全反式视黄酸通过RARγ蛋白直接调控PPARγ2蛋白抑制骨髓间充质干细胞成脂分化

发布时间：2017-10-11 01:25

  本文关键词：全反式视黄酸通过RARγ蛋白直接调控PPARγ2蛋白抑制骨髓间充质干细胞成脂分化

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【摘要】：目的研究高浓度全反式视黄酸(atRA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(r BMSCs)成脂分化过程中,视黄酸核受体γ(RARγ)对过氧化物酶体增殖激活受体γ2(PPARγ2)与CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)调控的机制。方法体外分离、培养、诱导r BMSCs。成脂分化诱导液中,加入0.5、1.0μmol/L atRA持续作用15 d后,real-time PCR和Western blotting分别检测RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA和蛋白表达水平。重组腺病毒过表达RARγ(over-RARγ)、沉默RARγ(si-RARγ)分别感染BMSCs,采用real-time PCR及Western blotting检测RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA及蛋白表达水平。Co-IP检测1.0μmol/L atRA持续成脂诱导15 d后,明确RARγ与PPARγ2两者之间是否有相互作用。结果诱导15 d结束时,与对照组相比,加入0.5、1.0μmol/L atRA后,RARγ表达明显增加(P0.01,P0.001),而PPARγ2、C/EBPα表达明显降低(P0.001)。over-RARγ组:RARγmRNA和蛋白表达均较对照组明显增加(P0.01),而PPARγ2、C/EBPαmRNA和蛋白表达均较对照组明显降低(P0.05,P0.01)。si-RARγ组:RARγ蛋白表达较对照组明显减低,但PPARγ2、C/EBPα却无明显变化。Co-IP结果提示:RARγ与PPARγ2蛋白之间有直接作用,形成复合物,未发现其与视黄酸反应元件(RARE)相结合证据。结论高浓度atRA抑制r BMSCs成脂分化,是通过激活视黄酸信号通路RARγ而实现的。RARγ下调成脂分化通路PPARγ2、C/EBPα表达是通过直接作用于下游的PPARγ2蛋白而实现的。
【作者单位】： 重庆医科大学附属儿童医院儿童营养研究中心儿童发育疾病研究教育部重点实验室重庆市干细胞治疗工程技术研究中心;
【关键词】： 全反式视黄酸 RARγ PPARγ 骨髓间充质干细胞 Co-IP
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 维生素A(VA)是人体生命活动所必需的脂溶性维生素,包括视黄醇、视黄醛、视黄酸(retinoid acid,RA)等。VA通过其主要氧化活化物质RA,在体内类似于激素一样发挥其生理作用[1]。RA在体内发挥作用主要是通过激活其核受体RARs而实现的,RARs包括RARα、RARβ和RARγ三亚型,即视黄酸

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本文编号：1009729