不同粗饲料及蛋白质来源日粮条件下奶牛瘤胃细菌群落多样性变化

发布时间：2023-05-09 19:08

　　本研究的目的在于揭示不同粗饲料及蛋白质来源日粮对奶牛瘤胃细菌群落多样性的影响，并分析优势菌群的数量变化。选取48头泌乳日龄及体重相近的健康中国荷斯坦奶牛随机分为3组，饲喂粗饲料及蛋白质来源不同的三种日粮：MF组（苜蓿，玉米青贮及豆粕），CSA组（玉米秸秆，豆粕）和CSB组（玉米秸秆，棉籽粕和油菜籽粕）；其中，CSA组和MF组相比区别在于用玉米秸秆代替苜蓿和玉米青贮作为粗饲料来源；CSB组和CSA组相比区别在于用杂粕替代豆粕作为蛋白质饲料来源。所有奶牛在饲喂其指定日粮91天后全部换为MF组日粮。在试验期第31，61，91和107天，分晨饲前和晨饲后两个时间点，通过口腔采样器采集瘤胃内容物样品，进行不同粗饲料及蛋白质饲料降解相关菌群的比较。主要研究内容如下： 1.不同粗饲料和蛋白质来源日粮条件下奶牛瘤胃细菌群落多样性分析。提取不同时间点的瘤胃液样品总DNA，利用变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术分析细菌群落多样性变化，并对差异条带进行测序分析。DGGE分析结果表明，三个不同处理组的电泳图谱的条代数和峰密度值差异显著。聚类分析结果显示，在试验31天，混合粗饲料组（MF组）与单一秸秆组（CSA和...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 研究目的和意义
    1.2 国内外研究现状
        1.2.1 瘤胃微生物组成
        1.2.2 瘤胃中主要的纤维降解菌
        1.2.3 日粮纤维在瘤胃内的降解
        1.2.4 瘤胃中主要的蛋白质降解菌
        1.2.5 日粮蛋白在瘤胃内的降解
        1.2.6 日粮类型对瘤胃细菌多样性的影响
        1.2.7 瘤胃微生物分子生物学研究方法
    1.3 研究技术路线和研究内容
        1.3.1 技术路线
        1.3.2 研究内容
第二章 不同粗饲料及蛋白质来源日粮条件下瘤胃细菌多样性分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验动物与试验设计
        2.1.2 试验仪器及耗材
        2.1.3 样品采集与分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 总 DNA 提取及 PCR 扩增
        2.2.2 DGGE 指纹图谱聚类分析
        2.2.3 多样性分析
        2.2.4 条带测序
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 不同粗饲料日粮条件下瘤胃优势菌群 R-UB 的验证
    3.1 材料与方法
        3.1.1 优势细菌（群）R-UB 的鉴定
        3.1.2 qPCR 引物设计与验证
        3.1.3 标准曲线的建立
        3.1.4 实时定量 PCR 检测
        3.1.5 数据处理
    3.2 结果与分析
        3.2.1 细菌 R-UB 的鉴定
        3.2.2 qPCR 引物的验证
        3.2.3 R-UB 标准曲线的制备
        3.2.4 实时定量 PCR 分析
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 全文结论
    4.1 结论
    4.2 本试验创新点
    4.3 有待于进一步研究的问题
参考文献
致谢
作者简介



本文编号：3812224