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PI3K/Akt通路在洛克沙胂促血管生成中的作用

发布时间:2020-12-26 12:37
  目的:洛克沙肿(Rox)即3-硝基-4-羟基苯胂酸,是一种在世界范围内被广泛使用的有机胂畜禽饲料添加剂。洛克沙肿在体内吸收很少,绝大多数随粪便排泄。畜禽粪便作为有机肥使用后,增加了环境中砷水平及人类砷污染的风险。目前,国内外关于洛克沙胂促血管生成的研究较少,洛克沙胂促血管生成的机制尚不明确。本文通过大鼠血管内皮细胞生长、迁移及管形成体外试验,以及小鼠B16F10黑色素移植瘤模型,研究洛克沙胂体内外促血管生长中PI3K/Akt信号机制。方法:大鼠血管内皮细胞经不同处理后,通过MTT试验、BrdU增殖试验、划痕试验、管形成试验,分别检测血管内皮细胞的活力、增殖、迁移和体外管形成能力;通过Western Blot检测细胞中PI3K/Akt信号蛋白和VEGF的表达。不同处理分组如下:空白对照组(PBS)、阳性对照组(10 ng/mL VEGF),洛克沙胂处理组(0.1 μmol/L、1.0 μmol/L和10.0 μmol/L Rox),P13K抑制剂处理组(20.0 μmol/L LY294002)和共处理组(20.0 μmol/L LY294002+1.0μmol/L Rox)。在小鼠黑色... 

【文章来源】:扬州大学江苏省

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

PI3K/Akt通路在洛克沙胂促血管生成中的作用


图3?Akt信号的调控PI??细胞接受刺激或PIP3生成之后,Akt的PH结构域与PIP3相互作用,易位于细胞膜

内皮细胞,细胞活力,活力,数据


?接种于96孔板内6?h后可W完全贴壁,W该时间点的细胞活力作为对照。1.0叫lol/L洛克??沙肿处理不同时间,对内皮细胞活为的影响见图4A。12?h、24?h和36?h这王个时间点的??细胞活力均显著高于6h的细胞活力(户;?12?h的细胞活力与24?h的细胞活力无??显著性差异(F>0.M);而36h的细胞活力显著大于24h的细胞活为(户<0.0/)。??内皮细胞经过不同药物或试剂处理24?h,MTT法检测细胞活力见图4B。相对于空白??对照组,VEGF作为阳性对照,能够显著增强内皮细胞的活力)?!?1.0叫lol/L??洛克沙肿处理也表现出增强内皮细胞活力的作用(尸<0.05?);?0.1?|1〇1〇1/1^和10.0?^tmol??洛克沙肿处理组相对OD值均高于对照组,但差异不显著。LY294002处理组相对OD值??比空白对照组低,差异思著(),而共处理组相对〇〇值与1.0?^〇11〇1/1^各克沙胖??处理组相比,呈现极显著的降低)。??A?B?,??2。1?T?14-?*?T?王??§?1.5.?早?II?丽?§?T?南?王??1?院霞3圍?1?.難缓圍?J?X患??oJi?I?iiiil?ill?ill?p-sjM?y?擊?il.il?闡?B?擊.??於办庐鲁?於、决\冷\/、放、炎、次、??Roxarsonc?LY294002??图4不同处理对大鼠内皮细胞活力的影响??各组OD值数据均先与对照组的平均值相比,数据最终W比值的meaniSD表示。A为l.Onmol/LRox??处理不同时间血管内皮细胞的巧对活力

血管内皮细胞,洛克,绿色,细胞核


*???<"0.?M?VS?Con仕〇!;?##?尸?<0.?口/?VS?1.0?|imol/L?Rox。??2.2对内皮细胞増殖能力的影响??图5A所示为血管内皮细胞BrdU英光染色图像,BrdU阳性细胞核呈现绿色蒙光。阳??性细胞核计数结果见图5B。与空白对照组相比,阳性对照组血管内皮细胞增殖活为极显??著増强()?;?l-O^mol/L洛克沙肿处理提高了血管内皮细胞的增殖能力,与空白??对照组相比,差异具有显著性),0.1?^mol/L洛克沙肿处理后阳性细胞核数目??多于空白对照组,但差异不显著(),10.0叫nol/L洛克沙肿处理后阳性细胞核??数目低于空白对照组,但差异无显著性(P>0.M)。与空白对照组相比,抑制组血管内??

【参考文献】:
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本文编号:2939712

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