抗磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体的制备与鉴定
发布时间：2020-12-31 00:25
磺胺二甲基嘧啶（Sulfamethazine,SM2）,属于磺胺类药物中应用相对广泛的一种,具有氨基苯磺酰胺的特殊结构,它是一种广谱抗菌药物,由于其见效快,成本低,易获得,被广泛应用于预防和治疗动物原虫病和细菌性疾病。SM2能够促进动物生长,故常被当作饲料添加剂在动物饲养中长期使用。若不合理使用SM2,易残留在畜产品中,人食用后危害人体健康。世界各国对相关食品中磺胺类药物的残留均做出了相应的规定,欧盟国家规定磺胺类药物残留总量不得超出100μg/kg,单个药物不得超过25μg/kg。日本规定在食品中不得检出磺胺类药物。我国农业部于2002年12月在第235号文件中规定,在所有动物的脂肪、肌肉、肝脏和肾脏中磺胺类药物的残留限量不得超出100μg/kg,并且将磺胺二甲基嘧啶列为兽药残留监控的重点。目前,用微生物学、仪器和酶联免疫等方法来检测SM2。其中微生物法检测速率高,但灵敏度低,特殊的选择性差,仪器检测方法准备样品的时候浪费时间、繁琐、仪器太贵而且需要专业人员操作才能完成。而酶联免疫检测法灵敏度高、速度快、可批量筛选,无需大型仪器设备,比较适用于大量样本的初次筛选。本实验用重氮化法合成...
【文章来源】：天津农学院天津市
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SM2与BSA偶联物的紫外扫描鉴定Fig2-1UltravioletscanningforconjugatebetweenSM2andBSA注：图中A为SM2，B为BSA，C为SM2-BSA
图 2-2 SDS-PAGE 检测抗原偶联物结果g 2-2 SDS-PAGE detection of antigen conjugate 1 为偶联物，泳道 2 为 BSA。合成抗原 SM2-BSA 的条带与载体蛋白本实验结果与紫外光谱扫描结果吻合，子量为 250.28，不具备诱导机体产生抗体蛋白偶联成人工完全抗原，才能诱导，是制备出特异性和灵敏度高的抗 SM免疫分析检测的重要环节。
天津农学院专业硕士学位论文进行免疫，SM2-BSA 作为包被抗原，通过间接非竞争 ELISA 检测四血清效价，对 4 只小鼠进行间接非竞争 ELISA 检测，结果显示四只价均达到了 1:20w，其中 Mice 1 的血清效价最高为 1:819200。表明 4 以用于细胞融合。
【参考文献】：
期刊论文
[1]邻氯苯亚甲基丙二腈的工业合成新工艺[J]. 邵国斌,霍二福,刘菲,张谦华,徐桦. 河南科学. 2013(09)
[2]硅胶固载离子液体-基质固相分散/高效液相色谱法测定禽肉与肝脏中8种磺胺类药物残留[J]. 王志兵,王月,孟庆娟,陆琼梅,唐民才. 分析测试学报. 2013(09)
[3]动物源性食品中磺胺类药物残留的危害及监控对策[J]. 李国柱,陈灏,张广源. 广东畜牧兽医科技. 2013(04)
[4]斯康杜尼局部浸润麻醉在下颌磨牙急性牙髓炎治疗中的临床应用[J]. 陈丹宇,符起亚,庞红霞. 海南医学. 2013(07)
[5]兽药残留检测技术研究进展[J]. 高洁,苗虹. 食品安全质量检测学报. 2013(01)
[6]磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备[J]. 魏镭,王战辉,江海洋,杨光,徐飞,李娜. 中国兽医杂志. 2012(12)
[7]动物性食品中磺胺类药物残留检测研究进展[J]. 赵旭壮,李明元. 中国食品卫生杂志. 2012(03)
[8]动物性食品中磺胺药物的残留分析方法进展[J]. 邓樱花,黄元乔,吴田,张洪权. 湖北第二师范学院学报. 2012(02)
[9]猪场如何正确使用磺胺类药物及抗菌增效剂[J]. 吕惠序. 兽医导刊. 2012(02)
[10]动物性食品中磺胺类药物残留检测方法的研究进展[J]. 赵书景,贺绍君,罗国琦,袁逢新,张卫宪. 中国畜牧兽医. 2009(08)
博士论文
[1]动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立[D]. 康健.燕山大学 2014
[2]食品中兽药残留高通量筛查与检测平台的建立及膳食暴露评估研究[D]. 刘畅.第二军医大学 2013
[3]非动物源性新型载体的研制及其对磺胺类药残检测特性的影响[D]. 陈蕾.华南理工大学 2011
[4]多西环素在斑点叉尾鮰中安全使用及快速检测技术研究[D]. 艾晓辉.四川农业大学 2011
[5]莱克多巴胺及磺胺二甲基嘧啶免疫学快速检测技术研究[D]. 李学伍.华中农业大学 2009
[6]单克隆抗体检测炭疽芽孢[D]. 王殿冰.华中农业大学 2008
[7]中美两国兽药管理比较研究[D]. 董义春.华中农业大学 2008
[8]液相色谱—电化学法测定氨基糖苷类抗生素药物分析方法的研究[D]. 习玲玲.浙江大学 2008
[9]剑尾鱼在水产药物临床试验中应用研究[D]. 黄志斌.南京农业大学 2006
[10]超高效液相色谱—电喷雾串联四极杆质谱法测定动物源性食品和尿液中糖皮质激素残留[D]. 崔晓亮.天津大学 2006
硕士论文
[1]地下水中磺胺类抗生素降解菌及附载材料研究[D]. 王佳丽.吉林大学 2017
[2]金刚烷胺单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 蔡云虹.扬州大学 2017
[3]酸性橙Ⅱ单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立[D]. 刘若璇.扬州大学 2017
[4]中间产物在磺胺嘧啶生物降解中的作用[D]. 张伊宁.上海师范大学 2017
[5]中草药和益生菌的筛选及其在凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）养殖中的应用[D]. 冯玲倩.青岛农业大学 2016
[6]强力霉素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 刘金萍.扬州大学 2016
[7]胭脂红单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 王兴.扬州大学 2016
[8]广州市畜禽产品质量安全事件链分析及政府应急管理体系构建研究[D]. 谭诺.华南理工大学 2015
[9]牛结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D]. 王彩宏.黑龙江八一农垦大学 2015
[10]复方磺胺嘧啶混悬液在肉鸡体内的生物等效性及残留检测方法研究[D]. 张晓晓.中国农业科学院 2015
本文编号：2948582
【文章来源】：天津农学院天津市
【文章页数】：48 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SM2与BSA偶联物的紫外扫描鉴定Fig2-1UltravioletscanningforconjugatebetweenSM2andBSA注：图中A为SM2，B为BSA，C为SM2-BSA
图 2-2 SDS-PAGE 检测抗原偶联物结果g 2-2 SDS-PAGE detection of antigen conjugate 1 为偶联物，泳道 2 为 BSA。合成抗原 SM2-BSA 的条带与载体蛋白本实验结果与紫外光谱扫描结果吻合，子量为 250.28，不具备诱导机体产生抗体蛋白偶联成人工完全抗原，才能诱导，是制备出特异性和灵敏度高的抗 SM免疫分析检测的重要环节。
天津农学院专业硕士学位论文进行免疫，SM2-BSA 作为包被抗原，通过间接非竞争 ELISA 检测四血清效价，对 4 只小鼠进行间接非竞争 ELISA 检测，结果显示四只价均达到了 1:20w，其中 Mice 1 的血清效价最高为 1:819200。表明 4 以用于细胞融合。
【参考文献】：
期刊论文
[1]邻氯苯亚甲基丙二腈的工业合成新工艺[J]. 邵国斌,霍二福,刘菲,张谦华,徐桦. 河南科学. 2013(09)
[2]硅胶固载离子液体-基质固相分散/高效液相色谱法测定禽肉与肝脏中8种磺胺类药物残留[J]. 王志兵,王月,孟庆娟,陆琼梅,唐民才. 分析测试学报. 2013(09)
[3]动物源性食品中磺胺类药物残留的危害及监控对策[J]. 李国柱,陈灏,张广源. 广东畜牧兽医科技. 2013(04)
[4]斯康杜尼局部浸润麻醉在下颌磨牙急性牙髓炎治疗中的临床应用[J]. 陈丹宇,符起亚,庞红霞. 海南医学. 2013(07)
[5]兽药残留检测技术研究进展[J]. 高洁,苗虹. 食品安全质量检测学报. 2013(01)
[6]磺胺类药物广谱性多克隆抗体的制备[J]. 魏镭,王战辉,江海洋,杨光,徐飞,李娜. 中国兽医杂志. 2012(12)
[7]动物性食品中磺胺类药物残留检测研究进展[J]. 赵旭壮,李明元. 中国食品卫生杂志. 2012(03)
[8]动物性食品中磺胺药物的残留分析方法进展[J]. 邓樱花,黄元乔,吴田,张洪权. 湖北第二师范学院学报. 2012(02)
[9]猪场如何正确使用磺胺类药物及抗菌增效剂[J]. 吕惠序. 兽医导刊. 2012(02)
[10]动物性食品中磺胺类药物残留检测方法的研究进展[J]. 赵书景,贺绍君,罗国琦,袁逢新,张卫宪. 中国畜牧兽医. 2009(08)
博士论文
[1]动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立[D]. 康健.燕山大学 2014
[2]食品中兽药残留高通量筛查与检测平台的建立及膳食暴露评估研究[D]. 刘畅.第二军医大学 2013
[3]非动物源性新型载体的研制及其对磺胺类药残检测特性的影响[D]. 陈蕾.华南理工大学 2011
[4]多西环素在斑点叉尾鮰中安全使用及快速检测技术研究[D]. 艾晓辉.四川农业大学 2011
[5]莱克多巴胺及磺胺二甲基嘧啶免疫学快速检测技术研究[D]. 李学伍.华中农业大学 2009
[6]单克隆抗体检测炭疽芽孢[D]. 王殿冰.华中农业大学 2008
[7]中美两国兽药管理比较研究[D]. 董义春.华中农业大学 2008
[8]液相色谱—电化学法测定氨基糖苷类抗生素药物分析方法的研究[D]. 习玲玲.浙江大学 2008
[9]剑尾鱼在水产药物临床试验中应用研究[D]. 黄志斌.南京农业大学 2006
[10]超高效液相色谱—电喷雾串联四极杆质谱法测定动物源性食品和尿液中糖皮质激素残留[D]. 崔晓亮.天津大学 2006
硕士论文
[1]地下水中磺胺类抗生素降解菌及附载材料研究[D]. 王佳丽.吉林大学 2017
[2]金刚烷胺单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 蔡云虹.扬州大学 2017
[3]酸性橙Ⅱ单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立[D]. 刘若璇.扬州大学 2017
[4]中间产物在磺胺嘧啶生物降解中的作用[D]. 张伊宁.上海师范大学 2017
[5]中草药和益生菌的筛选及其在凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）养殖中的应用[D]. 冯玲倩.青岛农业大学 2016
[6]强力霉素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 刘金萍.扬州大学 2016
[7]胭脂红单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立[D]. 王兴.扬州大学 2016
[8]广州市畜禽产品质量安全事件链分析及政府应急管理体系构建研究[D]. 谭诺.华南理工大学 2015
[9]牛结合珠蛋白单克隆抗体的制备及初步应用[D]. 王彩宏.黑龙江八一农垦大学 2015
[10]复方磺胺嘧啶混悬液在肉鸡体内的生物等效性及残留检测方法研究[D]. 张晓晓.中国农业科学院 2015
本文编号：2948582
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