棕榈酸对围产期奶牛中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响

发布时间：2020-12-14 08:23

　　围产期奶牛在产后体内易出现能量负平衡,从而使得血浆中非脂化脂肪酸的浓度大大升高。最新的研究证实高浓度的非脂化脂肪酸可以导致围产期亚急性炎症尤其是代谢性炎症。同时,棕榈酸是非脂化脂肪酸毒性最大且变化最大的脂肪酸,有可能参与炎症与免疫抑制,但进一步的机制并不明确。中性粒细胞作为动物机体先天免疫系统的主要效应细胞,较新的机制发现中性粒细胞胞外诱捕网的形成是免疫机制之一。为明确中性粒细胞胞外诱捕网的形成是否为棕榈酸诱导炎症和免疫应答的机制,本研究将探讨奶牛围产期对中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响和机制。研究采用红细胞裂解法分离了围产期产后奶牛（DIM:7-12）的外周血中性粒细胞培养,使用荧光显微镜（SYTOX Orange染料）、扫描电子显微镜观察中性粒细胞胞外诱捕网的形态,使用Picogreen荧光染料对双链DNA进行定量测定,TMB法测定髓过氧化物酶（MPO）的水平,来明确棕榈酸是否能引起中性粒细胞胞外诱捕网的形成。其次,使用比色法检测乳酸脱氢酶活性,使用DHCF法检测活性氧水平,辣根过氧化物酶比色法检测过氧化氢的活性水平,Western blot技术检测PI3K/Akt通路相关蛋白Akt... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要符号对照表
第一章 文献综述
    1.1 棕榈酸与围产期奶牛亚急性炎症
        1.1.1 围产期奶牛生理状况
        1.1.2 围产期奶牛普遍存在亚急性炎症与免疫抑制
        1.1.3 围产期奶牛棕榈酸的来源
        1.1.4 棕榈酸与亚急性炎症和免疫的关系
    1.2 中性粒细胞胞外诱捕网及其形成机制
        1.2.1 中性粒细胞的功能
        1.2.2 中性粒细胞胞外诱捕网形成及发展
        1.2.3 中性粒细胞胞外诱捕网的功能
        1.2.4 中性粒细胞胞外诱捕网形成机制
    研究假设
第二章 棕榈酸对中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响
    2.1 材料和方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 试验结果
        2.2.1 中性粒细胞活率鉴定结果
        2.2.2 中性粒细胞的提取纯度
        2.2.3 PA对中性粒细胞乳酸脱氢酶活力的影响
        2.2.4 NETs生成鉴定
        2.2.5 PA对中性粒细胞MPO活性水平的影响
        2.2.6 NETs定量结果
        2.2.7 蛋白浓度定量结果
        2.2.8 PA对 NETs形成相关蛋白表达水平的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 棕榈酸通过PI3K/Akt信号通路调节奶牛NETs的机制
    3.1 材料和方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验方法
    3.2 试验结果
        3.2.1 PA对中性粒细胞超氧化物水平的影响
        3.2.2 PA对Nox2蛋白表达水平的影响
        3.2.3 PA对PI3K/Akt通路主要蛋白表达水平的影响
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 结论
附录
参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]西红花对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究[J]. 李萌,马致洁,章从恩,章前,于卫东,陈熹,赵奎君.  世界中医药. 2019(04)
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[3]中性粒细胞胞外诱捕网研究进展和启示[J]. 夏杰,占玲,张丹,雷琴,王蓉.  黄冈职业技术学院学报. 2018(02)
[4]NEFAs在酮病奶牛脂肪动员以及氧化应激中的作用[J]. 邹苏萍,郝宁,陶焕青,明鹏飞,徐怡钟,梁婷,冯士彬,王希春,吴金节,李玉.  生物学杂志. 2018(03)
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博士论文
[1]β-羟丁酸通过GPR109A-mTOR信号通路调节奶牛NETs的机制[D]. 张玉明.吉林大学 2018
[2]葡萄籽原花青素分离提纯、组分鉴定及抗氧化性研究[D]. 吴朝霞.沈阳农业大学 2005

硕士论文
[1]棕榈酸诱导奶牛氧化应激及其机制的研究[D]. 代少华.西北农林科技大学 2018
[2]IGF-1缓解高酮血症奶牛中性粒细胞免疫抑制的机制[D]. 赵志波.吉林大学 2017
[3]NEFAs通过线粒体功能紊乱诱导奶牛肝细胞胰岛素抵抗的信号机制[D]. 高文文.吉林大学 2016
[4]奶牛围产期酮病和乳热的早期预警体系的研究[D]. 王博.黑龙江八一农垦大学 2014



本文编号：2916129