ASIC3在痒觉感受中的作用

发布时间：2017-10-23 23:21

  本文关键词：ASIC3在痒觉感受中的作用

  更多相关文章： 酸敏感离子通道 痒觉 SL-NH_2 脱敏 非质子配体感受域

【摘要】：酸敏感离子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)是广泛分布于中枢和外周神经系统的一类由细胞外质子和非质子配体激活的非选择性阳离子通道。哺乳类动物目前已知有四种ASIC基因,编码至少六种亚基,以同源或异源三聚体形式组成功能性通道。ASIC3主要在外周感觉神经元和非神经细胞表达,在机械感受、痛觉感受中发挥重要作用,但其是否参与痒觉感受尚不清楚。利用ASIC3基因敲除小鼠模型和行为学分析,我们发现ASIC3在酸性条件下可增强多肽致痒剂SL-NH_2导致的痒觉行为。电生理研究显示SL-NH_2可减慢ASIC3通道激活后的脱敏过程,从而增强通道的活性。SL-NH_2对ASIC的调控作用具有亚基选择性,只对ASIC3组成的同聚体或异聚体有调控作用。多肽合成与结构-活性分析结果表明SL-NH_2多肽链上的精氨酸残基以及ASIC3通道上非质子配体感受域中Glu-79和Glu-423对该调控作用至关重要,替代其中任一氨基酸残基都几乎完全取消SL-NH_2对ASIC3脱敏的作用。小鼠对具有不同SL-NH_2受体活性和ASIC3脱敏作用的多肽的致痒反应结果表明酸性条件下SL-NH_2的致痒作用的增强依赖于ASIC3,与SL-NH_2受体无关。我们的研究证实了ASIC3参与酸性条件下对SL-NH_2的致痒作用的调控,提出SL-NH_2通过减慢ASIC3通道的脱敏,从而增强酸性条件下SL-NH_2的致痒作用的新型痒觉感受调控机制。我们的研究成果将有助于寻找新的控制痒觉的临床方案。
【关键词】：酸敏感离子通道 痒觉 SL-NH_2 脱敏 非质子配体感受域
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R339.1
【目录】：

• 摘要5-6
• abstract6-11
• 总论11-13
• 本文拟解决的科学问题11
• 研究目的和意义11-12
• 研究内容12-13
• 第一章 ASIC3调控小鼠痒觉感受13-54
• 1.1 摘要13
• 1.2 绪论13-25
• 1.2.1 痒觉的分类与痒觉信号的产生13-14
• 1.2.2 致痒剂与痒觉受体14-19
• 1.2.3 痒觉和痛觉信号的区分19-21
• 1.2.4 痒觉信号在中枢神经系统中的传导21-24
• 1.2.5 痛觉感受器在痒觉感受中的作用24-25
• 1.3 实验材料和方法25-28
• 1.3.1 实验动物和痒觉行为实验25
• 1.3.2 小鼠DRG神经元的分离和培养25-26
• 1.3.2.1 盖玻片的处理和包被25-26
• 1.3.2.2 背根神经节细胞的分离和培养26
• 1.3.3 细胞培养与转染26-27
• 1.3.4 电生理记录27-28
• 1.3.4.1 溶液的配制27
• 1.3.4.2 给药系统27
• 1.3.4.3 膜片钳记录27-28
• 1.3.5 试剂和数据分析28
• 1.4 实验结果28-37
• 1.4.1 致痒剂对ASIC3的直接作用28-30
• 1.4.2 致痒剂对ASIC3的调控作用30-33
• 1.4.3 ASIC3介导酸性条件下SL-NH_2诱导的痒觉增强33-35
• 1.4.4 SL-NH_2诱导的痒觉依赖于TRPA1通道的开放35-37
• 1.5 讨论37-39
• 1.6 参考文献39-54
• 第二章 SL-NH_2结合到ASIC3非质子配体感受域调控通道脱敏54-102
• 2.1 摘要54
• 2.2 绪论54-61
• 2.2.1 ASICs的分布与功能55-56
• 2.2.2 ASICs结构与门控56-60
• 2.2.3 ASICs脱敏及调控60-61
• 2.3 实验材料和方法61-63
• 2.3.1 小鼠DRG神经元的分离和培养61
• 2.3.2 细胞培养与转染61
• 2.3.3 突变体质粒构建61-62
• 2.3.4 电生理记录62-63
• 2.3.5 试剂和数据分析63
• 2.4 实验结果63-87
• 2.4.1 SL-NH_2调控ASIC3脱敏的浓度依赖性63-66
• 2.4.2 SL-NH_2调控ASIC3脱敏的p H依赖性66-69
• 2.4.3 持续酸化条件下SL-NH_2对ASIC3的调控69-71
• 2.4.4 SL-NH_2对ASIC3的调控不依赖于胞内信号通路71-73
• 2.4.5 非质子配体感受域介导SL-NH_2对ASIC3的调控73-76
• 2.4.6 SL-NH_2调控ASIC3脱敏的关键氨基酸76-81
• 2.4.7 SL-NH_2对ASICs的调控具有亚基选择性81-84
• 2.4.8 SL-NH_2调控DRG神经元上酸诱导的电流的脱敏84-87
• 2.5 讨论87-90
• 2.6 参考文献90-102
• 第三章 ASIC3的调控对痒觉感受的影响102-126
• 3.1 摘要102
• 3.2 绪论102-107
• 3.2.1 ASICs功能调控102-104
• 3.2.2 ASICs在外周神经系统中的功能104-105
• 3.2.3 ASICs在中枢神经系统中的功能105-107
• 3.3 实验材料和方法107-108
• 3.3.1 实验动物和痒觉行为实验107
• 3.3.2 小鼠DRG神经元的分离和培养107
• 3.3.3 细胞培养与转染107
• 3.3.4 电生理记录107
• 3.3.5 试剂和数据分析107-108
• 3.4 实验结果108-114
• 3.4.1 ASIC3脱敏的调控影响痒觉感受108-110
• 3.4.2 对ASIC3的调控影响致痒剂诱导的痒觉感受110-112
• 3.4.3 ASIC3调控SL-NH_2诱导的痒觉依赖于ASIC3的激活112-114
• 3.5 讨论114-115
• 3.6 参考文献115-126
• 第四章 全文总结与研究展望126-130
• 4.1 全文总结126-128
• 4.2 研究展望128-130
• 附录130-137
• 缩略词表130-135
• 仪器设备135-137
• 致谢137-139
• 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果139
• 学术论文139
• 会议摘要139

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 ;Oxidative stress induces itch via activation of transient receptor potential subtype ankyrin 1 in mice[J];Neuroscience Bulletin;2012年02期

，

本文编号：1085901