大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体的构建与包装

发布时间：2017-10-24 06:33

  本文关键词：大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体的构建与包装

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【摘要】：目的构建大鼠少突胶质细胞转录因子1(Olig1)的慢病毒表达载体,并进行鉴定和包装。方法采用聚合酶链反应(PCR),分别以大鼠pEGFP-N3-Olig1表达质粒和pDsRed-monomer-N1为模板,扩增获得大鼠Olig1片段和红色荧光蛋白(RFP)片段。将两者进行PCR拼接获得Olig1-RFP片段,并与pLenti6.3-MCS-DEST载体连接,构建获得pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体,并进行酶切鉴定、测序。然后,将其与包装质粒混合后共转染HEK293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒。结果通过酶切鉴定、测序,证明pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体构建成功,且能够被高效地包装为病毒颗粒。结论成功建立大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达系统,为进一步研究Olig1的生物学作用提供了实验基础。
【作者单位】： 蚌埠医学院科研中心组织移植安徽省重点实验室;
【关键词】： 少突胶质细胞转录因子 慢病毒表达载体 包装 聚合酶链反应 大鼠
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81071268,81171465,81271363)
【分类号】：R373
【正文快照】： 少突胶质细胞转录因子1(oligodendrocytetranscription factor 1,Olig1)属于碱性螺旋-环-螺旋(basic-helix-loop-helix,bHLH)转录因子超家族,是近年来备受关注的一个转录因子,与少突胶质细胞的分化和成熟有关,在神经胶质细胞分化发育过程中发挥重要的调节作用[1]。在前期的研

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本文编号：1087511