大鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中microRNA表达谱变化及意义
本文关键词:大鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中microRNA表达谱变化及意义
【摘要】:目的研究树突状细胞(DC)成熟过程中microRNA表达谱的变化,筛选鉴定出对DC成熟过程起关键调控作用的microRNA。 方法将大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDC)用脂多糖(LPS)刺激,流式细胞术检测其表面分子的表达情况以验证其被刺激成熟。分别于0h,12h,24h后提取总RNA,进行microRNA芯片杂交,应用生物信息学方法进行microRNA表达谱数据分析,寻找预测可能对DC成熟过程起关键调控作用的microRNA,并利用过表达或特异性阻断其表达的方法来验证相关microRNA的功能。 结果与未受LPS刺激的imDC比较,刺激12h之后的DC有54种microRNA的表达出现显著改变,,其中44种microRNA表达下调2倍以上,10种表达上调2倍以上;与LPS刺激12h的imDC比较,刺激24h之后的DC有76种microRNA的表达出现显著改变,其中32种microRNA表达下调2倍以上,44种表达上调2倍以上;与未受LPS刺激的imDC比较,刺激24h之后的DC有92种microRNA的表达出现显著改变,其中52种microRNA表达下调2倍以上,40种表达上调2倍以上。选取19个表达显著变化的microRNA做进一步的靶基因预测,从预测结果中挑选出同时被3个microRNA共同作用的靶基因,共4个(WEE1、CHKA、CDC37L1、RGD1359108)。 结论大鼠骨髓来源DC的成熟过程中,伴随着microRNA表达谱的显著变化,其中某些microRNAs在DC成熟过程中扮演重要角色。
【关键词】:microRNA 树突状细胞 成熟
【学位授予单位】:南京医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R329
【目录】:
- 主要英文缩写词5-6
- 中文摘要6-7
- 英文摘要7-8
- 前言8-10
- 第一部分 大鼠骨髓来源树突状细胞的培养、扩增与鉴定10-22
- 前言10-11
- 材料与方法11-17
- 结果17-19
- 讨论19-21
- 结论21-22
- 第二部分 microRNA芯片检测及结果验证22-36
- 前言22
- 材料与方法22-30
- 结果30-34
- 讨论34-35
- 结论35-36
- 第三部分 microRNA芯片结果分析36-50
- 前言36
- 材料与方法36-41
- 实验结果41-47
- 讨论47-49
- 结论49-50
- 全文总结50-51
- 参考文献51-59
- 综述59-75
- 参考文献67-75
- 攻读学位期间发表文章情况75-76
- 致谢76
【共引文献】
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本文编号:1034764
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