吡喹酮新衍生物抗日本血吸虫生物学效应研究

发布时间：2017-10-11 22:26

  本文关键词：吡喹酮新衍生物抗日本血吸虫生物学效应研究

  更多相关文章： 日本血吸虫 PZQ衍生物 钙通道阻滞剂 细胞松弛素-D

【摘要】：第一部分吡喹酮(PZQ)衍生物和PZQ消旋体体外抗日本血吸虫生物学效应 目的：观察17种DW系列及32种YCH-II-P系列PZQ衍生物和2种PZQ消 旋体对体外培养的日本血吸虫成虫和童虫活性的影响。 方法：ICR小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第17d及第6w肝门静脉灌注法分别收集童虫与成虫，加入不同浓度的化合物于DMEM培养液中，过夜后(16h)无菌生理盐水洗涤虫体3次，换无药物的新鲜培养液继续培养虫体72h,每天置于体视显微镜下观察其死亡率及活力降低情况，收集第72h虫体作扫描电镜观察。 结果：经观察17种DW系列对PZQ衍生物日本血吸虫均有一定的杀虫效应，其中以DW-3-15杀虫效应最强，作用浓度为50μmol L时虫体完全死亡，体外抗日本血吸虫成虫及童虫临界致死浓度分别为15μmol L及10μmol L。32种YCH-II-P系列PZQ衍生物筛选出P96、P125、P126、P64种有效化合物。其中P96作用浓度为50μmol L时虫体完全死亡，体外抗日本血吸虫成虫及童虫临界致死浓度均为25μmol L，扫描电镜（SEM）显示虫体皮层及抱雌沟内壁损伤严重。2种PZQ消旋体中R-PZQ作用浓度为100μmol L时成虫及童虫均完全死亡。SEM显示虫体皮层及抱雌沟内壁仅有轻度损伤。 结论: DW系列衍生物体外具有一定的杀日本血吸虫作用，其中以DW-3-15杀虫效应最强。YCH-II-P系列衍生物中P96体外具有显著的杀日本血吸虫成虫和童虫作用效应，两种PZQ消旋体中R-PZQ具有显著的杀日本血吸虫成虫作用。 第二部分PZQ衍生物P96体内抗日本血吸虫效应 目的：观察PZQ衍生物P96对感染小鼠体内不同发育阶段虫体杀虫效应及体内杀虫剂量依赖效应。 方法：小鼠感染日本血吸虫尾蚴后，在虫体发育的不同阶段（1d，3d，7d，14d，21d，28d）以200mg/kg/只的剂量及在感染后第14天以不同剂量经灌胃连续给药5d，停药后21d解剖小鼠计算减虫率。进一步于成虫期（28d）经灌胃连续给药5d杀虫，分别于停药后第1d，3d，7d取虫，SEM观察P96对体内虫体的损伤作用。 结果：成虫期与童虫期经PZQ衍生物P96作用后检获虫数与对照组相比，显著减少（P0.05）。其中成虫期（28d）P96组减虫率(53.6%)与PZQ组(67.1%)相近（P0.05），童虫期（14d）P96组减虫率（58.2%）显著高于PZQ组（19.9%，P0.05），尤其在童虫期1d、3d、7d、14d、21d的减虫率为43.5%~58.2%，均显著高于PZQ组（5.9%~45.0%，P0.05）。P96对体内成虫用药后1d、3d、7d SEM观察显示虫体皮层及抱雌沟内壁严重受损 结论：PZQ衍生物P96体内具有显著抗日本血吸虫成虫与童虫的作用，其体内抗日本血吸虫成虫作用与PZQ相仿，体内抗日本血吸虫童虫作用则明显优于PZQ，并存在明显的剂量依赖效应 第三部分钙通道阻滞剂与肌动蛋白解聚剂对P96体外抗日本血吸虫效应的影响 目的：通过观察钙通道阻滞剂(calcium channel blockers，CCBs)与细胞松弛素-D(cytochalasin D，CyD)对P96体外抗日本血吸虫活性的拮抗作用，探讨PZQ衍生物对血吸虫的药物作用靶点及其机制。 方法：在单性日本血吸虫尾蚴感染小鼠6w后，将采用肝门静脉灌注法收集雄性成虫分别与CCBs及CyD预孵育lh，然后加入临界致死浓度的P96与虫体孵育过夜(16h)，，次日用无菌生理盐水洗涤虫体3次，换至新鲜培养液继续培养虫体72h，每天置于体视显微镜下观察并记录虫体活力，收集第72h虫体作SEM观察。 结果：钙通道阻滞剂尼非地平和尼群地平及CyD对P96抗日本血吸虫的拮抗效应均较弱， CCBs或CyD预孵育对P96的抗虫作用基本无影响。 结论：钙通道阻滞剂尼非地平和CyD可特异性地抑制肌动蛋白与微丝有关的细胞骨架，干扰细胞膜离子通道（如Ca~(2+)通道）的一些相关功能，可拮抗PZQ的杀虫效应。本实验结果表明，CCBs和CyD无明显拮抗P96抗血吸虫效应，提示P96的对血吸虫的药物作用靶点及其机制可能与PZQ不同，其杀虫效应与细胞Ca~(2+)内稳态的变化相关性较小。
【关键词】：日本血吸虫 PZQ衍生物 钙通道阻滞剂 细胞松弛素-D
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R965;R383.24
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 研究背景11-15
• 参考文献13-15
• 第一部分 DW 系列及 YCH-II-P 系列吡喹酮(PZQ) 衍生物和 PZQ 消旋体体外抗日本血吸虫生物学效应15-32
• 材料与方法15-19
• 结果19-28
• 讨论28-30
• 参考文献30-32
• 第二部分 PZQ衍生物 P96 体内抗日本血吸虫效应32-41
• 材料与方法32-33
• 结果33-37
• 讨论37-39
• 参考文献39-41
• 第三部分 钙通道阻滞剂与肌动蛋白解聚剂对 P96 体外抗日本血吸虫效应的影响41-50
• 材料与方法41-42
• 结果42-45
• 讨论45-47
• 参考文献47-50
• 全文小结50-51
• 附录一 缩写词表51-52
• 附录二 主要仪器与设备52-53
• 综述53-63
• 参考文献58-63
• 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文63-64
• 致谢64-65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 孙伟振;仇思婕;吴建忠;夏超明;乔春华;;苯二氮杂卓类化合物的合成及抗血吸虫活性研究[J];化学研究与应用;2011年08期

2 周士胜;细胞骨架对离子通道的调节作用[J];生理科学进展;2005年02期

3 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,李洪军,徐明,许永良,杭盘宇,G. CColes,M. JDoenhoff;血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅲ曼氏血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株尾蚴对吡喹酮的反应性[J];中国血吸虫病防治杂志;2003年01期

4 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,杭盘宇,李洪军,赵松,茹炜炜,徐明,司进,宁安,余冬保,徐兴建,李远林,宋鸿焘,神学慧;血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅹ日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性的现场调查[J];中国血吸虫病防治杂志;2005年05期

5 王艳蕊;郑新生;姚宝安;段存争;;外源性一氧化氮抗日本血吸虫的实验研究[J];中国血吸虫病防治杂志;2006年02期

6 黄一心;;吡喹酮是否具有免疫调节作用[J];中国血吸虫病防治杂志;2007年01期

7 梁幼生;戴建荣;李洪军;汪伟;陶永辉;张键锋;李伟;朱荫昌;G.C. Coles;M.J. Doenhoff;;血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅺ日本血吸虫中国大陆现场分离株虫卵毛蚴尾蚴对吡喹酮的敏感性[J];中国血吸虫病防治杂志;2007年05期

8 汪天平;操治国;陈红根;周晓农;;实现防治策略转变 加快血防工作进程[J];中国血吸虫病防治杂志;2009年04期

9 周晓农;;我国血吸虫病的监测与预警[J];中国血吸虫病防治杂志;2009年05期

10 黄一心;;吡喹酮抗血吸虫作用机理的奥秘[J];中国血吸虫病防治杂志;2010年02期

本文编号：1015106