NF-κB参与枸橼酸铁铵过载诱导的人肝细胞hepcidin基因表达

发布时间：2017-10-17 19:55

  本文关键词：NF-κB参与枸橼酸铁铵过载诱导的人肝细胞hepcidin基因表达

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【摘要】：目的:研究核因子κB(NF-κB)在枸橼酸铁铵过载诱导人肝细胞铁调素(hepcidin)基因表达中的调控作用。方法:依据前期不同浓度枸橼酸铁铵抑制人肝细胞HH4增殖实验结果,选取0.1、1、5和10 mmol/L枸橼酸铁铵处理人肝细胞HH4 48 h,半定量PCR法检测胞内hepcidin的表达水平;利用染色质免疫共沉淀(Ch IP)、电泳迁移率实验(EMSA)和双萤光素酶报告基因检测系统,并结合胞内NF-κB活性抑制实验,确定NF-κB对人hepcidin转录活性的影响。结果:5 mmol/L和10 mmol/L浓度的枸橼酸铁铵处理细胞后,hepcidin表达水平显著增强;Ch IP和EMSA实验证实NF-κB能够与hepcidin基因启动子结合;重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-p Hepcidin相对萤光素酶活性明显高于对照组;与重组质粒TOPFlash-p Hepcidin相比,突变重组萤光素酶报告质粒TOPFlash-p Hepcidin-mut相对萤光素酶活性显著降低;NF-κB抑制剂BAY 11-7082显著降低了hepcidin基因的表达。结论:NF-κB参与了铁过载诱导的人hepcidin基因表达。这为进一步深入研究肝细胞铁过载模式下多因子协同调控hepcidin基因表达的具体分子机理奠定了基础。
【作者单位】： 江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室;江南大学生物工程学院;江南大学无锡医学院;
【关键词】： 核因子κB 染色质免疫共沉淀 电泳迁移率实验 双萤光素酶报告基因检测系统 铁调素
【分类号】：R363
【正文快照】： 铁调素(hepcidin)是一种肝脏分泌的在维持机体铁代谢平衡中起关键性调控作用的小分子多肽[1]。2001年,2个独立的实验室首先从人的血液和尿液中将hepcidin纯化出来[2]。Hepcidin蛋白与十二指肠、巨噬细胞和肝细胞细胞膜上的铁转运蛋白(ferroport-in,FPN)结合,诱使FPN内化和泛素

【参考文献】

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1 钱忠明;康友敏;常彦忠;柯亚;;HFE蛋白与遗传性血色病[J];中国病理生理杂志;2006年02期

2 张玉超;沈媛媛;晏向华;王福O，

本文编号：1050743