制备GP73多克隆抗体并建立GP73胶乳增强免疫比浊法

发布时间：2017-10-13 16:35

  本文关键词：制备GP73多克隆抗体并建立GP73胶乳增强免疫比浊法

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【摘要】：目的运用胶乳微球标记抗高尔基体蛋白73(GP73)抗体,并初步建立GP73的胶乳增强免疫比浊法。方法用人工重组GP73蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并将纯化成功后的抗体蛋白共价偶联到胶乳微球上;优化偶联条件,制备免疫胶乳,建立GP73胶乳增强免疫比浊测定法。结果制备的纯化抗GP73多克隆抗体的效价达到16 000,用其致敏的胶乳微球在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(EDAC/NHS)浓度为10 mg/m L、反应溶液为PBS(p H=6)、室温反应3 h,偶联率最高。所建立的颗粒增强免疫比浊法灵敏度和特异性良好,线性范围在(6.25~200)ng/m L,检测下限在10 ng/m L。结论成功纯化出GP73多克隆抗体,制备GP73免疫胶乳微球颗粒,建立GP73胶乳增强免疫比浊法。
【作者单位】： 广州医科大学金域检验学院;
【关键词】： GP抗体 胶乳微球 化学偶联 免疫比浊法
【基金】：广东省科技计划项目(2013B0218003)
【分类号】：R392
【正文快照】： 我国男性肝癌发病率和死亡率均居第2位,女性中发病率和死亡率为第5位。全球每年约有100万人死于肝癌,其中近一半来自中国[1-2]。大部分肝癌患者初期症状并不明显,临床发现时,往往已到中晚期,治疗变得相当困难。所以肝癌的早期诊断显得尤为重要。高尔基体蛋白73(Golgi protein

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 俞思明;彭运平;于淑娟;吕欢;郭丞;;胶乳微球与抗体蛋白相互作用机理的荧光光谱法分析[J];光谱学与光谱分析;2012年08期

2 曾方银;张豫明;张鹏;林俐;孙德华;;颗粒增强免疫透射比浊法测定甲胎蛋白方法学评价[J];检验医学;2012年11期

3 詹峰;曾晓燕;张晓;周顺;徐言;张建平;焦永军;;抗人生长转化因子15单克隆抗体制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年05期

4 徐霞;陈思聪;唐晓华;;MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立[J];中山大学学报(医学科学版);2008年05期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 江欢;朱燕舞;王燕;何建波;;7-羟基香豆素与三种芳香族氨基酸作用的荧光光谱研究[J];光谱学与光谱分析;2013年08期

2 郑联Wu;魏开鹏;潘兴南;魏梅娟;张小曼;王崇国;;血清高尔基体蛋白73诊断肝细胞癌价值探讨[J];实用肝脏病杂志;2013年05期

3 周亚娣;许文芳;童海江;;血清GP73在常见恶性肿瘤中的表达水平[J];放射免疫学杂志;2013年05期

4 陈刚;;高尔基体蛋白73在肝细胞癌血清学诊断中的价值[J];放射免疫学杂志;2013年05期

5 吴枚;王方芳;赵晶;;82例肝细胞癌患者高尔基体蛋白73的检出与分析[J];国际检验医学杂志;2014年05期

6 谢海花;卓传尚;柳丽娟;吴秋芳;;GP73和PTEN联合检测在肝细胞癌中的诊断价值[J];国际检验医学杂志;2014年12期

7 张勤;续薇;;高尔基体蛋白73与肝脏疾病关系的研究进展[J];国际检验医学杂志;2014年15期

8 Block Timothy;;The re-emergence of the GP73 and fucosylated liver cancer biomarkers[J];Engineering;2014年04期

9 邓广博;;AFP和高尔基体糖蛋白-73联合检测诊断原发性肝癌临床评价[J];中国肝脏病杂志(电子版);2014年04期

10 Cheng Xu;Xiang-Hua Zeng;Li Wang;Shi-Qi Tao;Quan-Xin Wu;Peng Zhu;Guo-Hong Deng;Yu-Ming Wang;;sFRP-4, a potential novel serum marker for chronic hepatitis B-related hepatocellular carcinoma[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2015年02期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 杨刚龙;肝细胞癌患者血清糖蛋白质组及其糖链结构研究[D];西北大学;2013年

2 刘侠;肝细胞癌N-糖链的结构改变及其机制研究[D];哈尔滨工业大学;2013年

3 刘艳红;新肝癌相关基因HTA功能的初步研究[D];中南大学;2013年

4 丁向春;1、HBV相关原发性肝癌生物标志物的筛选及G6PD在HBV复制中机制的初步研究 2、血清血小板衍生生长因子（PDGF-BB）与慢性乙型肝炎（CHB）临床相关因素的研究[D];重庆医科大学;2013年

5 彭运平;纳米免疫微球的制备、表征及在免疫层析检测中的应用研究[D];华南理工大学;2013年

6 李冰;肝细胞癌患者血清肿瘤标志物组合的诊断价值及针对GPC3肿瘤抗原特异性T细胞反应的研究[D];首都医科大学;2013年

7 陈文学;肝癌血清核酸适配子的筛选及其鉴定[D];南昌大学医学院;2011年

8 杨晓莉;高尔基体糖蛋白GP73在肝脏疾病中的意义及其生物学功能的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2014年

9 朱文伟;肝癌发生与转移两重要分子MDK和GOLPH2的临床意义及功能分析[D];复旦大学;2011年

10 黄英男;基于液相色谱—质谱联用技术的肝癌糖蛋白质组学的研究[D];复旦大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 韩金钢;鳗鲡致病菌快速诊断试剂盒的研制及流行规律调查[D];集美大学;2011年

2 王娟;稀土对临床分离株MRSA·NMGY3抗药性的影响及其机理研究[D];内蒙古工业大学;2009年

3 李晓;抗Luman募集因子N端蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[D];西北农林科技大学;2012年

4 徐言;抗高尔基体蛋白GP73单克隆抗体的制备及初步应用[D];南京医科大学;2012年

5 黄银娟;淀粉基纳米颗粒的制备及其与纳豆激酶的作用机理研究[D];兰州大学;2013年

6 赵睿;联合检测AFP-L3和GP73在原发性肝癌中的诊断价值及影响原发性肝癌患者TACE预后因素分析[D];蚌埠医学院;2013年

7 曾宪春;诱发性大鼠肝癌演变过程的DSCT全肝灌注研究[D];昆明医科大学;2013年

8 马延森;Atac2调控肠道干细胞的机理研究及BHD综合症动物模型的建立[D];西北农林科技大学;2013年

9 卜旺雨;二维电泳和质谱技术鉴定食管鳞癌N-连接糖蛋白差异表达谱[D];河南大学;2013年

10 杨颖;血清GP73对原发性肝癌的诊断价值及临床意义[D];新疆医科大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 魏东,邓爱文,牟成惠;ICA、RIA和ELISA法测定甲胎蛋白的比较[J];第一军医大学学报;2001年06期

2 康红,王兰兰;免疫比浊法中钩状效应的防范[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2004年06期

3 查斌山;刘开坤;刘悦芳;周顺;朱进;冯振卿;王轩;张建平;;SPP-1、GDF-15和CXCL-1在人小肝癌中表达的初步研究[J];武汉大学学报(医学版);2009年01期

4 刘开坤;查斌山;刘悦芳;朱进;冯振卿;张建平;;GDF15在大鼠早期肝癌和人小肝癌组织中的表达[J];南京医科大学学报(自然科学版);2008年04期

5 黄妩姣;黄宪章;周强;张文;徐宁;庄俊华;张秀明;梁伟雄;;不同检测系统甲胎蛋白测定结果的可比性研究[J];检验医学;2006年04期

6 高云朝;赵卫国;;光激化学发光法检测甲胎蛋白实验性能评价[J];检验医学;2009年08期

7 徐霞;谢闺娥;杜晶春;;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a转肽酶区的克隆表达及纯化鉴定[J];生物技术通讯;2006年04期

8 徐霞;唐晓华;谢闺娥;;抗MRSA-PBP2a转肽酶区蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2007年06期

9 周群芳;鞠吉雨;郎景和;;抗人骨桥蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年01期

10 黄越芳,王清文,阮明,Victor Y Yu;乳胶凝集试验快速诊断新生儿B群链球菌败血症[J];新医学;2002年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 史玉玲;;血清AFP-L3,GP73联合检测对原发性肝癌早期诊断价值[J];北华大学学报(自然科学版);2013年05期

2 管楷;黄蓓;钟辉;;高尔基体膜蛋白GP73小干扰RNA质粒的构建及稳定干扰GP73细胞株的筛选[J];军事医学科学院院刊;2010年05期

3 顾剑锋;李明峰;顾树南;;GP73与肝癌关系的研究进展[J];肝胆胰外科杂志;2011年06期

4 蔡庆春;;GP73在肝癌与肝硬化鉴别诊断中的临床价值[J];河南医学研究;2014年04期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

中国重要报纸全文数据库 前1条

1 刘云涛;GP73有望成为肝癌早诊断新指标[N];中国医药报;2008年

，

本文编号：1025967