采用小鼠模型评价糠氨酸的毒性作用
发布时间：2020-12-14 01:42
本研究通过构建体内体外模型,综合评价糠氨酸对HePG-2,HeK-293,CaCo-2,SK-N-SH的细胞毒性以及对小鼠的毒性作用。主要研究内容和结果如下:1.糠氨酸对体外细胞的影响:利用CCK-8试剂盒检测细胞活力,检测结果显示糠氨酸处理组与对照组相比细胞活力显著下降。利用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,检测结果显示糠氨酸处理组细胞在S期时细胞分裂抑制,HePG-2,HeK-293细胞凋亡率升高。2.糠氨酸半数致死浓度值(LD50):根据构建急性毒性小鼠模型试验得到糠氨酸对小鼠半数致死浓度值(LD50)为1.6g/kg。依据1/3半数致死浓度值计算慢性毒性小鼠模型中糠氨酸浓度分别为糠氨酸低剂量组（0.1g/kg）、糠氨酸中剂量组（0.25 g/kg）、糠氨酸高剂量组（0.50 g/kg）。3.糠氨酸对小鼠的毒性作用:结果1)小鼠体重变化:糠氨酸处理组小鼠体重明显降低。2)脏器系数比值:根据小鼠脏器系数比值得出,糠氨酸处理组雌雄鼠的肝脏指数与肾脏指数明显增大。3)血常规检测:根据血细胞分析仪检测结果显示糠氨酸处理组,白细胞总数（WBC）增...
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
美拉德反应产物结构
4.1 各指标测量结果4.1.1 急性毒性试验结果在急性毒性模型中，连续 14 天灌胃并对小鼠观察，试验第二天小鼠出现体重下降，出现腹泻，被毛无光泽等症状，计算糠氨酸对小鼠半数致死浓度值（LD50）为 1.6g/kg，依据 1/3 半数致死浓度值计算亚急性毒性试验中糠氨酸浓度分别为0.1g/kg、0.25 g/kg、0.50 g/kg。4.1.2 糠氨酸影响 4 种细胞活力用不同浓度糠氨酸处理 Hek-293,HepG-2,SK-N-SH, Caco2 这四种细胞，结果如图二所示，研究表明，糠氨酸处理组与对照组相比 Hek-293 细胞和 HepG-2 细胞在糠氨酸浓度为 0.2mM 时细胞活力降低（P <0.05）。而 SK-N-SH 细胞在糠氨酸浓度为 0.39mM 时开始出现细胞活力降低（P <0.05）。Caco-2 细胞在糠氨酸为 0.2mM开始出现细胞活力降低。Hek-293 细胞和 HepG-2 细胞对糠氨酸干扰最为敏感。活细胞率 =（细胞总数-死细胞数）/ 细胞总数 x 100%
4.1.4 糠氨酸诱导细胞凋亡通过 AnnexinV / PI 试剂盒利用流式细胞仪检测细胞凋亡，如图 4 中所示，UL：偏差指控（包括机械损伤造成细胞凋亡）UL 所占比率小说明试验细胞可用，试验过程中对细胞造成的人为性损伤比较小；UR：晚期凋亡细胞（包括坏死性细胞），UR 所占比例高表明细胞凋亡增多，细胞坏死；LR：早期凋亡细胞; LL：正常活细胞。通过细胞凋亡率计算得知，如图 5 所示：（1）Hek293 细胞凋亡率：对照组细胞凋亡率为 20.64%，糠氨酸浓度在 0.2mM时细胞凋亡率为 27.58%，糠氨酸浓度在 0.79mM 时细胞凋亡率为 75.89%，高浓度的糠氨酸处理 Hek293 细胞与对照组和低浓度糠氨酸处理组相比，造成细胞凋亡明
【参考文献】：
期刊论文
[1]代谢性疾病防控的新大陆——肠道菌群[J]. 邵加庆. 医学研究生学报. 2016(01)
[2]肠道菌群对免疫系统的影响及其群落分析方法[J]. 陈丹丹,顾胜华,张金娜,宝福凯,汤岳琴,吴晓磊. 应用与环境生物学报. 2013(03)
[3]美拉德反应及其对食品加工过程的影响[J]. 周永生,周文娟. 安徽农业科学. 2010(27)
[4]守宫木对小鼠血液指标和脏器系数的影响[J]. 那顺巴雅尔,于博,孔小明. 中国畜牧兽医. 2008(01)
[5]雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响[J]. 刘向云,邱晓燕,吴建辉,李志玲,朱焰,刘桂明,何桂林,蒋秀蓉,曹霖,孙祖越. 中国实验动物学报. 2007(02)
[6]饲料原料变质的原因及防制措施[J]. 李富珍,敬风玲,赵冰倩. 畜禽业. 2004(07)
[7]镉对雌性大鼠体重变化和卵巢脏器系数的影响[J]. 黄雅卿,张文昌,李煌元. 职业与健康. 2003(07)
[8]二氧化钛纳米颗粒和雌二醇对小鼠子宫脏器系数和过氧化物酶活性的影响[J]. 郑丽舒,金一和,张颖花. 中国工业医学杂志. 2002(02)
[9]SPF小型猪主要脏器重量脏器系数的测定[J]. 詹纯列,李权超,徐本法,孙桂华,王西风,李建军,杨传红,黄小让. 中国实验动物学杂志. 2001(04)
[10]饲料褐变对饲料质量的影响[J]. 黄贻彬,袁洪岭,王艳芳,贾端红. 中国饲料. 1999(05)
本文编号：2915567
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
美拉德反应产物结构
4.1 各指标测量结果4.1.1 急性毒性试验结果在急性毒性模型中，连续 14 天灌胃并对小鼠观察，试验第二天小鼠出现体重下降，出现腹泻，被毛无光泽等症状，计算糠氨酸对小鼠半数致死浓度值（LD50）为 1.6g/kg，依据 1/3 半数致死浓度值计算亚急性毒性试验中糠氨酸浓度分别为0.1g/kg、0.25 g/kg、0.50 g/kg。4.1.2 糠氨酸影响 4 种细胞活力用不同浓度糠氨酸处理 Hek-293,HepG-2,SK-N-SH, Caco2 这四种细胞，结果如图二所示，研究表明，糠氨酸处理组与对照组相比 Hek-293 细胞和 HepG-2 细胞在糠氨酸浓度为 0.2mM 时细胞活力降低（P <0.05）。而 SK-N-SH 细胞在糠氨酸浓度为 0.39mM 时开始出现细胞活力降低（P <0.05）。Caco-2 细胞在糠氨酸为 0.2mM开始出现细胞活力降低。Hek-293 细胞和 HepG-2 细胞对糠氨酸干扰最为敏感。活细胞率 =（细胞总数-死细胞数）/ 细胞总数 x 100%
4.1.4 糠氨酸诱导细胞凋亡通过 AnnexinV / PI 试剂盒利用流式细胞仪检测细胞凋亡，如图 4 中所示，UL：偏差指控（包括机械损伤造成细胞凋亡）UL 所占比率小说明试验细胞可用，试验过程中对细胞造成的人为性损伤比较小；UR：晚期凋亡细胞（包括坏死性细胞），UR 所占比例高表明细胞凋亡增多，细胞坏死；LR：早期凋亡细胞; LL：正常活细胞。通过细胞凋亡率计算得知，如图 5 所示：（1）Hek293 细胞凋亡率：对照组细胞凋亡率为 20.64%，糠氨酸浓度在 0.2mM时细胞凋亡率为 27.58%，糠氨酸浓度在 0.79mM 时细胞凋亡率为 75.89%，高浓度的糠氨酸处理 Hek293 细胞与对照组和低浓度糠氨酸处理组相比，造成细胞凋亡明
【参考文献】：
期刊论文
[1]代谢性疾病防控的新大陆——肠道菌群[J]. 邵加庆. 医学研究生学报. 2016(01)
[2]肠道菌群对免疫系统的影响及其群落分析方法[J]. 陈丹丹,顾胜华,张金娜,宝福凯,汤岳琴,吴晓磊. 应用与环境生物学报. 2013(03)
[3]美拉德反应及其对食品加工过程的影响[J]. 周永生,周文娟. 安徽农业科学. 2010(27)
[4]守宫木对小鼠血液指标和脏器系数的影响[J]. 那顺巴雅尔,于博,孔小明. 中国畜牧兽医. 2008(01)
[5]雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响[J]. 刘向云,邱晓燕,吴建辉,李志玲,朱焰,刘桂明,何桂林,蒋秀蓉,曹霖,孙祖越. 中国实验动物学报. 2007(02)
[6]饲料原料变质的原因及防制措施[J]. 李富珍,敬风玲,赵冰倩. 畜禽业. 2004(07)
[7]镉对雌性大鼠体重变化和卵巢脏器系数的影响[J]. 黄雅卿,张文昌,李煌元. 职业与健康. 2003(07)
[8]二氧化钛纳米颗粒和雌二醇对小鼠子宫脏器系数和过氧化物酶活性的影响[J]. 郑丽舒,金一和,张颖花. 中国工业医学杂志. 2002(02)
[9]SPF小型猪主要脏器重量脏器系数的测定[J]. 詹纯列,李权超,徐本法,孙桂华,王西风,李建军,杨传红,黄小让. 中国实验动物学杂志. 2001(04)
[10]饲料褐变对饲料质量的影响[J]. 黄贻彬,袁洪岭,王艳芳,贾端红. 中国饲料. 1999(05)
本文编号：2915567
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