柯萨奇病毒A组16型不同纯化方法的比较研究
本文关键词：柯萨奇病毒A组16型不同纯化方法的比较研究
【摘要】：目的评价不同方法纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的可行性和有效性。方法将CA16病毒收获液经切向流超滤浓缩后,分别进行离心、氯仿抽提、分子筛和蔗糖垫层/梯度离心,按《中国药典》(三部)(2010版)的检定要求检测不同纯化方法得到的样品,检测指标包括:感染性滴度、抗原含量、蛋白含量、比活性、HPLC纯度、残余牛血清白蛋白、残余抗生素、免疫原性。结果从比活性来看,分子筛纯化法是其他方法的2~21倍,明显优于其他工艺;经HPLC检测,分子筛纯化样品纯度98%,而其他工艺均在50%以下;分子筛法所得纯化样品中牛血清白蛋白残留量符合《中国药典》要求(50ng/剂),去除率达99.97%;分子筛法和蔗糖垫层/梯度离心法所得纯化样品中抗生素残留量符合《中国药典》要求(50ng/剂),分子筛法去除率在80%以上;从免疫小鼠后的抗体阳转率来看,离心和氯仿抽提样品组阳转率为100%,分子筛组为80%,蔗糖离心组为50%;从抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)来看,氯仿抽提组最高,为1∶912。结论以Sepharose 6Fast Flow作为层析介质的分子筛法可得到高纯度的CA16病毒,综合分析,该法是CA16较为理想的纯化方法
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;
【关键词】： 柯萨奇病毒A组型 纯化方法 质量控制
【基金】：云南省科技计划项目(2013FZ134,2012BC006)
【分类号】：R373.23
【正文快照】： 肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16)是手足口病的两类主要病原体。EV71全病毒灭活疫苗已经完成临床研究[1],而CA16疫苗的研发相对滞后。病毒的纯化工艺研究是疫苗研究的重要方面,也是疫苗质量控制的重要环节。病毒纯化方法有蔗糖/氯化
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本文编号：1003532
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