1株3型禽腺病毒的分离鉴定

发布时间：2024-05-22 03:20

　　本研究旨在利用鸡肝癌(LMH)细胞从FAdV感染鸡的肝脏中进行病毒分离,利用PCR扩增与序列测定、TCID₅₀测定以及鸡胚接种等方法对分离获得的1株3型禽腺病毒进行鉴定与分析。结果显示:LMH细胞接毒96 h左右会出现明显的细胞病变,细胞体积变大,形态边圆,折光度增强,贴壁性减弱,呈半悬浮状态;将分离毒株在LMH细胞上连续传代2～3次会稳定出现明显的细胞病变;接种LMH细胞进行TCID₅₀测定,病毒滴度达到10^-7.67/0.1 mL;将分离株接种鸡胚,96 h后死亡,胚体发红萎缩,肝脏出血有坏死灶;PCR扩增分离株的Hexon基因,并进行其同源性和基因进化树分析显示,分离株目的基因与参考毒株SR-49位于同一分支上,同源性在99.4%,同时将分离株命名为SX180203。本研究结果为禽腺病毒3型毒株疫苗的研发奠定了坚实的物质基础。

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 细胞、菌株和载体
    1.2 临床样本
    1.3 病毒分离培养
    1.4 细胞培养物的PCR鉴定
    1.5 Hexon基因的扩增和测序
    1.6 病毒细胞半数感染量测定
    1.7 鸡胚致病性检验及分析
2 结果
    2.1 临床样本剖检
    2.2 病毒分离结果
    2.3 PCR鉴定结果
    2.4 Hexon基因同源性分析
    2.5 Hexon基因系统进化分析
    2.6 病毒TCID50测定
    2.7 鸡胚致病性检验
3 讨论



本文编号：3980323