牛、羊场环境中气载需氧菌及金黄色葡萄球菌的检测与散播研究

发布时间：2017-05-24 17:08

  本文关键词：牛、羊场环境中气载需氧菌及金黄色葡萄球菌的检测与散播研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本研究以山西省某牛场和某羊场为观测地,分别在春、夏、秋、冬四个季节采集养殖场环境空气样品,测定分析了养殖场环境中气载需氧菌和葡萄球菌含量的动态变化以及空气动力学分布规律；并以金黄葡萄球菌(S.aureus)为指示菌,通过耐药性试验和ERIC-PCR同源性分析,探索动物圈舍微生物气溶胶的传播规律,评估牛、羊场环境中气载需氧菌对动物和人类健康的影响,为养殖场环境控制和消毒提供科学依据。以5%的公绵羊血琼脂培养基为采样介质,使用Andersen-6级空气微生物采样器,测定了牛舍内、运动场、场外Upwind 10m、Downwind (10、50、100m),羊舍内、场外Upwind 10m、Downwind (10、50、100m)环境空气中气载需氧菌和葡萄球菌的含量,并分析其气载微生物的空气动力学特性。结果表明：牛场气载需氧菌和葡萄球菌含量分别为0.21×103 CFU/m3～5.26×103 CFU/m3和0.16×103 CFU/m3～4.13×103 CFU/m3,冬季最高,春季最低,气载需氧菌主要分布在采样器的4、5级上,极易侵入人畜的细支气管甚至肺泡中：羊场环境中气载需氧菌浓度和葡萄球菌浓度分别为0.37x 103CFU/m3～5.55×103 CFU/m3和0.22×103 CFU/m3～4.82×103 CFU/m3,夏季最高,春季最低,气载需氧菌主要分布在采样器的1、4级上,也极易侵入人畜的细支气管中;牛羊场环境中气载需氧菌的组成均以G+球菌居多,且下风向处的气载需氧菌和葡萄球菌含量随着与畜舍距离的增大而减少。应用16S rRNA分子鉴定技术从牛场环境中71株疑似S.aureus中鉴定51株S.aureus阳性菌株,对S.aureus的药敏试验结果显示,牛场舍内外空气和粪土样品中的S.aureus均表现出较严重的广谱耐药性;ERIC-PCR同源性分析表明,牛场内空气中19株菌株与粪土中菌株的相似性在90%以上,场外下风向空气中7株菌株与舍内空气及粪土中的菌株相似性在90%以上,提示,牛舍粪土中的S.aureus可形成微生物气溶胶向周围扩散,污染环境。
【关键词】：牛羊场 气载需氧菌 S.aureus 空气动力学 微生物气溶胶 ERIC-PCR
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S852.6
【目录】：

• 摘要7-8
• 第一章 文献综述8-17
• 1 微生物气溶胶概述8-9
• 1.1 微生物气溶胶的特性8-9
• 1.2 微生物气溶胶的应用9
• 2 微生物气溶胶的采集技术9-12
• 2.1 Andersen-6级采样器10-12
• 3 微生物气溶胶的危害12-13
• 4 微生物气溶胶散播机制13-16
• 5 本研究的目的及意义16-17
• 第二章 气载需氧菌及金黄色葡萄球菌的检测与散播研究17-49
• 1 材料与方法17-25
• 1.1 材料17-19
• 1.1.1 牛羊舍基本情况17
• 1.1.2 主要试剂及配制17-18
• 1.1.3 主要仪器18-19
• 1.2 方法19-25
• 1.2.1 空气样品的采集19-20
• 1.2.2 空气样品的处理20-21
• 1.2.3 气载需氧菌的组成分析21
• 1.2.4 粪土样品的采集及处理21
• 1.2.5 S.aureus的分离及DNA提取21-22
• 1.2.6 16S rRNA分析技术鉴定金黄色葡萄球菌22-23
• 1.2.7 S.aureus的药敏实验23-24
• 1.2.8 ERIC-PCR同源性分析24
• 1.2.9 数据统计与分析24-25
• 2 结果与分析25-43
• 2.1 养殖场空气中需氧菌含量变化25-29
• 2.1.1 牛场气载需氧菌与葡萄球菌的浓度25-27
• 2.1.2 羊场空气中需氧菌与葡萄球菌的浓度27-29
• 2.2 养殖场气载需氧菌的革兰氏染色特性及形态分析29-30
• 2.2.1 牛场气载需氧菌革兰氏染色特性及形态分析29
• 2.2.2 羊场气载需氧菌的革兰氏染色特性及形态分析29-30
• 2.3 养殖场气载需氧菌的空气动力学分析30-33
• 2.3.1 牛场气载需氧菌的空气动力学分析30-32
• 2.3.2 羊场气载需氧菌的空气动力学分析32-33
• 2.4 养殖场四季空气中需氧菌含量及变化规律33-38
• 2.4.1 牛场四季空气中需氧菌含量及变化规律33-36
• 2.4.2 羊场四季空气中需氧菌含量及变化规律36-38
• 2.5 S.aureus的16S rRNA鉴定结果38-39
• 2.6 S.aureus的药敏实验结果39-40
• 2.7 S.aureus的ERIC-PCR同源性鉴定结果40-43
• 3 讨论43-47
• 3.1 牛羊舍环境气载需氧菌浓度动态变化43
• 3.2 养殖场气载需氧菌的组成分析43
• 3.3 牛羊舍气载需氧菌空气动力学分析43-44
• 3.4 养殖场四季气载需氧菌含量的动态变化44-45
• 3.5 牛场环境中S.aureus 16S rRNA鉴定45
• 3.6 牛场环境中S.aureus的耐药性45-46
• 3.7 牛场环境中S.aureus的ERIC-PCR同源性分析46-47
• 3.8 本研究存在的不足47
• 4 结论47-49
• 参考文献49-53
• Abstract53-55
• 致谢55

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