鸡传染性贫血病毒与新城疫弱毒疫苗LaSota株对SPF鸡的协同致病作用

发布时间：2023-12-28 17:54

　　鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)感染引起的一种免疫抑制性疾病,感染鸡群临床上主要表现为贫血等症状,目前已经在全球主要养禽国广泛分布和流行,给养禽业造成的损失日益增加,并逐步发展成为了一个全球性的问题。CIAV的传播方式主要包括水平传播和垂直传播,但是作为在禽弱毒疫苗中常见的外源病毒之一,使用了污染CIAV的弱毒疫苗也是一种非常重要的传播途径。此前我们观察到低剂量的CIAV在弱毒疫苗中的污染也可以引起非常典型的CIAV发病症状,而同等剂量的CIAV直接攻毒却几乎观察不到任何明显症状,我们利用系统的动物实验证实疫苗中污染的CIAV与疫苗毒株发挥了协同致病作用,但是疫苗污染是小概率事件极少发生。本研究中,某养殖场在免疫了新城疫弱毒疫苗后出现了典型的贫血症状,而尚未免疫新城疫弱毒疫苗的鸡群却并未表现出典型症状,这是否与鸡群中存在CIAV的感染和流行有关?新城疫弱毒疫苗的免疫是否会增强CIAV感染的致病性?本研究在对发病鸡群开展流行病学调查基础上通过系统的动...

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【学位级别】：硕士

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符号说明
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 鸡传染性贫血病毒病原学研究
        1.1.1 CIAV的发现与命名
        1.1.2 CIAV的形态学及理化性质
        1.1.3 CIAV的基因组结构及编码蛋白特性
    1.2 鸡传染性贫血病毒流行病学
        1.2.1 发生与分布
        1.2.2 宿主
            1.2.2.1 自然宿主
            1.2.2.2 实验室宿主系统
        1.2.3 传播
    1.3 鸡传染性贫血病毒发病机理
    1.4 鸡传染性贫血病毒病理变化
    1.5 CIAV的诊断技术
        1.5.1 临床诊断
        1.5.2 病例剖检诊断
        1.5.3 病原学诊断
        1.5.4 血清学诊断
        1.5.5 分子生物学诊断
    1.6 CIAV的预防和控制
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 毒株
        2.1.2 疫苗
        2.1.3 质粒
        2.1.4 主要试剂以及仪器
            2.1.4.1 试剂
            2.1.4.2 仪器
        2.1.5 其它主要试剂的配置
    2.2 不同方法检测鸡群中鸡传染性贫血病毒的感染情况
        2.2.1 发病鸡群背景及样品来源
        2.2.2 血液核酸提取
        2.2.3 应用Real-time PCR检测鸡群中CIAV感染
        2.2.4 应用PCR结合核酸斑点杂交检测鸡群中CIAV感染
            2.2.4.1 斑点杂交探针的制备
            2.2.4.2 杂交探针的纯化
            2.2.4.3 发病鸡群样品的PCR扩增
            2.2.4.4 PCR扩增样品的斑点杂交检测
        2.2.5 应用RAA方法检测鸡群中CIAV感染
    2.3 CIAV与新城疫弱毒疫苗LaSota株对SPF鸡的协同致病作用
        2.3.1 CIAV-SDLY08 毒株的增殖与定量
        2.3.2 动物实验设计
        2.3.3 体重及免疫器官指数的情况
        2.3.4 血细胞分析仪检测鸡红细胞数目的变化
        2.3.5 应用血凝抑制实验检测新城疫(NDV)抗体
            2.3.5.1 四单位抗原的制备
            2.3.5.2 血凝抑制实验测定NDV抗体滴度
        2.3.6 Real-time PCR检测血液中CIAV的病毒载量
3 结果
    3.1 不同方法检测鸡群中鸡传染性贫血病毒的感染情况
        3.1.1 Real-time PCR检测结果
        3.1.2 PCR结合核酸斑点杂交检测结果
        3.1.3 RAA方法检测结果
            3.1.3.1 RAA反应体系及条件
            3.1.3.2 RAA灵敏性和特异性验证
            3.1.3.3 RAA方法检测应用结果
    3.2 CIAV与新城疫弱毒疫苗LaSota株对SPF鸡的协同致病作用
        3.2.1 不同组SPF鸡的死亡率
        3.2.2 不同组SPF鸡体重差异
        3.2.3 不同组SPF鸡免疫器官指数差异
        3.2.4 不同组SPF鸡红细胞数目的差异
        3.2.5 不同组SPF鸡新城疫抗体的差异
        3.2.6 不同组SPF鸡 CIAV病毒载量的差异
4 讨论
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况



本文编号：3875900