猪德尔塔冠状病毒入侵的分子机制及疫苗免疫保护的初步评价

发布时间：2020-12-12 22:12

　　猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）属于冠状病毒科,δ冠状病毒属成员,是一种新型肠道冠状病毒,可引起不同日龄的猪只感染并表现出腹泻、呕吐、脱水的临床症状。疫苗免疫,尤其是母猪的被动免疫是预防和控制腹泻性病毒（PEDV、TGEV、PoRV和PDCoV）感染最有效的方法。目前,PDCoV缺少商品化的疫苗,对疫病的防控无疫苗可用。因此,灭活疫苗的制备及免疫评价对PDCoV的防控显得尤为重要。本研究首先在5日龄SPF猪上对PDCoV分离株PDCoV NH P10的致病性进行研究,结果表明以10⁴ TCID₅₀口服感染1 mL病毒,攻毒后24 h,出现典型的腹泻的临床症状。剖检显示肠壁变薄,内有淡黄色液体。病理切片HE染色表明,空肠和回肠的肠绒毛在感染后72 h出现明显的萎缩、变短和脱落。空肠和回肠是PDCoV感染的主要肠段。与文献报道不同的是PDCoV NH株感染后没有出现呕吐的临床症状。同时,本研究在猪回肠细胞系IPI-2I细胞上研究了PDCoV入侵细胞的分子机制,结果表明PDCoV可以通过两种途径感染细... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

冠状病毒电镜照片（NCBISARSsource）

学位论文 N 蛋白与核糖体亚基或核仁蛋白相互作用而发挥功能的(Le的棘突蛋白 S，其功能与其它冠状病毒 S 相似，在病毒与细胞挥重要作用(Shang et al.,2018)。同时，S 蛋白也决定了病毒和抗体的主要抗原。因此，在冠状病毒的疫苗设计中，S 蛋和 N 基因之间，编码了一个非结构蛋白 NS6，其功能为拮抗逃逸的功能(Fang et al.,2016;Fang et al.,2018)。在 N 基因中同时但具体功能还不清楚(Fang et al.,2017;Koonpaew et al.,2019;Z

学位论文 D22 (DC44) 株(Hu et al.,2015)。国内陈建飞等人用 LLC-PK 细分离到 PDCoV NH 株。在病毒的分离和培养过程中，病毒的酶可以显著提高病毒在传代过程中的病毒滴度。然而有研究表C-PK 细胞上复制但是没有细胞病变，并且病毒滴度比添加胰制不是必须的但胰酶的添加有助于病毒在 LLC-PK 细胞上复制 LLC-PK 细胞略有不同，胰酶并不能促进 PDCoV 在 ST 细胞上续传代需要添加胰液素或来源于无菌仔猪的小肠内容物。在 P中添加胰酶和 ST 细胞中添加胰液素，病毒产生相似的致细胞细胞变大、变圆、部分细胞出现细胞融合、细胞皱缩脱落现象l.,2016)。胰酶或胰液素在病毒分离和传代中的作用现在还不清毒入侵细胞过程中，S 蛋白的切割对于病毒的感染至 et al.,1999)。当 S 蛋白被细胞内的蛋白酶或外源添加的胰酶切促进病毒的囊膜和细胞膜融合，病毒基因组才能释放到细胞子。

【参考文献】：
期刊论文
[1]同时检测PEDV和TGEV及PDCoV的多重RT-PCR方法的建立及初步应用[J]. 任玉鹏,张斌,汤承,曹恭貌,岳华.  中国兽医科学. 2016(06)
[2]新现猪Delta冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及其应用[J]. 张帆帆,宋德平,周信荣,黄冬艳,李安琪,彭棋,陈燕君,吴琼,何后军,唐玉新.  中国农业科学. 2016(07)
[3]猪流行性腹泻病毒的分离培养与鉴定[J]. 钱永清,闻人楚,唐永兰,孙智锋.  上海农业学报. 1999(02)
[4]猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻穴位针刺免疫的研究[J]. 王明,马思奇,周金法,于文涛,魏凤祥,崔现兰,冯力,佟有恩,李伟杰,张为民,唐丽萍,黄庆州,孟宪松.  中国畜禽传染病. 1997(06)



本文编号：2913365