猪圆环病毒2型Cap蛋白的家蚕表达及亚单位疫苗在小鼠和仔猪的免疫效力试验

发布时间：2024-05-13 19:38

　　猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2, PCV2)是猪断奶后多系统衰竭综合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome, PMWS)和其他猪圆环病毒相关疾病的原发性病原。免疫预防是控制该类疾病的重要手段之一。本研究成功构建可表达PCV2空衣壳粒子的家蚕表达体系,并利用表达产物制备出PCV2Cap蛋白灭活疫苗,利用小鼠和猪分析了疫苗的免疫原性。 采集临床疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征发病仔猪的淋巴结等脏器,采用PCR技术检测PCV2,阳性样本用PK-15细胞进行病毒分离。经间接免疫荧光、免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)、免疫电镜观察对分离物进行鉴定。最终分离出5株PCV2,分别命名为PCV2-1、PCV2-2、PCV2-3、PCV2-4和PCV2-5。 首先将去核定位信号的Cap基因克隆到大肠杆菌表达载体,分离纯化目的蛋白,经质谱鉴定后用于抗体制备。抗体效价达到1：3200以上者,可用于真核表达Cap蛋白产物的检测。用PCR扩增PCV2Cap基因,或将经人工改造构建Cap突变体基因,克隆到家蚕杆状病毒转移载体,经...

【文章页数】：84 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
目录
第一章 引言
    1.1 猪圆环病毒相关疾病
    1.2 猪圆环病毒相关疾病的预防与控制
    1.3 研究的目的和意义
    1.4 研究的内容与技术路线
第二章 猪圆环病毒2型毒株的分离鉴定
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
    2.3 结果与分析
    2.4 讨论
第三章 猪圆环病毒2型Cap蛋白在家蚕中的表达与鉴定
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
    3.3 结果与分析
    3.4 讨论
第四章 猪圆环病毒2型Cap蛋白亚单位疫苗的制备
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
    4.3 结果与分析
    4.4 讨论
第五章 猪圆环病毒2型Cap蛋白亚单位疫苗免疫效力试验
    5.1 前言
    5.2 材料与方法
    5.3 结果与分析
    5.4 讨论
第六章 结论与创新点
    6.1 结论
    6.2 创新点
第七章 文献综述
    7.1 猪圆环病毒2型疫苗国内外的研究与应用
    7.2 家蚕表达外源蛋白在国际上的研究与应用
    7.3 家蚕表达外源蛋白的优点
参考文献
附件
致谢
个人简介



本文编号：3972611