弓形虫表面抗原SAG2基因的克隆表达纯化及鉴定

发布时间：2017-10-17 19:37

  本文关键词：弓形虫表面抗原SAG2基因的克隆表达纯化及鉴定

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【摘要】：目的构建弓形虫表面抗原2(SAG2)基因重组质粒并在大肠埃希菌中表达。方法根据SAG2基因序列设计并合成引物,用PCR法从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因片段,再克隆到p GEX-4T载体中,构建重组质粒。重组质粒经酶切鉴定并测序后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达,产物经SDS-PAGE分析并纯化,以Western blotting分析其反应原性。结果 SAG2基因PCR产物大小约为561 bp,与预期相符。重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合。重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的SAG2融合蛋白分子量约为47 ku,该蛋白可被GST标签抗体识别。结论成功重组了弓形虫SAG2基因,表达蛋白具有反应原性。
【作者单位】： 山东省医学科学院 山东省寄生虫病防治研究所;济南大学 山东省医学科学院医学与生命科学学院;
【关键词】： 刚地弓形虫 表面抗原 基因克隆 融合蛋白 蛋白纯化
【基金】：山东省自然科学基金项目(2009ZRC03083) 山东省医药卫生科技计划项目(2011HW049、2014WS0330)
【分类号】：R382.5
【正文快照】： 弓形虫病(Toxoplasmosis)是由专性细胞内寄生的致病原虫——刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的全球性人兽共患寄生虫病[1],能引起人类多种先天及获得性疾病,造成多脏器及组织损伤。本病为全身性疾病,人群普遍易感,但多为隐性感染,发病者临床表现复杂并缺乏特异性,易误诊,对

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1050658