杜仲叶提取物颗粒剂研制及药效评价

发布时间：2017-08-07 22:10

  本文关键词：杜仲叶提取物颗粒剂研制及药效评价

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【摘要】：杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)为杜仲科杜仲属植物,以皮入药,性味甘温,具有补肝肾,强筋骨,安胎的功效,主治肾虚腰痛,腰肢无力,风湿痹痛和胎动不安,但树皮的剥离对于杜仲生长十分不利。研究表明,杜仲叶主要含有苯丙素类、环烯醚萜类、黄酮类、酚类等成分,具有显著的抑菌、抗炎、增强免疫及降压等作用。鉴于杜仲叶的主要成分、药理作用与杜仲皮基本一致,且杜仲叶廉价易得,具有重要的潜在应用价值。本试验进行了杜仲叶提取物制备工艺优化、杜仲叶提取物颗粒剂制备、质量控制及药效评价研究,旨在为进一步新兽药申报和临床应用提供科学依据。(1)杜仲叶提取物制备的工艺优化:在单因素试验基础上,以杜仲叶提取物浸膏得率和绿原酸转移率为评价指标,采用Box-Behnken中心组合设计法优化杜仲叶提取物制备的工艺条件。结果表明,杜仲叶提取物制备的最佳工艺条件为:乙醇浓度50%,液料比10:1,提取温度97℃,提取4次,每次提取30min。验证试验表明,在此最佳工艺条件下,杜仲叶提取物浸膏得率和绿原酸转移率平均综合评分为99.08,与预测值基本一致。(2)杜仲叶提取物的质量控制研究:采用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对杜仲叶提取物中的绿原酸进行定性鉴别和含量测定。结果表明,杜仲叶提取物与绿原酸对照品在TLC相应的色谱位置上显示相同的荧光斑点,且阴性无干扰。HPLC测定绿原酸含量的标准曲线为y=2887462x-148005(r=0.9998),在进样量1.05~6.30μg范围内线性关系良好,且该方法的准确度、稳定性和重复性良好。(3)杜仲叶提取物颗粒剂的制备:在辅料种类及比例筛选预试验基础上,以颗粒剂成型率、堆密度、溶化性、休止角和吸湿率等综合评分为指标,采用L9(34)正交试验优化杜仲叶提取物颗粒剂制备工艺条件。结果表明,杜仲叶提取物颗粒剂的最佳制备工艺条件为:浸膏:乳糖:糊精2:2:1,乙醇浓度85%,乙醇用量24%,验证试验表明,在此工艺条件下,制备的杜仲叶提取物颗粒剂综合评分为95.23,与预测值基本一致。(4)杜仲叶提取物颗粒剂的质量控制研究:对杜仲叶颗粒剂进行一般检测,并采用TLC和HPLC法对杜仲叶提取物颗粒剂中的绿原酸进行定性鉴别和含量测定。结果表明,杜仲叶提取物颗粒含水量2.5%、成型率91.83%、临界相对湿度74%,符合兽药典要求,且宜保持在相对湿度74%以下环境中;与绿原酸对照品在TLC相应的色谱位置上显示相同的荧光斑点,且阴性无干扰;采用HPLC测定杜仲叶颗粒中绿原酸含量的方法准确度、稳定性和重复性良好。(5)杜仲叶提取物颗粒剂的体外抑菌试验:采用琼脂平板打孔法测定颗粒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑菌圈直径,试管二倍稀释法检测最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,杜仲叶提取物颗粒对金黄色葡萄球菌高度敏感,对沙门氏菌中度敏感,对大肠杆菌低度敏感。对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的MIC分别为15.6,31.25 mg/mL;MBC分别为31.25,62.5mg/mL。
【关键词】：杜仲叶提取物 颗粒剂 质量控制 高效液相色谱
【学位授予单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S853.7
【目录】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-13
• 文献综述13-22
• 第一章 杜仲叶研究进展13-19
• 1.1 杜仲叶的化学成分13-15
• 1.1.1 木脂素类化合物13
• 1.1.2 环烯醚萜类化合物13-14
• 1.1.3 苯丙素类化合物14
• 1.1.4 黄酮类化合物14-15
• 1.1.5 多糖类化合物15
• 1.1.6 维生素及微量元素15
• 1.1.7 氨基酸类化合物15
• 1.1.8 杜仲胶15
• 1.1.9 其他成分15
• 1.2 杜仲叶的药理作用15-18
• 1.2.1 抗菌、抗病毒和抗炎作用15-16
• 1.2.2 免疫调节作用16
• 1.2.3 抗肿瘤作用16
• 1.2.4 抗氧化作用16-17
• 1.2.5 降血压作用17
• 1.2.6 调血脂作用17
• 1.2.7 降血糖作用17
• 1.2.8 促进胶原蛋白合成作用17-18
• 1.2.9 保肝、利胆和利尿作用18
• 1.2.10 其它作用18
• 1.3 对动物生产性能的影响18-19
• 第二章 中药颗粒剂的研究进展19-22
• 2.1 中药原药材的提取19
• 2.2 中药颗粒剂的辅料与配方筛选19-21
• 2.2.1 稀释剂19-20
• 2.2.2 黏合剂20
• 2.2.3 崩解剂20-21
• 2.2.4 包合剂21
• 2.3 颗粒剂的制备工艺21
• 2.4 颗粒剂的质量控制21-22
• 试验研究22-54
• 第三章 杜仲叶提取物的制备工艺优化22-28
• 3.1 材料与方法22-24
• 3.1.1 材料22-23
• 3.1.2 方法23-24
• 3.2 结果24-27
• 3.2.1 单因素试验结果24-25
• 3.2.2 响应面法优化制备工艺试验结果25-27
• 3.3 讨论27
• 3.3.1 绿原酸含量的测定方法27
• 3.3.2 杜仲叶提取物制备的最佳工艺条件27
• 3.4 小结27-28
• 第四章 杜仲叶提取物质量控制研究28-35
• 4.1 材料与方法28-30
• 4.1.1 材料28-29
• 4.1.2 方法29-30
• 4.2 结果30-34
• 4.2.1 杜仲叶提取物薄层色谱鉴别结果30-31
• 4.2.2 绿原酸含量测定的标准曲线31
• 4.2.3 杜仲叶提取物中绿原酸含量测定的方法学验证试验结果31-34
• 4.3 讨论34
• 4.3.1 杜仲叶提取物中绿原酸含量的测定34
• 4.3.2 杜仲叶提取物中绿原酸的转移率34
• 4.4 小结34-35
• 第五章 杜仲叶提取物颗粒剂的制备35-42
• 5.1 材料与方法35-37
• 5.1.1 材料35
• 5.1.2 方法35-37
• 5.2 结果37-41
• 5.2.1 杜仲叶提取物颗粒剂辅料筛选预试验结果37-39
• 5.2.2 正交试验筛选颗粒剂最佳制备工艺39
• 5.2.3 正交试验方差分析39-40
• 5.2.4 工艺优化验证试验40-41
• 5.3 讨论41
• 5.3.1 杜仲叶颗粒稀释剂的选择41
• 5.3.2 杜仲叶颗粒黏合剂用量及浓度41
• 5.4 小结41-42
• 第六章 杜仲叶提取物颗粒剂质量控制研究42-50
• 6.1 材料与方法42-44
• 6.1.1 材料42
• 6.1.2 方法42-44
• 6.2 结果44-48
• 6.3 讨论48-49
• 6.3.1 杜仲叶提取物颗粒剂的检查48
• 6.3.2 杜仲叶提取物颗粒剂中绿原酸的薄层色谱鉴别48-49
• 6.3.3 杜仲叶提取物颗粒剂中绿原酸的含量测定49
• 6.4 小结49-50
• 第七章 杜仲叶提取物颗粒剂的体外抑菌试验50-54
• 7.1 材料与方法50-52
• 7.1.1 材料50
• 7.1.2 方法50-52
• 7.2 结果52-53
• 7.2.1 抑菌作用试验结果52
• 7.2.2 最小抑菌浓度和最小杀菌浓度52-53
• 7.3 讨论53
• 7.4 小结53-54
• 结论54-55
• 参考文献55-61
• 致谢61-62
• 作者简介62

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