚型分布
            2.3.5 湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫多位点基因分型情况
            2.3.6 中华竹鼠蓝氏贾第虫感染的防控策略
结论
参考文献
致谢
个人简历

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘全,张西臣;蓝氏贾第虫基因转染研究进展[J];中国人兽共患病杂志;2004年03期

2 傅善杰;蓝氏贾第虫病的诊断与治疗[J];山东医药;1991年08期

3 张永红;用酶联免疫吸附试验诊断贾第虫病以及抗蓝氏贾第虫抗体与某些异种抗原和成分间的交叉反应[J];国外医学(寄生虫病分册);1985年05期

4 励正康;厌氧原虫蓝氏贾第虫的能量代谢[J];国外医学(寄生虫病分册);1981年01期

5 徐景藩;常山治疗蓝氏贾第虫病的体会[J];江苏中医;1962年10期

6 田宗成,张西臣;首次在我国蓝氏贾第虫(Giardia lambia)体内发现病毒粒子[J];中国兽医学报;2003年01期

7 ;蓝氏贾第虫的分离和纯培养[J];国外医学参考资料(寄生虫病分册);1977年04期

8 卢思奇，王凤芸，肖祖林;蓝氏贾第虫福建株的分离与纯培养[J];首都医学院学报;1994年03期

9 ;培养蓝氏贾第虫的研究:细菌和氨基酸的作用[J];国外医学参考资料(寄生虫病分册);1977年04期

10 卢思奇;李靖炎;文建凡;沈剑钊;祝虹;王正仪;李继红;王凤云;郭增柱;;中国蓝氏贾第虫虫株分离培养、基因型及其细胞核(结构功能和进化)研究[J];医学研究通讯;2002年03期

相关博士学位论文 前1条

1 田宗成;中国蓝氏贾第虫病毒的鉴定、全长cDNA构建及部分衣壳蛋白表达[D];中国人民解放军军需大学;2003年

相关硕士学位论文 前6条

1 马峋;湖南省部分地区中华竹鼠蓝氏贾第虫感染情况及基因分型研究[D];西北农林科技大学;2019年

2 王丹;隐孢子虫和蓝氏贾第虫在青海省牦牛中的流行情况及其种群结构研究[D];西北农林科技大学;2018年

3 武省;蓝氏贾第虫贾第素α-18和α-12基因的克隆、原核表达及其亚细胞定位[D];华南农业大学;2016年

4 杜帅之;秦岭部分珍稀动物蓝氏贾第虫、隐孢子虫和毕氏肠微孢子虫种群结构研究[D];西北农林科技大学;2015年

5 苏艳;东北地区部分儿童及奶牛中隐孢子虫和贾第虫感染的分子流行病学调查[D];吉林大学;2011年

6 余新刚;蓝氏贾第虫贾第素α-13及延伸因子EF-1α的原核表达及亚细胞定位[D];华南农业大学;2016年

本文编号：2876144