抗LAMP2单克隆抗体的制备及初步鉴定

发布时间：2017-10-20 13:12

  本文关键词：抗LAMP2单克隆抗体的制备及初步鉴定

  更多相关文章： LAMP2 多肽 单克隆抗体

【摘要】：目的：通过制备免疫肽段并免疫BALB/c小鼠来制备抗LAMP2单克隆抗体，并对抗体进行初步鉴定。 方法：（1）用博奥森LAMP2蛋白，并将此多肽分别连接钥孔戚血蓝素（简称：peptide-KLH）或牛血清蛋白（简称：peptide-BSA）；（2）以peptide-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠；（3）取血清效价大于1：10000的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，以peptide-BSA包被，通过酶联免疫吸附实验（ELISA）检测杂交瘤细胞的上清进行筛选；用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化；（4）单克隆抗体的大量制备是通过腹腔注射杂交瘤细胞而获得；（5）用鼠单克隆抗体亚类分型试剂盒鉴定抗体的亚类，，免疫组化方法表明制备的单克隆抗体能识别LAMP2蛋白。 结果：得到一株能稳定分泌抗-LAMP2单克隆抗体的杂交瘤细胞株；应用免疫组化方法表明制备的抗-LAMP2的单克隆抗体能识别LAMP2抗原；此单克隆抗体的亚类为IgG2a/κ。 结论：已获得的杂交瘤细胞株能稳定分泌目的单克隆抗体；免疫组化方法表明制备的单克隆抗体能识别LAMP2抗原，为更深入地研究LAMP2及其各亚型的生物学功能奠定了基础，也为实验室后期制备LAMP2抗原的ELISA试剂盒准备了条件。
【关键词】：LAMP2 多肽 单克隆抗体
【学位授予单位】：延安大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R392
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 引言8-15
• 材料和方法15-23
• 结果23-25
• 讨论25-26
• 结论26-27
• LAMP2 的最新研究进展27-32
• 参考文献29-32
• 自噬与肿瘤32-37
• 参考文献35-37
• 致谢37-38
• 攻读硕士学位期间发表的文章38

【共引文献】

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 董志武;血管内皮细胞自噬的调控及膜联蛋白A7促进内皮细胞自噬作用的研究[D];山东大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 朱宇;抑制自噬对压力超负荷大鼠心肌肥厚以及心脏收缩功能的影响[D];苏州大学;2009年

本文编号：1067330