伪狂犬病病毒Qihe547分离株全基因组测序分析

发布时间：2017-04-06 19:26

  本文关键词：伪狂犬病病毒Qihe547分离株全基因组测序分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的猪的急性致死性传染病。PR广泛分布于世界各国,是当前危害养猪业的一种最为严重的病毒性疾病,给养猪产业造成巨额经济损失。20世纪90年代以来通过基因缺失疫苗的广泛使用及鉴别诊断方法的应用使PR在我国猪场得到有效控制,但自2011年底以来,我国多省份的免疫Bartha-K61疫苗的猪场陆续暴发PR,山东各地区免疫Bartha-K61疫苗的猪场也相继发生PR,造成母猪繁殖障碍,新生仔猪出现神经症状和高死亡率。2014年11月份至2015年3月,本研究从山东4个地区的5个疑似PR发病的规模化猪场采集的病料样品中分离多株PRV野毒株,对其中分离自山东齐河地区的PRV毒株进行了全基因组测序及遗传变异分析。1、猪伪狂犬病病毒分离和鉴定2014年11月份至2015年3月,样品采集自山东济南、齐河、沂水、费县4个地区5个疑似PR发病猪场。将组织样品匀浆,应用荧光定量PCR方法检测,确定为PRV野毒感染。组织匀浆上清过滤除菌,接种到PK15细胞上,接种约8h细胞开始出现变圆、合胞体等典型病变。分离病毒经蚀斑纯化,在PK15细胞上连续传代增殖,并提取收获的细胞培养液的DNA,使用gE基因特异性引物鉴定显示所分离的PRV毒株为野毒株。将分离5株PRV分别命名为Qihe547、SDYS1、SDYS2、SDFX、SDJN,其中Qihe547株在PK15细胞上TCID50达到10-7.0/0.1ml。将PRV分离株细胞培养液接种体重23從竿贸鱿制嫜鳌⒖幸Ы又植课弧⒓饨械鹊湫土俅仓⒆，

本文编号：289534